饲粮蛋白质水平对云南半细毛羊空怀母羊体增重、血清尿素氮、瘦素及繁殖激素的影响

王思宇，李银江，欧阳依娜，李卫娟，姚新荣，梁家充，薛 白，洪琼花*

（1.云南省畜牧兽医科学院，云南昆明650224；2.云南省种羊繁育推广中心，云南寻甸655204；3.四川农业大学动物营养研究所，四川成都611130）

母羊空怀期是断奶后至配种受胎的准备阶段，此期饲养目标是恢复体况，达到配种要求（谢艳丽等，2011）。饲粮蛋白质水平不仅对动物增重有影响，还对母羊发情、排卵和胚胎早期发育等繁殖性能有影响。蛋白质不足可导致母体发情排卵推迟，空怀期延长（闫学志，2017）；适当提高饲粮蛋白质水平可增加母羊排卵、提高发情率（杨宁等，2009）；但摄入过多的蛋白质，氮代谢产生过多的氨和尿素可能会损伤卵子和胚胎、影响子宫酸碱环境、降低孕酮浓度而使受精率下降、影响胚胎的生长发育从而降低母羊繁殖率（闫学志，2017）。因此饲粮蛋白质水平过高过低均不利于生产。NRC绵羊需要量标准（第六版）中50～60 kg体重的母羊日增重10 g/d时建议蛋白质摄入量为95～104 g/d，配种前两周补饲日增重100 g/d时为150～157 g/d。目前，针对绵羊空怀期的营养研究，特别是饲粮蛋白质水平对云南半细毛羊的研究鲜见报道。因此，本研究旨在通过探讨不同蛋白质水平饲粮对云南半细毛羊空怀母羊增重及与蛋白质代谢的作用，为其科学饲养提供理论基础，也为云南半细毛羊繁殖激素的进一步研究提供参考数据。

1 材料与方法

1.1 试验动物 选择50只体况良好、无疾病、体重（52.91±4.33）kg、38月龄的经产两胎空怀期云南半细毛羊母羊开展试验。

1.2 试验设计 试验开始前使用兽药阿苯达唑、伊维菌素、球虫净和氯氰碘柳胺钠按照使用说明进行驱虫。试验动物平均分为5组，每组10只，分别饲喂蛋白质水平为8.44%、9.95%、12.31%、13.58%、15.90%的饲粮，饲粮配方及营养水平见表1。所有试验羊在羊舍单栏（每栏一只羊）饲喂，进行为期44 d的饲养试验，包括14 d预试期和30 d正式试验。预试期间每天08:00、17:00各喂料1次，自由饮水，每天记录每只试验羊的采食量，根据前一天的采食量调整第2天饲喂量，确保有10%左右的剩料。饲喂时将小黑麦草直接放于料槽中，精料和小麦秸（粉状）混合后置于塑料盆（每只羊单独使用一个塑料盆）中，塑料盆置于料槽中。每天记录采食量时用总饲喂量减去剩料量。正试期每天的饲养管理同预试期。

1.3 测定指标及方法

1.3.1 生产性能指标 试验羊称重均为早上空腹称重。预试期开始时称重后即进行分组，对各组羊体重均值进行统计分析，如果组间有差异则进行羊只调整，直至差异不显著。正试期开始时再次称重并进行统计分析，如果各组体重均值有差异则调整羊只分组使差异不显著并延长预试期14 d，如果各组体重均值无差异则开始正式试验。正试期结束时羊只称重。正试期每天记录每只试验羊的采食量。计算正试期间的平均日增重（ADG）、平均日采食量（ADFI）和料重比（F/G）。

1.3.2 血清指标 每组随机选择5只羊在正式试验结束前3 d晨饲前于颈静脉实行无菌采血，连续采血3 d，检测结果取3 d的均值。每只试验羊采血10 mL，静置30 min后于3000 r/min离心20 min，获得血清，将血清分装于1.5 mL离心管内，于-20℃冰柜中保存待测。

血清促卵泡素（FSH）、雌二醇（E2）、促黄体生成素（LH）、孕酮（PROG）和LEP使用酶标仪（Molecular Devices公司，Versa Max型），按照试剂盒说明书测定；BUN使用紫外可见分光光度计（尤尼柯，UV-2600型），按照试剂盒说明书测定；FSH、E2、LH、PROG和BUN试剂盒购自南京建成海浩生物科技有限公司；LEP试剂盒购自上海浩本生物科技有限公司。

1.4 数据统计分析 试验数据采用SPSS 19.0软件进行单因素方差分析，多重比较采用LSD法，试验数据用“平均值±标准差”表示，P＜0.05为差异显著，P＜0.01为差异极显著。

2 结果

2.1 不同蛋白质水平饲粮对云南半细毛羊空怀母羊生长性能的影响 由表2可知，各组初始体重、末重和料重比差异均不显著（P＞0.05）。组3的平均日增重较组2显著降低31.00%（P＜0.05），其余各组的差异不显著（P＞0.05）。组3的日采食量较组2显著降低8.72%（P＜0.05），其余各组间差异不显著（P＞0.05）。从组1到组5日均蛋白质采食量显著增加（P＜0.05），且除组2与组3间未达极显著水平外，其余各组间差异均达极显著水平 （P＜0.01），其中组2较组1提高24.04%（P＜0.01）、组3较组2提高13.10%（P＜0.05）、组4较组3提高14.45%（P＜0.01）、组5较组4提高14.85%（P＜0.01）。

2.2 不同蛋白质水平饲粮对BUN、LEP及繁殖激素的影响 由表3可知，各组的促卵泡素和促黄体素浓度没有显著差异（P＞0.05）。对于血清雌二醇（E2）浓度，组3较组1极显著提高128.60%（P＜0.01）、较组2极显著提高133.38%（P＜0.01）；组4的E2水平较组1和组2分别显著提高53.77%（P＜0.05）和56.98%（P＜0.05）；组5的E2水平较组1和组2分别显著提高78.33%（P＜0.05）和82.06%（P＜0.05）；组4的E2水平较组3显著降低32.74%（P＜0.05），但与组5差异不显著（P＞0.05）。从组1至组4，孕酮（PROG）浓度逐渐升高，组4浓度较组1极显著提高61.21%（P＜0.01），较组2显著提高46.60%（P＜0.05）；组5的PROG浓度与组4差异不显著（P＞0.05），但较组1显著提高42.70%（P＜0.05）。随着饲粮蛋白质水平的升高，BUN浓度逐渐增加，各组差异均达到显著水平（P＜0.05），并且除第3组和第4组外，其余各组间差异达到极显著水平 （P＜0.01）。从组2到组5依次较前一组提高34.65%（P＜0.01）、34.94%（P＜0.01）、7.29%（P＜0.05）、10.12%（P＜0.01）。对于瘦素（LEP），组5较组2显著降低29.23%（P＜0.05），较组4降低36.11%（P＜0.05），其余各组间差异不显著（P＞0.05）。

3 讨论

日增重是衡量动物生长速度的重要指标，目前很多研究结果认为，羊的日增重随着饲粮蛋白质含量的增加先增加而后下降或者增重不显著（田春丽，2015）。本研究中从组1到组5，饲粮蛋白质含量依次升高，日均蛋白质采食量也显著增加，日增重除第3组较第2组显著下降外，其余各组没有差异。组1、组2、组4和组5的空怀母羊日增重没有显著差异。组3日增重与组2差异大，日增重的变化规律与采食量一致，因此推测组3日增重低的主要原因是采食量偏低。随着动物体重和月龄的增加，生长速度逐渐下降，日增重水平有所降低，有研究表明，体重约36 kg时日增重可达120～226 g（哈丽代等，2016；王斌星等，2016），体重约40 kg的成年母羊日增重多为35～92 g（王惠，2012；赵玉民，2005）。有研究报道在放牧条件下，云南半细毛羊母羊在3岁左右体重达到约50 kg，其后体重缓慢下降（李高荣等，2001）。本研究中母羊体重约为54 kg，日均增重为69～100 g，取得了较好的生长速度，一是得益于充足的营养供给；二是舍饲条件下动物运动量小，耗能少。哺乳结束后母羊体重一般较配种所需的理想体重低2～3 kg（周利勇，2012），按照母羊两年产三胎的繁殖计划，空怀期一般为1个月，据此估算1个月增重2～3 kg，则日增重应在65～100 g/d。本研究中除组3外，其余各组的日增重均在80 g/d以上，可达到增重要求。各组料重比没有差异，从饲粮成本来看，主要使用的蛋白质饲料豆粕和菜籽粕价格较高，两者比例从组1到组5逐渐上升，饲粮成本也随之升高。考虑到组2（9.95%蛋白质水平）表现出最快生长速度，因此9.95%的饲粮蛋白质水平更为适宜。

有研究认为蛋白质水平会影响动物采食量，赵智华等（2009）的研究中设计饲粮蛋白质水平为8.23%、10.42%和12.52%，结果表明，动物采食量随着饲粮蛋白质水平的升高有增加的趋势。本研究中日均干物质采食量除组3显著低于组2外，其余各组差异不显著。代谢能和粗蛋白质均是影响采食量的重要因素（刘金祥等，2001），本研究中设置了蛋白质水平梯度，代谢能保持一致，但代谢能数值为计算值，不排除实际值与计算值有一定差异的可能性。因此组3采食量偏低可能是饲粮代谢能产生的差异。

表2 饲粮蛋白质水平对空怀母羊生长性能的影响

表3 饲粮粗蛋白质水平对BUN、LEP和繁殖激素的影响

对羊料重比的报道多见于生长期的研究，3～4月龄体重30 kg以下的羊料重比约为4.5～8.5，体重在30～35 kg时料重比约为7.5～12.5，体重在36～40 kg时则为8.8～17（唐丹等，2017；史晓雪等，2017）。育成后期母羊料重比在6～8.4（刘宁，2016）。目前鲜有对空怀期、妊娠期和哺乳期羊料重比的报道。有研究表明，料重比随着羊年龄和体重的增长而增大，饲料转化效率逐渐降低。本研究中各组料重比均值为20.5（P＞0.05），数值偏大，可能是由于试验羊已成年，饲料转化效率变低。

空怀期使羊体况恢复、尽早发情、增加排卵、提高配种成功率，可以提高母羊的生产效率。母羊繁殖性能主要受到下丘脑-垂体-性腺轴激素的作用，其中FSH、LH、E2和PROG是重要的调控激素。相比日粮蛋白质水平的差异，繁殖激素浓度主要受到羊只繁殖周期的影响。目前尚缺乏对云南半细毛羊繁殖激素的相关研究，繁殖激素的作用浓度还有待精确，本研究中结果可为进一步研究云南半细毛羊繁殖激素的浓度提供参考。

BUN来源于机体蛋白、氨基酸降解和瘤胃吸收的氨氮，是反映反刍动物蛋白质代谢的重要指标（火静萍，2015）。尿素氮与体内氮沉积和蛋白利用率呈负相关（火静萍，2015）。BUN低说明动物可有效利用饲粮中氮、蛋白质或氨基酸，蛋白质沉积率高；BUN高表明较多蛋白质被氧化代谢，造成了蛋白质饲料的浪费（王兴涛等，2016）。李志静等（2014）报道，BUN正常为3.5～16 mmol/L，在本研究中各组BUN浓度均在此范围内，且随着饲粮蛋白质水平的升高显著增加，这与雷耀庚（2015）等的研究结果一致，也符合蛋白质代谢规律。

LEP是一种由脂肪细胞分泌的蛋白质，其是一种可控制采食量，调节体重的因子，生理作用涉及泌乳、能量、发情和免疫等方面（王春艳等，2012）。羊血清LEP浓度在0.5～35 ng/mL（张秋旭等，2018；石国庆等，2008），不同品种、不同性别的羊血清LEP浓度差异较大。在本研究中随着饲粮蛋白质水平的升高，LEP的浓度变化没有明显规律，各组采食量、日增重变化与LEP水平也不一致，说明饲粮蛋白水平可能对LEP没有影响。LEP对繁殖性能的作用一般认为是通过调节促性腺激素释放激素（GnRH）神经元的活性和分泌，从而促进LH和FSH的分泌（Kamalamma等，2016；Vázquez等，2015）。黄钦华（2012）的研究中LEP表现出与FSH和LH相同的变化规律，但也有学者认为LEP对FSH和LH影响结果不一致，有的FSH和LH分泌量随LEP浓度的提高先上升后下降，有的随着LEP浓度变化LH水平变化但FSH无变化（石国庆等，2009）。本研究结果中LEP水平与LH、FSH浓度变化没有显著规律，可能一方面LEP受到饲粮和动物体脂肪水平的影响（李兴升等，2003），另一方面FSH与LH的分泌也受发情周期影响。

4 结论

本研究中饲粮蛋白质水平为9.95%时表现出较好的采食量和较快的生长速度，而料重比、BUN相对不高，因此在实际生产中推荐云南半细毛羊母羊空怀期的饲粮蛋白质水平为9.95%。