饲料中添加发酵桑叶对草鱼生长性能、血清生化指标的影响

丁国玉，宋维彦，姚志刚

（日照职业技术学院，山东日照 276826）

目前我国水产养殖规模已位居世界前列，但仍存在养殖饲料原料供应不足和养殖产量不足以满足社会需要等问题，如远洋优质鱼粉资源的短缺导致国内水产饲料业主要原料仍得不到满足（Ayyappan和Ahamad Ali，2007），从而不得不依靠非传统的动植物资源蛋白质。另外，我国是世界上最大的桑树种植国，有极大的桑叶资源优势和开发前景（王芳等，2015）。桑叶中富含多种天然活性物质（黄酮、单宁、多糖、植物甾醇和脱氧野尻霉素），能维持动物的正常生长发育，提高机体免疫机能，具有抗氧化、抗衰老功能，还能维持脂肪和糖类代谢，有利于动物抗病和保健（吴浩和孟庆翔，2010）。经过微生物的一定工艺处理后所得的发酵桑叶具有促进营养物质消化吸收的作用，同时具有促进畜禽生长、调节营养物质代谢等作用（许镨文，2012）。国内外以往研究表明，饲料中添加发酵桑叶能显著提高鱼类生长性能，并且能有效改善血脂、血糖水平，提高机体抗氧化能力（沈黄冕等，2016）。

作为我国淡水养殖最多的鱼类，2017年全国草鱼养殖产量超590万t（2018渔业年鉴）。目前有关草鱼饲料中添加发酵桑叶的报道还比较少见，本试验通过对比不同发酵桑叶添加量对草鱼幼鱼生长性能，营养组成和血清生化方面的影响，旨在探讨发酵桑叶在草鱼饲料中的添加效果，希望能为发酵桑叶在草鱼饲料中的相关应用提供数据参考。

1 材料与方法

1.1 试验饲料 试验用发酵桑品均采摘于同年6～8月份，晾干后粉碎制成桑叶粉（40目）。于试验室接种植物酵母菌、乳酸菌、芽孢杆菌和固氮菌发酵48 h，60℃烘干粉碎后制得。试验用桑叶及发酵桑叶的基础营养成分含量如表1。

表1 试验桑叶营养物质组成 %

按饲料配方设计添加0（对照组）、2.5%、5.0%、7.5%和10.0%的发酵桑叶，配制成5组等氮等能试验饲料（粗蛋白质32.14%，粗脂肪4.95%）（表2）。所有饲料原料粉碎后过80目筛，制成1.5 mm粒径颗粒饲料，风干后-20℃保存备用。

表2 试验饲料组成及相关营养水平（干物质） %

1.2 试验设计和饲养管理 试验鱼选用同一批培育的体重为（15.01±0.12）g的草鱼450尾，随机分为5组，每组3个重复，每个重复30尾鱼。在水缸（320 L）中饲养50 d，日投饲量为体重的2%～5%，每天 07：00、11：30、17：30各投喂1次。养殖所用曝气自来水，试验期间水温为（25.1±2.5）℃，pH为7.4±0.4，溶氧含量为5～6 mg/L，氨氮含量＜0.40 mg/L。

1.3 样品制备与分析 饲养50 d后，禁食24 h称重，按每个重复取3尾试验鱼用于营养组成测定；取5尾用于静脉取血，血样于8000 r/min、4℃条件下离心5 min，收集血清，-20℃保存，24 h内测定完成相关生化指标。饲料抽样及全鱼样品相关营养指标参照胡静等（2016）测定方法。血清葡萄糖、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、甘油三酯、总胆固醇均采用试剂盒测定（南京建成生物工程研究所）。

1.4 数据处理 采用SPSS 20.0进行单因素方差分析（one-wayANOVA），采用Duncan’s进行多重比较。所有试验数据以“平均值±标准差”表示，差异显著水平为P＜0.05。

2 结果分析

2.1 饲料中添加发酵桑叶对草鱼生长性能的影响 发酵桑叶添加量对草鱼幼鱼存活率无显著影响（P＞0.05），试验各组存活率均保持在95%以上。饲料中添加发酵桑叶使草鱼生长性能（增重率、特定生长率和饲料效率）产生显著变化（P＜0.05），随着添加量增加，草鱼生长性能逐渐增大，当添加量为7.5%时生长性能最大，且显著高于对照组（P＜0.05），其他各添加组与对照组无显著差异（P＞0.05）。当发酵桑叶添加量达到10%时草鱼生长性能出现下降趋势（表3）。

2.2 饲料中添加发酵桑叶对草鱼营养组成的影响 饲料中添加发酵桑叶对全鱼水分和粗蛋白质含量未产生显著影响（P＞0.05）；当添加量达到10%时，试验草鱼的全鱼灰分含量最大（P＜0.05）；随着添加量增大，全鱼和肝脏的粗脂肪含量出现下降趋势，当添加量达到10%时，两者粗脂肪含量都最小（P＜0.05）；各添加发酵桑叶的试验组草鱼肌肉的粗脂肪含量未出现显著变化（P＞0.05）（表4）。

表3 不同发酵桑叶添加量对草鱼生长性能的影响

2.3 饲料中添加发酵桑叶对草鱼血清生化指标的影响 由表5可知，发酵桑叶对血清葡萄糖含量无显著差异（P＞0.05），添加发酵桑叶可以降低总胆固醇、甘油三酯、谷草转氨酶、谷丙转氨酶、低密度脂蛋白含量，最小值均出现在发酵桑叶添加10%组，且随着发酵桑叶添加量的增加，各血清生化指标均出现下降趋势。

表4 不同发酵桑叶添加量对草鱼营养组成的影响

表5 不同发酵桑叶添加量对草鱼血清生化指标影响 mmol/L

3 讨论

本研究中添加发酵桑叶对草鱼生长效果和饲料利用率等方面有一定促进作用，这与以往对印度囊鳃鲶（Mondal等，2011）、巴塔野鲮（Mondal等，2012）和南亚野鲮（Kaviraj等，2013）的研究结果相似，区别于对罗非鱼、大口黑鲈对生长抑制的研究结果。这可能与饲料中发酵桑叶添加种类和含量、试验对象、饲料配方等因素有关。由于桑叶发酵后能有效改善适口性，提高饲料利用率（任元元等，2016），这在一定程度上提高了草鱼体生长性能，而添加过多发酵桑叶也会有抑制草鱼生长的趋势。这与以往在罗非鱼和一些畜禽饲料中添加过多发酵桑叶得出的结论一致（陈文燕等，2015；章学东等，2012）。

桑叶发酵后的抗营养因子减少，活性成分显著增加（Feng等，2007）。这可能是本试验中添加发酵桑叶后显著降低鱼体和肝脏脂肪含量，以及肝脏指数的原因。本研究结果中添加发酵桑叶后还在一定程度上降低了草鱼血清中总胆固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白几个反应脂类代谢的指标，这与以往在罗非鱼（陈文燕等，2015）和大口黑鲈（赵鹏飞等，2016）等水产动物的研究一致，从而进一步佐证了发酵桑叶能对草鱼及大多数水产动物的脂类代谢起调节作用。

本试验结果发现，添加发酵桑叶后显著减少了草鱼肝脏脂肪含量，监测肝功能的两种酶（谷丙和谷草转氨酶）活性也出现显著降低，这进一步证实了发酵桑叶能改善试验对象肝脏健康。

桑叶中含有生物碱、DNJ（1-脱氧野尻霉素）以及多种多糖等活性成分，这些活性成分一方面能抑制葡萄糖在动物肠道的吸收（李有贵等，2010），另一方面黄酮类和生物碱能有效调控肝细胞中糖代谢（Hong等，2004），从而实现调节血糖功效。本试验结果显示，发酵桑叶可降低草鱼的血糖含量，这也再次证明发酵桑叶在鱼类血糖方面的调节作用。

因此，本试验中饲料添加不超过7.5%发酵桑叶不会影响草鱼的生长和饲料利用效率，同时添加发酵桑叶有助于草鱼脂类代谢和肝脏健康。