使用SPR技术快速检测登革热患者血清ADE效应

蔡银凤　何思杰

【摘 要】目的：探討使用SPR技术快速检测登革热患者血清ADE效应的价值。方法：纳入2018年1月～2019年6月我院收治的疑是登革热患者200例，制备蛋白质芯片，检测血清样本，观察检测结果。结果：通过表面引发聚合反应，制备获得寡聚乙二醇高分子膜。通过microarray针点技术，获得蛋白质阵列芯片。通过SPR技术，检测蛋白质芯片性能。当浓度为6.7nmol/L的时候，IgG仍有明显的信号变化。通过检测后得出，样品0.5μL依然存在信号，经标准曲线对照后，对应的检测浓度为3.3nmol/L，IgM和NS1的检测浓度为3.3nmol/L和6.7nmol/L。通过SPR技术、酶联免疫法以及PCR检测，所有200份样本血清，阳性率分别为7.00%（14/200）、5.50%（11/200）、2.50%（5/200）。因此，SPR法的检测阳性率最高，不同方法对比，P<0.05，差异有统计学意义。结论：使用SPR技术快速检测登革热患者血清ADE效应的价值较高，值得临床推广。

【关键词】SPR技术;检测;登革热;血清ADE效应

【中图分类号】R455【文献标识码】A【文章编号】1005-0019（2019）22--01

登革热是由黄病毒属的登革热病毒经传播后引起的，是一种急性蚊传疾病，该病症也是热带、亚热带地区的一个严重的公共卫生问题。登革热的主要血清学标记物包括NS1、登革热IgG、IgM等，临床可通过胶体金法、酶联免疫法、免疫荧光法等进行检测，当然，各种方法都有其一定的局限性[1]。表面等离子共振仪（SPR）是一种新型的光学生物传感器，是比较理想的检测工具之一。本文研究了使用SPR技术快速检测登革热患者血清ADE效应的价值。汇报如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 纳入2018年1月～2019年6月我院收治的疑是登革热患者200例，患者均在发热次日或第3日就诊，其中，血清样本中，核酸检测阳性4例，IgG、IgM阳性10例。其中，男性130例，女性79例，年龄范围为7～58岁，平均年龄为（34.79±4.87）岁。采集所有样本血清2ml，进行检测。

1.2 主要仪器和试剂 SPR芯片;登革热重组抗原;NS1抗原;登革IgG阳性标本;登革IgM阳性标本。

1.3 方法 制备蛋白质芯片：在芯片表面组装引发剂单层，然后制备高分子膜，配置反应溶液。将芯片浸泡在10ml的EDC/NHS混合水溶液中活化30min。进行各抗体的点样。血清样本的检测：以PBS缓冲溶液为流动相，平稳基线后，加入血清样品、标准品，通过甘氨酸溶液再生芯片。对比基线差值，获得定量分析依据。

1.4 观察指标 观察检测结果。

1.5 统计学分析 数据中的计量数据用均数±标准差（）表示，计数数据用百分率（%）表示，使用SPSS 19.0进行数据处理，两个独立样本比较采取t检验与检验，P<0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 蛋白质芯片制备效果 通过表面引发聚合反应，制备获得寡聚乙二醇高分子膜。通过microarray针点技术，获得蛋白质阵列芯片。

2.2 蛋白质芯片性能检测 通过SPR技术，检测蛋白质芯片性能。当浓度为6.7nmol/L的时候，IgG仍有明显的信号变化。

2.3 登革热标准品检测 通过检测后得出，样品0.5μL依然存在信号，经标准曲线对照后，对应的检测浓度为3.3nmol/L，IgM和NS1的检测浓度为3.3nmol/L和6.7nmol/L。

2.4 临床样本的检测 通过SPR技术、酶联免疫法以及PCR检测，所有200份样本血清，在就诊第1d的时候阳性率分别为7.00%（14/200）、5.50%（11/200）、2.50%（5/200），在就诊第4d、第7d的时候阳性率分别为8.50（17/200）、6.00%（12/200）、3.00（6/200）。因此，SPR法的检测阳性率最高，不同方法对比，P<0.05，差异有统计学意义。具体见表1。

3 讨论

登革热是世界范围内的多发病，我国南方地区发病率较高，而且该病症存在明显的季节性[2-3]。。一旦爆发登革热，则将会对整个地区的社会活动和经济活动造成严重影响[4]。。因此，准确的诊断该病症，对于社会各个方面来说，都具有重要价值。

建立快速的疫情监测机制，严防疫情的爆发，十分重要，对于患者病情的及时控制和治疗效果的提高，都是十分重要的。本文研究结果显示，SPR技术在快速检测登革热患者方面，效果较好。黄热属病毒之间存在明显的交叉反应，多指标联合检测是十分必要的。通过表面化学的联合探讨，制备登革热检测蛋白质芯片，可以在复杂的血清中检测到其特异性物质，对于疾病的诊断和治疗，都是十分重要的。

总之，使用SPR技术快速检测登革热患者血清ADE效应的价值较高，值得临床推广。

参考文献

祝绯飞， 袁寒艳， 王芝敏， 等.2017年浙江省杭州市拱墅区登革热暴发疫情调查分析[J].疾病监测， 2019， 34（05）： 422-426.

范建华， 冯云， 朱进， 等.2017年云南省西双版纳州登革1型病毒暴发疫情的调查研究[J].疾病监测， 2019， 34（05）： 427-434.

中华医学会感染病学分会， 中华医学会热带病与寄生虫学分会， 中华中医药学会急诊分会.中国登革热临床诊断和治疗指南[J].传染病信息， 2018， 31（05）： 385-392.

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