一种过硫酸氢钾复合物粉的消毒性能评价

杨俊芸，黄恩龙，胡军，刘起军*

（1.四川省内江市食品药品检验检测中心，四川 内江 641000；2.四川恒通动保生物科技有限公司，四川 内江 641000）

过硫酸氢钾复合物粉以过硫酸氢钾为主要成分，辅以增效剂、稳定剂、表面活性剂和有机酸等辅料，含有效氯不低于10.0%。该产品具有强酸性，其pH值在2.5左右，可以杀灭多种病原菌，其代谢产物不会对人类和环境带来影响[1]；该产品还具有强氧化性，溶解后产生高能量、高活性的小分子自由基、活性氧等衍生物[2]，通过循环链式反应系统破坏细菌细胞膜的通透性，所产生的自由基等衍生物作用于DNA、RNA 的磷酸二酯键，干扰病原体DNA 和RNA 的合成[3-4]。过硫酸氢钾复合物粉也具有广谱性，既克服了H2O2等普通氧化剂氧化能力不强且具有选择性氧化的缺点，又避免了卤素类消毒剂有毒副产物生成而对人体健康有危害的风险。

“全卫效康”是四川某动保公司联合国内科研机构开发的一种长效过硫酸氢钾复合物粉消毒剂。为观察验证其消毒效果和方便临床使用，笔者开展了本次试验。

1 材料

1.1 药品

1.1.1 “全卫效康”（过硫酸氢钾复合粉），粉红色颗粒状粉末，有柠檬气味，有效氯含量不低于10.0%。四川某动保公司生产，批号：20190701。

1.1.2 “卫可”（过硫酸氢钾复合粉），粉红色颗粒状粉末，有柠檬气味，有效氯含量不低于10.0%。杜邦公司生产，批号：1706BA0210。

1.2 供试菌株 大肠杆菌（8099）、金黄色葡萄球菌（ATCC6538）、枯草芽孢杆菌黑色变种（ATCC9372），均由中国普通微生物菌种保藏管理中心提供。

1.3 标准培养基 普通肉汤培养基，普通琼脂培养基，参照药典[5]自配。

1.4 试剂 稀释液[6]：0.03 mol/L 磷酸盐缓冲液（PBS）、生理盐水、蒸馏水，自制；中和剂：0.5%硫代硫酸钠+1%吐温-80，用生理盐水稀释，121 ℃高压灭菌15 min。

1.5 试验菌悬液的制备[7]开封冻干菌种后，用普通肉汤溶化悬浮菌体，然后划线接种于适宜的琼脂培养基上，37 ℃培养18 h，选择典型的单个菌落进行传代培养，传至3 代后接种到适宜的普通肉汤培养基中，37 ℃培养24 h即得菌悬液。

2 方法与结果

2.1 中和剂选择试验

2.1.1 试验菌 大肠杆菌与金黄色葡萄球菌。将制备好的菌悬液用平板计数法进行细菌计数，使试验菌含菌量为1×106～1×107CFU/mL。

2.1.2 方法步骤 试验共设6个组，第1组：消毒剂+菌悬液；第2 组：（消毒剂+菌悬液）+中和剂；第3 组：中和剂+菌悬液；第4 组：（消毒剂+中和剂）＋菌悬液；第5 组：PBS+菌悬液；第6 组：未接种菌的培养基对照。按顺序分别在1～5 组加入相对应的消毒剂（0.25%）、中和剂、消毒剂与中和剂混合液（1∶9）、PBS 各4.5 mL，菌悬液均为0.5 mL，除第2、4 组前二者混合作用10 min 再加入第三者外，其余各组均混合作用10 min，再取出0.5 mL，用生理盐水等量稀释后，做细菌培养并计数。试验重复3次。

2.1.3 结果判定 当第6 组不长菌，其他各组间细菌数相差不超过10%，第1 组不长菌或长菌数远少于第2组，第2组长菌数超过100 CFU/mL，根据中和剂鉴定试验标准判为所选的中和剂浓度。

2.1.4 试验结果 0.5%硫代硫酸钠+1%吐温-80为所选中和剂浓度，且中和剂及其产物对细菌及培养基无影响。结果见表1。

表1 中和剂选择试验结果

2.2 细菌定量消毒试验[8-9]

2.2.1 方法步骤 将菌液进行活菌计数，并用稀释液稀释成含菌量为5×105～5×106CFU/mL 的菌悬液。将消毒剂用灭菌蒸馏水稀释成3 个不同浓度，各吸取4.5 mL 分别加入3 个试管内，置于20±2 ℃水浴中。待试管内液体温度与水浴温度平衡后，在3个试管中分别加入上述配好的0.5 mL菌悬液，混匀并开始记时。分别于4 个不同间隔时间，各取0.5 mL 菌液混合液移入4.5 mL 中和剂中，混匀，中和10 min，作适当稀释后进行活菌计数。阳性对照以洗脱液代替消毒液，按上述步骤同时进行。

2.2.2 结果判断 按不同稀释度推算出每个样本存活菌数（CFU/mL），按下式计算杀灭率：

式中，Nt为空气中细菌的自然消亡率；V0与Vt分别为对照组试验开始前和试验过程中不同时间点的空气含菌量；V0′与Vt′分别为试验组消毒处理前和消毒过程中不同时间点的空气含菌量；Kt为消毒处理对空气中细菌的杀灭率，应达到99.9%以上。

2.2.3 试验结果“全卫效康”（1∶400）能在10 min 内杀灭大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和枯草杆菌黑色变种芽孢，杀菌效果与“卫可”（1∶400）相同。结果见表2。

表2 两种产品不同浓度下的定量消毒试验结果

2.3 硬水拮抗试验

2.3.1 方法步骤 将菌液进行活菌计数，并用稀释液稀释成含菌量为5×105～5×106CFU/mL 的菌悬液。将消毒剂用硬水稀释成3 个不同浓度，各吸取4.5 mL分别加入3个试管内，置于20±2 ℃水浴中。待试管内液体温度与水浴温度平衡后，在3 个试管中分别加入上述配好的0.5 mL 菌悬液，混匀并开始记时。分别于4 个不同间隔时间，各取0.5 mL 菌液混合液移入4.5 mL 中和剂中，混匀，中和10 min，作适当稀释后进行活菌计数。阳性对照以洗脱液代替消毒液，按上述步骤同时进行。

2.3.2 结果判断 结果判断同2.2.2。

2.3.3 试验结果“全卫效康”和“卫可”都有很强的抗硬水能力，实验条件下“全卫效康”和“卫可”的抗硬水能力一致，硬水对两种消毒剂杀菌能力的影响不显著。结果见表3。

表3 硬水条件下“全卫效康”和“卫可”的杀菌性能

2.4 有机物保护试验[10]

2.4.1 方法 以无菌小牛血清作为有机物代表，在菌悬液中加入小牛血清，使其浓度为10%。通过定量杀菌试验进行测定，各组试验至少重复3次，计算不同浓度有机物存在时的杀菌率，并作比较。

2.4.2 试验结果“全卫效康”和“卫可”都有很强的抗有机物能力，实验条件下，“全卫效康”（1∶400）的抗有机物能力优于“卫可”（1∶400），有机物对两种消毒剂消毒效果的影响不明显。结果见表4。

表4 有机物条件下“全卫效康”和“卫可”的杀菌性能

2.5 能量试验[10]

2.5.1 方法步骤 将两种消毒剂用标准硬水稀释成3个浓度的消毒液，每个浓度分装3 mL于无菌试管内，然后分别于第0、10、20 min（第1、2、3次）加入1 mL菌悬液，并于第8、18、28 min分别取20 μL混合液于含中和剂的营养肉汤培养基试管中，一式5份；取2支含5 mL中和产物的营养肉汤管，向其中加入5 μL试验菌液作为阳性对照。将以上各试验组与对照组的样本试管置于37 ℃培养48 h，观察是否有细菌生长。

2.5.2 结果判定 在第1次和第2次加入菌悬液的5 管样本中，有2 管或2 管以上不长菌的消毒剂浓度作为最低合格浓度[6]。

2.5.3 试验结果“全卫效康”和“卫可”的杀菌效果接近，对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的最低合格浓度为0.5%。结果见表5。

表5 "全卫效康"和"卫可"的能量性能测试对比

2.6 过硫酸氢钾复合物粉的临床快速鉴别方法

2.6.1 闻气味 将药品溶于水中，应无氯气释放或无刺激性气味；加入大量氯化钠，应释放出刺激性气味（氯气）。

2.6.2 观颜色 将药品兑水，观察是否能够长时间不褪色；保持时间越长，说明配方组分越稳定。

3 小结

过硫酸氢钾复合盐兼顾了氯制剂、氧化剂、酸制剂的三重功效，杀菌谱广，持续时间长，副作用小，安全性高[11-12]。该消毒剂成分复杂，主要包括过硫酸氢钾、硫酸氢二钾和硫酸钾等复合物，属于以硫酸根自由基为基础的强氧化活性杀菌成分。过硫酸氢钾复合盐易溶于水，一旦溶于水即产生丰富的活性氧、羟基自由基等高能量、高活性的小分子物质，能对各种微生物进行破坏和杀灭。

本试验表明，“全卫效康”在定量杀菌、抗硬水和抗有机物等方面与原研单位生产的过硫酸氢钾复合物粉（卫可）基本一致，在某些方面（抗有机物等）甚至优于“卫可”。