蜂胶中杨树胶检测方法

黎家辉 王伟 张依

摘 要：如何高效快速鉴别蜂胶的真伪是一直困扰蜂胶从业者的一个难题。近年来，蜂胶的质量鉴别技术有了较快的发展，特别是液相色谱法具有快速、准确的特点，本文介绍了液相色谱法检测蜂胶中的杨树胶的方法。

关键词：蜂胶；杨树胶；液相色谱

蜂胶是蜜蜂采集植物的芽苞或树皮裂缝分泌的树脂并混入其上颚腺分泌物和蜂蜡等而形成的一种具有芳香气味的胶状固体物。自古以来就被广泛应用，是载于《神农本草经》中的“露蜂房”的主要成分之一1。现代科学研究表明，蜂胶具有抗菌、抗炎2，3、抗氧化4、降血糖、抗肿瘤5、增强免疫力等广泛的生物活性，已被收录入《中华人民共和国药典》，广泛应用于医药、保健食品、化妆品等多个领域，是一种重要的医药和功能食品原料。

温带地区蜂胶公认的植物来源主要以杨属（Populus）及其杂交属的芽苞分泌物为主6。由于这些地区的蜂胶成分与杨树胶的成分及其相似7，8，市场上出现了以杨树胶充当蜂胶的现象，严重干扰了市场秩序，对食品药品安全提出了新的挑战。因此，找到快速准确的鉴别蜂胶和杨树胶的方法就成为当务之急。

近年来，蜂胶和杨树胶成分的对比研究为蜂胶的质量控制奠定了良好的基础，建立发展的鉴别方法主要有：HPLC法9、液相色谱质谱法、气相色谱质谱法、热分析法、二维相关红外光谱法10、紫外光谱、电子鼻等方法。特别是液相色谱法，逐渐被行业认可应用，并上升为标准检测方法。

在液相色谱法建立的过程中，潘建国11等采用液相色谱法在蜂胶中检测到10-羟基-2-癸烯酸（10-HAD），含量约为0.22%。10-HDA是由蜜蜂上颚腺和咽下腺分泌的一种蜂王浆中所特有的高效生物活性物质，蜜蜂可能在采胶的过程中加入了该物质。然而他们仅测定了3个样本，是否所有蜂膠中都含有10-HDA，以及含量的多少等都有待进一步研究。盛文胜12等用液相色谱法对蜂胶与杨树胶中肉桂酸含量进行了研究，发现真假蜂胶中肉桂酸的含量存在差异。但是不同产地的蜂胶中同一成分的含量也会存在较大差异，因此该方法的可行性还需要进一步论证。

液相色谱指纹图谱近年在蜂胶与杨树胶鉴别方面有了较大的进展。周萍9等测定了蜂胶、杨树胶和掺假蜂胶的HPLC指纹图谱，发现蜂胶含有2个杨树胶不含有的特征峰，杨树胶中含有1个蜂胶中不含有的特征峰。他们对不同产地来源的62个蜂胶样品建立了HPLC指纹图谱，将蜂胶图谱分为六个区域，提出了以第四区的1号峰、2号峰、5号峰为蜂胶鉴别的主要依据，结合6个区域的指纹图谱进行真伪鉴别13。在此基础上，还建立了区分蜂胶与杨树胶的HPLC指纹图谱，以对照模板为参照，通过《中药指纹图谱相似度计算软件》计算，对蜂胶、杨树胶、蜂胶中掺杨树胶、蜂胶中掺外源性黄酮类化合物、既非蜂胶又非杨树胶等样品的相似度范围进行了限定14。该方法可以鉴别出杨树胶掺假量40%以上的样品。

张翠平等15采用HPLC建立了区分蜂胶与杨树胶的指纹图谱，发现8个不同产地蜂胶的HPLC指纹图谱十分相似，与杨树胶表现出完全不同的指纹图谱。其中，蜂胶中2个共有峰是杨树胶中没有的特征峰，而3个不同来源的杨树胶中有3个共有峰是蜂胶中没有的特征峰，且这5个特征峰明显，相互间独立，没有干扰，易鉴别。

王小平等16以蜂胶和树胶中各种成分的相对含量的不同为基础，建立了蜂胶指纹图谱分析方法，确定有13个共有峰，其中4个成分为已知成分。实验批次中，真蜂胶中8号峰和10号峰的峰面积都很小，但在假蜂胶中这2个峰积分面积均较大，因此认为可以通过这2个峰的积分面积大小来进行蜂胶与杨树胶的鉴别。但该方法同样存在样本量少的缺陷，仍需进一步研究确认。

由于液相色谱指纹图谱具有“整体性”和“模糊性”的特点，没有明确的标准样品对照的情况下，不同检测条件下的图谱难以完全重复，难以满足蜂胶的鉴别鉴定所要求的准确性与可重复性，因此在准确性与可重复性的研究上还有很长的路需要走。

当然，除了液相色谱法，蜂胶的真伪鉴别近年来也发展建立了很多其他方法，如气相色谱法、气相色谱与质谱联用法、热分析法、二维相关红外光谱法、紫外光谱、拉曼光谱法、电子鼻等，但是这些技术都还处于探索阶段，距离应用还有很长的路要走。

感谢河南省高等学校大学生创新创业训练计划项目（项目编号：S201811517003）的资助。

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