郭丹丹
(长治职业技术学院,山西长治046000)
目前,犬只各种传染病流行十分严重,大多数由于幼龄犬在被动免疫和主动免疫时期免疫系统缺陷。被动免疫时期,研究发现未哺乳初乳或者被动免疫较差幼犬可使用血清(Greene,1984;Fisher,1982)来提高免疫力,但是免疫剂量和注射时间目前还没有较为明确的结论。随着幼龄犬的生长,母源抗体在体内逐渐衰减,主动免疫期间还要辅助人工免疫以保证体内免疫抗体(黄利权,2011)。目前宠物犬人工免疫大多还是人工注射抗体,但往往会因疫苗质量、疾病、先天性遗传免疫缺陷、药物干扰以及生长环境影响等造成免疫失败,通过其他手段来提高幼龄犬免疫力尤其是通过调整饮食结构越来越受到关注。中草药在我国使用历史悠久,可调节机体新陈代谢,改善生长性能(李艳艳等,2018)。此外中草药大多从天然植物中提取,具有来源广、成本低、副作用低等优点。因此,开发复方中草药制剂为提高幼龄宠物犬免疫力提供了新途径。
1.1 试验材料 复方中草药由党参、炒白术、甘草、黄芪、蒲公英等12味中草药组成。干燥箱58℃烘干3 h后100目粉碎,密封保存。
1.2 试验动物 试验小型宠物犬是由成都荷花池花鸟鱼市场购买的3月龄左右健康贵宾犬,平均体重2 kg。
1.3 试验设计 采用单因子试验设计,选取健康的贵宾犬27只,随机分为3组,每组3个重复,每个重复3只,对照组P0饲喂基础日粮,P1、P2组在基础日粮中分别添加1%、2%复方中草药制剂。每日3次,定时饲喂,自由采食与饮水。试验基础日粮组成及营养水平见表1。
1.4 血样样品采集 饲喂42 d后,每组随机选取6只,前腔静脉采全血2 mL,3500 r/min离心10 min,分离血清,-20℃冰箱保存。
1.5 测定指标
1.5.1 生长性能 试验结束时,空腹称重,计算耗料量、平均日采食量、日增重、料重比以及腹泻率。
1.5.2 超氧化物歧化酶活性 超氧化物歧化酶活性测定试剂盒购自南京建成生物工程研究所,采用UNIC-UV-2800(4 nm)紫外可见分光亮度计测定。
1.5.3 免疫指标的测定 血清中IgA、IgG、IgM采用免疫比浊法测定,试剂盒由南京建成生物工程研究所提供。
1.6 统计分析 试验结果以“平均数±标准差”表示,采用SPASS 9.1进行单因素方差分析,多重比较采用Duncan’s法。
表1 试验基础日粮组成和营养水平
2.1 复方中草药对贵宾犬生长性能和采食量的影响 由表2可知,添加复方中草药制剂后P1、P2组日增重较对照组分别提高59%、52.1%(P<0.05),日采食量分别提高56.1%、27.9%(P<0.05),腹泻率和料重比均显著性降低(P<0.05)。
表2 复方中草药制剂对贵宾犬生长性能的影响
2.2 复方中草药对贵宾犬血清中超氧化物歧化酶活性的影响 由表3可知,日粮中添加复方中草药制剂后P1和P2组血清SOD活性均显著高于P0组(P<0.05),并且有缓慢递增的趋势。
2.3 复方中草药对贵宾犬免疫指标的影响 由表4可知,血清中IgM含量三组均无显着性差异(P>0.05),P1、P2组血清IgA含量较P0组显著提高,且随着剂量增加显著性升高(P<0.05),P1和P2组血清中IgG含量较P0组显著升高,但P1和P2组之间差异不显著(P>0.05)。
表3 复方中草药对贵宾犬超氧化物歧化酶(SOD)活性的影响U/L
3.1 复方中草药制剂对生长性能的影响 本研究表明,在日粮中添加复方中草药制剂可以改善贵宾犬生长性能。这与其他畜禽类研究结果基本一致(李玉,2011;张世昌等,2010)。本试验添加量为1%时效果较好,可能是因为添加过量的复方中草药制剂日粮的口感变差,进而影响了贵宾犬的采食量。本研究表明复方中草药制剂显著降低了腹泻率。韩剑众等(2002)研究表明,复方中草药有效成分抽提物能够抑制多种肠道致病菌。推测复方中草药制剂降低贵宾犬腹泻率极有可能是通过抑制肠道致病菌,起到防止腹泻的作用。
3.2 复方中草药制剂对超氧化物歧化酶活性的影响 超氧化物歧化酶是一种广泛存在于动植物、微生物中的金属酶。其能催化生物体内超氧自由基(O2-)发生歧化反应,是机体内天然消除剂(黎瑞珍等,2004)。在动植物自我保护系统和免疫系统起到重要作用。本研究表明日粮中添加复方中草药制剂后,经过42 d饲喂,P1、P2组血清中SOD活性显著高于P0组,且P2组活性最强。以往研究表明,许多中草药都可以不同程度地提高机体内SOD的活性,减少超氧阴离子自由基对机体的损伤(武晋孝,2003)。本研究与此相似,说明复方中草药制剂能够刺激贵宾犬体内的SOD活性,提高贵宾犬的免疫力和抗病能力。
表4 复方中草药对贵宾犬免疫指标的影响
3.3 复方中草药制剂对血清免疫球蛋白水平的影响 免疫球蛋白主要存在于血清中,是体液免疫应答中最主要的免疫分子。研究表明,中草药饲料添加剂可以提高仔猪血清中免疫球蛋白的水平(李玉,2011;马玉芳,2009)。这些研究结果与本试验结果一致,复方中草药制剂能够显著提高血清中IgG、IgA的水平,血清IgM的水平有增高的趋势。本试验为提高宠物犬免疫球蛋白含量提供了新思路。
本研究结果表明,在幼龄贵宾犬日粮中添加复方中草药制剂,可以提高其生长性能和免疫功能,并且复方中草药制剂的适宜添加量为1.0%。