金属硫蛋白1 E、糖类抗原153表达与乳腺癌患者临床特征及预后的关系

胡艳瑞，王世磊

濮阳市人民医院普通外科，河南濮阳457000

乳腺癌是女性常见的恶性肿瘤，具有很强的异质性，尽管大多数乳腺癌患者经过手术、放化疗等治疗后可达到根治性的效果，但仍有部分患者预后不佳，5年生存率较低[1]。有研究认为，有无远处转移和有无扩散是乳腺癌患者预后的影响因素[2]。目前，临床对于乳腺癌的诊断主要通过病理和免疫组化分析，但是，近年来，血清生物学标志物已成为恶性肿瘤诊断和治疗的重要辅助指标。通过检测血清生物学标志物还可找到乳腺癌的潜在治疗靶点，有利于对乳腺癌的治疗[3]。金属硫蛋白（metallothionein，MT）是一类具有特定金属结合能力的、高度保守的蛋白质，由MT1E、MT1G和MT1X等亚基构成。其中，MT1E存在于肿瘤细胞的细胞质和细胞核中，其在血清中的表达水平与多种恶性肿瘤有关，可能参与靶向调控基因的表达[4]。 糖 类 抗 原153（carbohydrate antigen 153，CA153）是存在于乳腺细胞上皮表面糖蛋白的变异体[5]，是一种肿瘤相关抗原，在乳腺癌、肝癌、肺癌、胃癌中均有表达。本研究探讨了MT1E、CA153在乳腺癌患者血清中的表达水平及与乳腺癌患者临床特征和预后的关系，现报道如下。

1 对象与方法

1.1 研究对象

选取2013年1月至2017年1月濮阳市人民医院收治的128例乳腺癌患者为观察组。纳入标准：①经病理学检查确诊；②均为女性；③术前未接受过放化疗等抗肿瘤治疗；④非急诊手术患者。排除标准：①合并病毒性肝炎、血液系统疾病、免疫系统疾病等；②合并其他部位恶性肿瘤。另外，选取130例同期于本院行健康体检的女性为对照组。观察组患者的年龄为28～68岁，平均年龄为（55.41±9.87）岁。对照组受试者的年龄为29～65岁，平均年龄为（54.16±10.22）岁。两组受试者的年龄比较，差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。本研究经过医院医学伦理委员会审核批准，所有受试者均对本研究知情同意并签署知情同意书。

1.2 检测方法

抽取全部受试者的清晨空腹静脉血，分离血清，离心速度为3000 r/min，离心时间为10 min，离心半径为8 cm，冻存于-80℃冰箱中保存待测。采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验检测全部受试者血清中MT1E和CA153的表达水平。ChemiDoc MP化学发光仪购自美国Bio-rad公司，酶联免疫吸附测定试剂盒购自亚诺法生技股份有限公司。操作步骤严格按照试剂盒说明书的步骤进行。使用试剂盒中的标准品制作质控曲线。阳性判定标准：MT1E≥0.85 ng/ml为阳性，CA153＞30 U/ml为阳性。

1.3 观察指标及随访

观察并比较两组受试者血清中MT1E、CA153的表达水平，分析乳腺癌患者血清中MT1E、CA153的阳性表达率与乳腺癌患者临床特征的关系，对全部乳腺癌患者进行随访。术后每半年进行一次门诊随访，随访截止时间为2018年6月，随访内容包括病史询问、体格检查、实验室检查、影像学检查等。

1.4 统计学方法

采用SPSS 19.0软件对数据进行统计分析，计量资料以均数±标准差（±s）表示，组间比较采用t检验；计数资料以例数和率（%）表示，组间比较采用χ2检验；采用Kaplan-Meier法绘制生存曲线，组间比较采用Log-rank检验；影响因素分析采用Cox比例风险回归模型。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 血清中MT1E、CA153表达水平的比较

观察组患者血清中MT1E的表达水平为（1.22±0.51）ng/ml，明显高于对照组患者的（0.46±0.13）ng/ml，差异有统计学意义（t=16.457，P＜0.01）；观察组患者血清中CA153的表达水平为（28.81±5.22）U/ml，明显高于对照组患者的（10.10±4.01）U/ml，差异有统计学意义（t=32.315，P＜0.01）。

2.2 不同临床特征乳腺癌患者血清中MT1E、CA153的阳性表达情况

TNM分期为Ⅲ～Ⅳ期乳腺癌患者血清中MT1E、CA153的阳性表达率均明显高于TNM分期为Ⅰ～Ⅱ期的乳腺癌患者，差异均有统计学意义（χ2=12.621、21.321，P＜0.01）；有淋巴结转移的乳腺癌患者血清中MT1E的阳性表达率明显高于无淋巴结转移的乳腺癌患者，差异有统计学意义（χ2=27.275，P＜0.01）。不同年龄、肿瘤直径、病理类型、雌激素受体状态、孕激素受体状态、分化程度乳腺癌患者血清中MT1E、CA153的阳性表达率比较，差异均无统计学意义（P＞0.05）；不同淋巴结转移情况乳腺癌患者血清中CA153的阳性表达率比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。（表1）

2.3 MT1E、CA153阳性表达乳腺癌患者的生存情况

MT1E阳性表达乳腺癌患者的中位生存时间为51.19个月（95%CI：46.660～55.727），短于 MT1E阴性表达乳腺癌患者的57.31个月（95%CI：53.855～60.764），差异有统计学意义（χ2=4.558，P＜0.05）；CA153阳性表达乳腺癌患者的中位生存时间为 50.22个 月（95%CI：45.331～54.702），短于CA153阴性表达乳腺癌患者的57.54个月（95%CI：54.178～60.892），差异有统计学意义（χ2=7.606，P＜0.05）。（图1、图2）

2.4 乳腺癌患者预后影响因素的Cox比例风险回归分析

以淋巴结转移、TNM分期、雌激素受体状态、分化程度、MT1E表达、CA153表达作为自变量，以总生存时间作为因变量进行Cox比例风险回归模型分析，结果显示，有淋巴结转移、TNM分期为Ⅲ～Ⅳ期、分化程度为中低分化、MT1E阳性表达、CA153阳性表达均是乳腺癌患者预后不良的独立危险因素（P＜0.05），雌激素受体阳性是乳腺癌患者预后良好的独立保护因素（P＜0.05）。（表2）

表1 不同临床特征乳腺癌患者血清中MT1E、CA153的阳性表达情况（n=128）

图1 MT1E阳性表达（n=92）和阴性表达（n=36）乳腺癌患者的生存曲线

图2 CA153阳性表达（n=85）和阴性表达（n=43）乳腺癌患者的生存曲线

表2 乳腺癌患者预后影响因素的Cox比例风险回归分析（n=128）

3 讨论

乳腺癌是临床常见的恶性肿瘤，其发生、发展是多种因素共同作用的结果，大多数早期乳腺癌患者术后可获得根治性的治疗效果，术后再辅以放疗、化疗，多数患者可获得良好的预后[6]。部分患者术后易发生远处转移和扩散，治疗效果较差，生存时间较短[7]。病理组织活检是诊断和评估病情的金标准，但其对患者造成的创伤较大，可导致肿瘤进展[8]。钼靶X线摄影检查等影像学检查无法对肿瘤进行确诊，且可能对患者机体造成放射性损伤，进而促进肿瘤的进展[9]。血清生物学标志物是目前诊断和治疗恶性肿瘤的重要辅助指标，与病理学检查相比，具有检测方便、结果客观、创伤小等优势[10]。通过检测血清生物学标志物，还可发现潜在的治疗靶点，为恶性肿瘤的治疗提供新的思路[11]。

金属硫蛋白含有61～68个氨基酸残基，蛋白质结构中含有两个金属结合域，具有特定的金属结合能力[12]。有研究认为，MT在不同肿瘤组织中的表达水平不同，可作为肿瘤的一种辅助性诊断指标[13]。MT1E属于MT1蛋白，在肿瘤细胞中呈阳性表达，尤其在肿瘤细胞的细胞质和细胞核中含量较高。有研究发现，MT1E可作为调控因子直接参与靶向基因的表达，MT1E在乳腺癌患者血清中的表达水平较高，与乳腺癌的发生和发展密切相关[14-15]。CA153是存在于乳腺细胞上皮表面糖蛋白的变异体，在乳腺癌中的表达水平较高[16]。有研究证实，CA153是乳腺癌诊断的特异性标志物[17]。本研究发现，乳腺癌患者血清中的MT1E和CA153水平明显高于健康女性，这一结果与相关研究结果类似[18-19]。血清MT1E和CA153水平可作为乳腺癌的辅助诊断指标。本研究对不同TNM分期乳腺癌患者血清中MT1E、CA153的阳性表达率进行了比较，结果发现，TNM分期为Ⅲ～Ⅳ期乳腺癌患者血清中MT1E、CA153的阳性表达率均明显高于TNM分期为Ⅰ～Ⅱ期的乳腺癌患者，提示乳腺癌患者血清中MT1E、CA153的阳性表达率可能与TNM分期有关。本研究还发现，有淋巴结转移的乳腺癌患者血清中MT1E的阳性表达率明显高于无淋巴结转移的乳腺癌患者，提示乳腺癌患者血清中MT1E的阳性表达率可能与淋巴结转移情况有关。

通过长期的随访发现，MT1E和CA153阳性表达乳腺癌患者的中位生存时间均短于MT1E和CA153阴性表达的乳腺癌患者，提示乳腺癌患者血清中MT1E和CA153的阳性表达情况与患者的预后可能有关，且MT1E、CA153阳性表达乳腺癌患者的中位生存时间更短。分析其原因可能是由于血清中MT1E、CA153阳性表达的乳腺癌患者往往已发展至乳腺癌晚期，且发生了淋巴结转移，因此，MT1E、CA153阳性表达的乳腺癌患者预后更差。

本研究中，Cox比例风险回归分析结果显示，有淋巴结转移、TNM分期为Ⅲ～Ⅳ期、分化程度为中低分化、MT1E阳性表达、CA153阳性表达均是乳腺癌患者预后不良的独立危险因素（P＜0.05），雌激素受体阳性是乳腺癌患者预后良好的独立保护因素（P＜0.05），提示MT1E、CA153可作为临床评估乳腺癌患者病情和预后的辅助指标。

综上所述，乳腺癌患者血清中MT1E和CA153的表达水平较高，有淋巴结转移、TNM分期为Ⅲ～Ⅳ期、分化程度为中低分化、MT1E阳性表达、CA153阳性表达是乳腺癌患者预后不良的独立危险因素，雌激素受体阳性是乳腺癌患者预后良好的独立保护因素。但是，本研究纳入的样本量较少，未对乳腺癌患者进行分类研究，在今后的临床工作中应注意积累样本，探讨三阴性乳腺癌等特殊类型乳腺癌患者血清中MT1E、CA153的阳性表达情况。