北京2183例女性高危型HPV感染状况分析

武利涛，郭 楠，李宝萍，王金霞，张 梅，尚 娥，杨郝亮，杨曦明

(北京中医药大学东直门医院 检验科，北京100700)

人乳头瘤病毒(HPV)是一种常见的性传播DNA病毒，国际癌症研究机构(IIARC))通过对9个国家的11次病例对照研究资料进行分析，将HPV6,11,40,42,43,44,54,61,70,72,81,cp6108等12种划分为低危型，主要引起泌尿生殖道、肛周皮肤外生性湿疣类病变、扁平湿疣类病变和低度子宫颈上皮内瘤样变(CIN)，多表现为一过性，可以自然逆转；而高危型主要为HPV16，18，31，33，35，39，45，51，52，56，58，59，68，73，82等15种亚型，主要引起CINⅡ至CINⅢ级病变和宫颈癌的发生,持续高危型HPV感染的CINⅠ级也容易进行性发展为CINⅡ-Ⅲ[1]。目前HPV检测已经广泛用于宫颈癌的早期筛查，通过筛查，可以及时发现HPV感染，确认后可以及时进行治疗，从而预防宫颈癌。由于HPV亚型较多，并且有着明显的地区分布及年龄阶段的差异[3,4]，所以本研究对2017年来我院就诊的患者高危型HPV检测数据进行回顾性分析，以了解北京高危HPV亚型在女性患者中的感染状况，为HPV防治提供参考。

1 对象与方法

1.1 研究对象

2017年1月1日-12月31日来我院检测高危HPV女性患者共2187例，年龄17-84岁，其中育龄女性(15-49岁)1584例，绝经期女性(≥50岁)599例。

1.2 纳入标准与排除标准

纳入标准：有性生活，非月经期，采样前24 h内无性生活、无阴道灌注、检查， 3天内无阴道内用药者。排除标准：无性生活、孕妇、子宫切除者。

1.3 方法

1.3.1标本采集 用无菌生理盐水棉球洗去宫颈外分泌物，再用无菌棉拭子插入宫颈内，停5秒钟后旋动棉拭子采取宫颈分泌物，将棉拭子置入无菌玻璃管，密闭送检。

1.3.2实验及结果判定 采用荧光实时定量聚合酶链反应(PCR)法，使用上海之江科技有限公司高危型人乳头瘤病毒(HPV)分型核酸测定试剂盒(荧光PCR法)对15种HPV亚型(16型、18型、31型、33型、35型、39型、45型、51型、52型、56型、58型、59型、68型、66型、82型)进行检测。实验按试剂盒提供的说明书进行操作。

1.3.3统计学分析 采用SPSS19.0软件进行统计学分析，采用χ2检验方法，P<0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 高危型HPV的总检出率及亚型分布

在2183例样本中，高危型HPV检出407例，总检出率18.61%，15个高危亚型均有检出，由于存在多型复合感染，407例阳性患者中共检出HPV亚型537例次，检出最多的5种亚型依次为HPV52、51、16、58、39。407例HPV阳性患者中，76.66%(312/407)的阳性样本为一型感染，23.34%(95/407)的阳性样本为多型感染。95例多型感染中，二重感染72例，三重感染14例，四重感染6例，五重感染3例。高危亚型检出情况见表1、分布情况图1。

表1 HPV各亚型的检出情况

图1 HPV各亚型比例分布图

2.2 高危型HPV年龄分布情况

按照ACOG推荐的宫颈癌筛查指南，≤25岁和≥66岁单独两组，26-65期间每10年一个阶段，本研究将研究对象按年龄分为6组，结果显示随着年龄增大，感染率曲线先下降后回升，≤25岁感染者阳性率最高，25岁以后逐渐下降，36-65岁阳性率处于较低水平，66岁以后阳性率有回升趋势。见表2、图2。

表2 不同年龄阶段高危型HPV感染情况

2.3 育龄期女性和绝经期女性高危HPV感染及分布情况

根据女性生理发展特点，本研究将所有HPV阳性女性分为育龄期女性(15-49岁)和绝经期女性(≥50岁)，结果显示育龄期女性高危HPV总阳性率低于绝经期女性，育龄期女性高危HPV亚型前5位为：HPV52、16、51、58、39亚型；绝经期女性高危HPV亚型排在前5位的是：52、51、58、66、56亚型。见表3、表4。

表3 育龄期和绝经期女性高危HPV感染情况

表4 育龄期女性和绝经期女性高危HPV亚型的分布情况

3 讨论

宫颈癌是全球女性中位于第四位的恶性肿瘤，全世界每年新发病例超过50万，全球平均每两分钟就有一个人死于宫颈癌。在我国，宫颈癌是我国第二大女性恶性肿瘤，每年的新发病例高达13万，严重威胁我国女性的健康[5-7]。HPV感染是引起宫颈癌发生的最主要危险因素和必要条件，研究表明，机体感染HPV病毒后，免疫系统会发生改变，产生大量的炎症因子和细胞因子，造成机体出现炎症反应和组织损伤，可以引起人体从黏膜增生到恶性肿瘤的多种病变[8]。高危型HPV感染作为引发宫颈癌的主要因素，一直是研究人员关注的热点，2012年一项纳入中国37个城市超过12万人的人群筛查结果显示总的HPV感染率为21.07%[9]。另有研究显示广州地区的HPV感染率为28.43%，高危型HPV感染率为27.85%、深圳地区HPV感染率为15.9%[10,11]，云南省的HPV感染调查研究显示，西南地区HPV总感染率为19.9%、西北地区为18%、东南地区为13.3%、最低为中部地区12.9%[12]，山西地区HPV感染率达25.86%[13]，许晓跃等[14]报道北京丰台区HPV感染率为20.80%，本研究中北京地区的高危HPV总检出率为18.61%，低于上述报道中全国的总感染率及广州、云南、山西等地。

据IARC统计，HPV16、18型是世界范围内宫颈癌最常见的HPV感染亚型，两种型别的感染率分别为57.4%和16.6%，HPV45、31、33、52、58型随后[15,16]。但有研究对2000年以来pubmed上发表的文献进行meta分析，发现中国最常见5种高危HPV型别分别是16、18、58、52和33[17]，尤其是HPV52、58感染在我国南方地区比较常见[18,19]，但45型不常见。本研究发现北京地区检出最多的5种高危HPV型别为52、51、16、58、39，而这是由于受地域、气候、文化、习惯等各方面的影响，HPV的感染率和型别分布在不同人群和地区存在明显差异。

除了地域对高危HPV感染的影响外，年龄也是一个重要的影响因素。本研究中随着年龄增长，高危HPV感染率呈U形，25岁以下人群感染率最高，跟这个年龄段的女性性生活频繁，且自我保护意识不是很强，宫颈抵抗力较弱有关[20]，25岁以后到45岁阶段感染率逐渐下降，45-65岁的感染率平稳地维持在较低水平，这部分人群性伴侣比较固定，性生活相对较少，且身体机能比较稳定，所以感染率水平较低，但需要警惕的是，65岁以上人群的高危HPV感染率出现升高趋势，这可能由于老年人免疫力低下，雌激素水平较低导致的，所以要重视年龄低于25岁或高于65岁这两类人群的宫颈癌早筛工作。

本研究通过对育龄期和绝经期的女性的高危HPV感染率进行统计发现，北京地区的高危HPV感染率低于全国的总感染率，且型别分布与全国的型别分布略有不同；高危HPV感染率随年龄增长呈U形分布，需重视≤25岁及≥65岁两类人群的筛查工作；育龄期女性的高危HPV感染率低于绝经期女性，但宫颈癌发病风险高于绝经期女性。绝经期女性的感染率比育龄期要高，除了上面说到的免疫力和激素水平的原因，还有一种观点认为绝经期妇女出现感染高峰是由于HPV的持续性感染或HPV感染的复发所引起，可能并非新发HPV感染[21]，且二者亚型分布也有所不同，育龄期HPV16、39的比例高于绝经期，而绝经期66、56的比例高于育龄期，HPV52、51、58的比例在两组都较高。宫颈癌的致病因素中，最重要的是HPV16/18，所以从本研究结果看，育龄期女性虽然高危型HPV感染率低于绝经期女性，但是宫颈癌发病风险高于绝经期女性。

综上所述，HPV感染率及分型调查可为不同地区探索HPV相关疾病的防治策略提供依据，特别是HPV疫苗于近年在中国上市，本研究也可为女性疫苗接种选择提供参考依据，对维护女性健康有重大意义。