肉蔻-5味丸对慢性抑郁模型大鼠血清IL-1和IL-6含量的影响

呼日乐巴根　乌兰其其格　莲花　宏梅　乌日罕　木奇　佟海英

【摘 要】 目的：观察肉蔻-5味丸对慢性抑郁模型大鼠血清IL-1和IL-6含量的影响，探讨其抗抑郁机制。方法：60只雄性SD大鼠，随机分为正常组、模型组、西药组（盐酸氟西汀0.0036g/kg），蒙药低、中、高剂量组（分别给予肉蔻-5味丸0.2、0.4、0.8 g/kg），每组10只。建立CUMS模型，同时ig给药，每天1次，连续给药21d。以体重变化、糖水消耗实验进行评价模型，ELISA检测大鼠血清IL-1和IL-6的含量。结果：实验过程中模型组大鼠体重增长较缓慢，糖水消耗量降低，应激结束时，与正常组比较模型大鼠血清IL-1和IL-6的含量明显升高，而盐酸氟西汀和蒙药肉蔻-5味丸均可不同程度改善模型大鼠抑郁状态。与模型组比较，给予盐酸氟西汀和蒙药肉蔻-5味丸高、中剂量组大鼠血清IL-1和IL-6含量明显降低（P<0.05）;低剂量组大鼠血清IL-1和IL-6含量有降低趋势，但无统计学意义。结论：蒙药肉蔻-5味丸可通过抑制模型大鼠血清IL-1和IL-6含量升高发挥抗抑郁作用。

【关键词】 肉蔻-5味丸;抑郁模型;大鼠;IL-1;IL-6

【中图分类号】R285.5 【文献标志码】 A【文章编号】1007-8517（2019）15-0009-04

抑郁症（Major Depressive Disorder，MDD）是一种患病率、复发率、自杀率较高的慢性精神障碍疾病，带来严重社会经济负担，已成为世界范围内最有负担的疾病，其致残率超过缺血性心脑血管疾病，将成为全世界第二大致残疾病[1-2]。目前，尽管研发有很多抗抑郁药，但仍存在疗效不佳或反应差异、长期服用出现毒副作用以及停药后复发等不令患者满意的问题[3-4]。民族医药其独特的诊疗方法及药物，在治疗疑难杂病方面发挥着一定作用，日益受到抑郁症研究者的关注。蒙医验方肉蔻-5味丸是蒙医临床上常用于治疗“赫依”病、心烦失眠、心神不安、心跳、心悸、胸闷气喘、心绞痛等心血管疾病及抑郁、焦虑等病症[5-6]，并疗效显著。本药方出自于蒙医经典著作《蒙医成方集》，在《蒙医百科全书·蒙医学》和《卫生部药品标准·蒙药分册》均有记载，由肉豆蔻、广枣、荜茇、土木香、木香等5种天然药物组成。前期研究已发现其能够改善慢性抑郁模型大鼠抑郁状态[7-8]。研究以蒙医验方肉蔻-5味丸为受试药，利用慢性轻度不可预知性应激（Chronic unpredictable mild stress，CUMS）结合孤养方法，建立CUMS大鼠模型，并给药干预后观察其对CUMS大鼠血清白细胞介素1（interleukin，IL-1）和白细胞介素6（interleukin，IL-6）含量的影响，从而探讨其抗抑郁作用途径。

1 材料

1.1 动物 清洁级SD雄性大白鼠，体质量为180～220g，北京维通利华实验动物技术有限公提供，许可证号：SCXK（京）20140004。

1.2 受试药及试剂 肉蔻-5味丸（批号：Z15020881，内蒙古自治区库伦蒙药厂）;盐酸氟西汀胶囊（批号：H20073985，山西仟源制药股份有限公司）;水合氯醛（批號：20130401，天津市福晨化学试剂厂）;IL-1（批号：CSB-E08055r）、IL-6（批号：CSB-E04640r）等ELISA试剂盒均由武汉华美生物工程有限公司提供。

1.3 仪器 MULTISKAN MK3酶联免疫吸附仪（美国Thermo公司）;ST16R高速低温离心机（美国Thermo公司）;BSA124SCW电子天秤（德国Sartorius科学仪器有限公司）;DHG9145电热鼓风干燥箱（中国上海一恒科学仪器有限公司）;5mL真空采血管、采血针、手术刀、镊子等器材。

2 方法

2.1 分组及给药 将60只大鼠一周适应性饲养之后按体质量随机分为正常组、模型组、西药组、蒙药肉蔻-5味丸低、中、高剂量组等6组，每组10只。应激同时对各组大鼠进行ig给药，除正常组和模型组给予等量生理盐水外，西药组给予盐酸氟西汀3.6mg/kg，蒙药低、中、高剂量组给予0.2、0.4、0.8g/kg不同剂量的肉蔻-5味丸。每日固定时间给药1次，给药体积为1mL/100g，连续刺激21天，同时给药干预。

2.2 复制模型方法[9-10] 采取CUMS和孤养两种经典造模方法的配合使用，建立抑郁症动物模型。将正常组5只为一笼群养，不给予任何外界刺激，并自由饮水摄食。其余各组大鼠孤养，并每天给予不同刺激，且接受刺激尽量反差较大确保不可预知目的，应激源包括24h禁食禁水， 5min游泳4℃冷水， 5min放置45℃热环境，1min夹尾，15min高速水平震荡，24h潮湿垫料，12h昼夜颠倒等7种。各组大鼠每天接受随机安排的一种刺激，对一组大鼠不能连续接受同种刺激，且同种刺激最多使用3次。

2.3 体质量变化 每日给药时观察大鼠的一般状态，并称量大鼠体质量，记录统计造模前和造模后第14天、第21天之间的差异变化。

2.4 糖水消耗测试（sucrose preference test，SPT）     测试前对各组大白鼠适应性饮用1%蔗糖水48h，尽量避免产生其对新事物的恐惧感，以及避免饮水位置的偏爱，每日要调换一次饮水瓶的位置。测试时，先将大白鼠禁水4h后给予等体积或重量A和B两瓶水（A瓶水为自来水，B瓶水为1%蔗糖水），分别计算大白鼠在饮用1h期间的糖水摄取量和自来水摄取量（糖水偏好% =[A/（A+B）]×100%）。

2.5 检测指标 SPT 实验结束后10%水合氯醛（体积为0.3mL/100g）麻醉大鼠，纵向切开腹部，用5mL真空采血管从腹主动脉取血，待凝血后转速为每分钟3500r离心15min。取上清液移置于血清杯后24℃冰箱保存待测。按照IL-1和IL-6试剂盒的操作说明进行检测含量。

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（收稿日期：2019-05-21 编辑：刘斌）