液相色谱-三重串联四级杆质谱法测定茶叶（金骏眉）中柠檬黄含量的研究

□ 黄 颖 赣州市产品质量监督检验所

1 前言

对于市面上非常受欢迎的茶叶金骏眉，一些不良商家抓住一般消费者误认为“金骏眉”就应该是金色为主的心理误区，添加柠檬黄着色，严重伤害了消费者的健康，以及茶叶的品质口感。在社会上造成了极大的影响。

目前检测柠檬黄的常用方法有薄层色谱法、液相色谱法等方法，但在实际工作中，由于复杂的基质对方法和仪器的干扰，导致薄层色谱法、液相色谱法在测量一些低含量的样本时有很大的不确定性，容易出现假阳性的事例。为了能够精准测量低含量的样本，本文采用目前最前沿的检测技术——液相色谱-三重四级杆串联质谱测定法进行检测。利用碎片离子和多重反应监测手段进行精准的定性和准确的定量。

2 材料与方法

2.1 仪器与试剂

安捷伦1260液相色谱-G6400质谱联用仪器（美国Agilent公司）；分析天平（梅特勒-托利公司）；Milli-Referrence超纯水机（密理博中国有限公司）；TG16离心机（长沙英泰仪器有限公司）；柠檬黄标准品（纯度≥99%）；甲醇（色谱纯，美国Fisher公司）；甲酸（色谱纯，美国Fisher公司）乙酸铵（优级纯，百灵顿威化学科技有限公司）0.45 μm微孔过滤膜（天津津藤公司）。

2.2 实验方法

2.2.1 样品处理

取粉碎的茶叶金骏眉样品3 g于100 mL烧杯中，加水25 mL，超声30 min，转移至离心管中，定容至50 mL，5 000 r/min离心5 min，取上清液经微孔滤膜过滤后检测。

2.2.2 液相色谱-三重四级杆串联质谱条件

（1）色谱条件

色谱柱：Agilent C18柱（2.1 mm×150 mm，5 μm）柱温：30 ℃；进样量：10 μL；流动相：A甲醇+B乙酸铵溶液（10 mmol/L）梯度洗脱程序见表1。

（2）质谱条件

离子源：电喷雾离子源（ESI）；扫描方式：多反应监测（MRM）扫描；雾化气：高纯氮10 L/min；碰撞气：高纯氮，流量为6 psi；离子源温度：350 ℃。

2.2.3 结果计算

结果的计算公式见式（1）。

式（1）中：W—试样中柠檬黄含量，单位为微克每千克（μg/kg）；C—进样液中柠檬黄的质量浓度，单位为微克每升（μg/L）；M—试样质量，单位为克（g）；V—试样定容体积，单位为毫升（mL）。

3 条件优化与结果计算

3.1 定性定量离子的确定

首先确定母离子，通过二级扫描选定定性和定量离子，通过优化碰撞能、Fragmengter电压等参数确保所选定性和定量离子的丰度较强。具体质谱参数见表2。

3.2 线性范围与检出限

在5～500 μg/kg线性范围内相关系数为0.999 5，检出限为1.0 μg/kg。

表1 梯度洗脱表

表2 柠檬黄质谱定性定量离子对

3.3 检测结果及回收率

对加标10、50、100 μg/kg样本的检测结果分别为9.8、49、102 μg/kg，计算回收率分别为98%、98%、102%。回收率在合理区间。

4 结论

通过对质谱条件的优化，加标样品回收率为98%～102%，检测结果准确，该方法前处理简单、快速，检出限低，抗干扰能力强，在复杂的基质中能够得到良好的结果。