小花清风藤叶的化学成分研究

朱仝飞 李萍 孙庆文 陈日荣 闫志慧

摘 要：对于小花清风藤的化学成分和药理作用的研究目前较少报道，为了阐明小花清风藤的物质基础，该研究对小花清风藤（Sabia parviflora）的干燥叶，采用反复硅胶柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱、制备薄层色谱及重结晶等手段进行分离纯化，运用化学分析和波谱学方法鉴定化合物的结构。结果表明：从小花清风藤干燥叶的甲醇超声提取物中进行分离共得到12个化合物，分别为N-反式阿魏酰酪胺（1）、N-顺式阿魏酰酪胺（2）、N-反式-对-香豆酰酪胺（3）、N-顺式-对-香豆酰酪胺（4）、N-反式-对-香豆酰章鱼胺（5）、N-顺式-对-香豆酰章鱼胺（6）、阿魏酸（7）、芹菜素（8）、木犀草素（9）、咖啡酸（10）、5-氧阿朴菲碱（11）、齐墩果酸（12）。其中，化合物2、4-9为首次从清风藤属植物中分离得到，化合物1、3、10为首次从该植物中分离得到。

关键词：小花清风藤， 化学成分， 酰胺类生物碱

中图分类号：Q946.91

文献标识码：A

文章编号：1000-3142（2019）04-0511-05

Abstract：In order to elucidate the material basis of S. parviflora， the constituents of S. parviflora were separated and purified with chromatographic methods and recrystallization. The structures were elucidated by chemical analyses and spectroscopic methods. Twelve compounds were isolated from the leaves of S. parviflora， and they were identified as N-trans-feruloyl tyramine （1）， N-cis-feruloyl tyramine （2）， N-trans-p-coumaroyl tyramine （3）， N-cis-p-coumaroyl tyramine （4）， N-trans-p-coumaroyl octopamine （5）， N-cis-p-coumaroyl octopamine （6）， ferulic acid （7）， apigenin （8）， luteolin （9）， caffeic acid （10）， fuseine （11）， oleanolic acid （12）. Compounds 2， 4-9 were isolated from the plants of Sabia Colelbr. for the first time. Compounds 1， 3， 10 were isolated from the plant for the first time.

Key words：Sabia parviflora， chemical constituents， amide alkaloid

小花清風藤（Sabia parviflora）为清风藤科（Sabiaceae）清风藤属（Sabia）植物的干燥茎叶。其味苦、性微寒，是贵州苗族、布依族最常用的治疗肝炎、风湿病的药物之一，具有清热利湿、止血等功效。主要分布于我国贵州、广西、四川、云南等海拔800～2 800 m的地区。在温迪等（2016）和赵兰君等（2018）的研究报道中，小花清风藤的主要成分为生物碱类、五环三萜类、黄酮类、苯丙素类等化合物。本研究采用反复硅胶柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱、制备薄层色谱及重结晶等方法对小花清风藤干燥叶的甲醇超声提取物的化学成分进行系统地研究，从中分离得到12个化合物，通过理化性质和波谱学分析确定化合物结构，分别鉴定为N-反式阿魏酰酪胺（1）、N-顺式阿魏酰酪胺（2）、N-反式-对-香豆酰酪胺（3）、N-顺式-对-香豆酰酪胺（4）、N-反式-对-香豆酰章鱼胺（5）、N-顺式-对-香豆酰章鱼胺（6）、阿魏酸（7）、芹菜素（8）、木犀草素（9）、咖啡酸（10）、5-氧阿朴菲碱（11）、齐墩果酸（12）。其中，化合物2、4-9为首次从清风藤属植物中分离得到，化合物1、3、10为首次从该植物中分离得到。

1 材料与方法

1.1 材料与仪器

材料：2014年4月从贵州省修文县采集药材，由贵阳中医学院孙庆文教授鉴定为小花清风藤（Sabia parviflora）的叶，样品标本（20140426011）保存于贵阳中医学院标本馆。

仪器：Bruker AVANCE-00型核磁共振光谱仪（瑞士Bruker公司）;旋转蒸发仪（德国IKA公司）;制备型薄层硅胶 F254（德国Merck公司）;Sephadex LH-20（Amersham Pharmacia Biotech AB）;化学试剂均为分析纯。

1.2 提取与分离

小花清风藤干燥叶1.5 kg，用3 L甲醇超声500 W条件下提取3次，每次2 h，提取液减压浓缩回收溶剂，得浸膏0.393 kg（收率26.3%）。浸膏用1.0 L水混悬，分别用等体积的正己烷、醋酸乙酯、正丁醇萃取3次，减压浓缩回收溶剂，分别得到正己烷浸膏46 g、醋酸乙酯浸膏93 g、正丁醇浸膏133 g。正己烷浸膏经硅胶柱色谱，以正己烷-丙酮梯度洗脱，得到8个组份Fr. 1～8。Fr. 3（3.1 g）经硅胶柱色谱分离，正己烷-乙酸乙酯梯度洗脱，得到4个亚组份Fr. 3-1～3-4。Fr. 3-2（62.2 mg）经Sephadex LH-20柱色谱、制备薄层色谱分离，得化合物1和2（共5.2 mg）、3和4（共6.3 mg）、5和6（共7.2 mg），其中化合物1和2、3和4、5和6分别以2∶1、2∶1和2.5∶1的比例混合得到。Fr. 3-3（25.2 mg）经Sephadex LH-20柱色谱、制备薄层色谱分离，得到化合物11（15.1 mg）。醋酸乙酯部位经硅胶柱色谱，以三氯甲烷-甲醇梯度洗脱，得到6个组份Fr. 1～6。Fr. 3（2.5 g）经硅胶柱色谱分离，得到7个亚组份Fr. 3-1～3-7。Fr. 3-2（40.3 mg）经Sephadex LH-20柱色谱、制备薄层色谱及重结晶分离，分别得到化合物7（15.1 mg）、8（11.7 mg）、9（9.5 mg）、10（19.3 mg）。Fr. 3-3（34.7 mg）经硅胶柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱及重结晶分离，得到化合物12（24.2 mg）。

2 结构鉴定

化合物1 白色粉末。1H-NMR （500 MHz，dMSO-d6） δ：7.27 （1H，d， J = 15.5 Hz， H-7）， 7.08 （1H，d， J = 1.5 Hz， H-2）， 7.02 （2H，d， J = 8.5 Hz， H-2′， 6′）， 7.00 （1H，dd， J = 1.5， 8.0 Hz， H-6）， 6.74 （1H，d， J = 8.0 Hz， H-5）， 6.66 （2H，d， J = 8.5 Hz， H-3′， 5′）， 6.38 （1H，d， J = 15.5 Hz， H-8）， 3.79 （3H， s， 3-OCH3）， 3.26 （2H， t， J = 7.0， 14.0 Hz， H-8′）， 2.62 （2H， t， J = 7.0 Hz， H-7′）;13C-NMR （125 MHz，dMSO-d6） δ：126.9 （C-1）， 121.1 （C-2）， 148.3 （C-3）， 147.4 （C-4）， 115.7 （C-5）， 124.1 （C-6）， 138.9 （C-7）， 119.0 （C-8）， 165.3 （C-9）， 129.6 （C-1′）， 129.5 （C-2′， 6′）， 115.1 （C-3′， 5′）， 155.7 （C-4′）， 34.3 （C-7′）， 40.6 （C-8′）， 55.5 （OCH3）。以上数据与文献报道（尹海龙等，2013）一致，故鉴定化合物 1 为 N-反式阿魏酰酪胺。

化合物2 白色粉末。1H-NMR （500 MHz，dMSO-d6） δ：7.08 （1H，d， J = 1.5 Hz， H-2），

7.02 （2H，d， J = 8.0 Hz， H-2′， 6′）， 6.96 （1H，dd， J = 1.5， 8.5 Hz， H-6）， 6.70 （1H，d， J = 8.5 Hz， H-5）， 6.65 （2H，d， J = 8.0 Hz， H-3′， 5′）， 6.47 （1H，d， J = 13.0 Hz， H-7）， 5.77 （1H，d， J = 13.0 Hz， H-8）， 3.79 （3H， s， 3-OCH3）， 3.26 （2H， t， J = 7.5 Hz， H-8′）， 2.62 （2H， t， J = 7.5 Hz， H-7′）;13C-NMR （125 MHz，dMSO-d6） δ：126.9 （C-1）， 121.1 （C-2）， 147.4 （C-3）， 146.9 （C-4）， 114.9 （C-5）， 124.1 （C-6）， 136.9 （C-7）， 114.3 （C-8）， 166.3 （C-9）， 129.6 （C-1′）， 129.5 （C-2′， 6′）， 115.2 （C-3′， 5′）， 155.7 （C-4′）， 34.3 （C-7′）， 40.6 （C-8′）， 55.5 （OCH3）。以上数据与文献报道（尹海龙等，2013）一致，故鉴定化合物 2 为 N-顺式阿魏酰酪胺。

化合物3 白色粉末。1H-NMR （500 MHz，dMSO-d6） δ：7.37 （2H，d， J = 8.5 Hz， H-2， 6）， 7.30 （1H，d， J = 15.5 Hz， H-7）， 7.01 （2H，d， J = 8.0 Hz， H-2′， 6′）， 6.78 （2H，d， J = 8.5 Hz， H-3， 5）， 6.69 （2H，d， J = 8.0 Hz， H-3′， 5′）， 6.38 （1H，d， J = 15.5 Hz， H-8）， 3.26 （2H，d， J = 7.5 Hz， H-8′）， 2.61 （2H，d， J = 7.5 Hz， H-7′）; 13C-NMR （125 MHz，dMSO-d6） δ：126.7 （C-1）， 129.9 （C-2）， 115.6 （C-3）， 159.5 （C-4）， 115.6 （C-5）， 129.9 （C-6）， 139.0 （C-7）， 119.1 （C-8）， 165.8 （C-9）， 126.2 （C-1′）， 129.6 （C-2′， 6′）， 115.2 （C-3′， 5′）， 156.1 （C-4′）， 34.9 （C-7′）， 41.1 （C-8′）。以上數据与文献报道（魏娜娜和娄红祥，2012）一致，故鉴定化合物3为N-反式-对-香豆酰酪胺。

化合物4 白色粉末。1H-NMR （500 MHz，dMSO-d6） δ：7.59 （2H，d， J = 8.3 Hz， H-2， 6）， 7.00 （2H，d， J = 8.2 Hz， H-2′， 6′）， 6.70 （2H，d， J = 8.3 Hz， H-3， 5）， 6.67 （2H，d， J = 8.2 Hz， H-3′， 5′）， 6.48 （1H，d， J = 13.0 Hz， H-7）， 5.75 （1H，d， J = 13.0 Hz， H-8）， 3.31 （2H，d， J = 7.4 Hz， H-8′）， 2.64 （2H，d， J = 7.4 Hz， H-7′）; 13C-NMR （125 MHz，dMSO-d6） δ：126.7 （C-1）， 130.0 （C-2）， 115.6 （C-3）， 158.4 （C-4）， 115.6 （C-5）， 130.0 （C-6）， 139.0 （C-7）， 119.1 （C-8）， 166.6 （C-9）， 126.2 （C-1′）， 129.6 （C-2′， 6′）， 115.2 （C-3′， 5′）， 156.1 （C-4′）， 34.7 （C-7′）， 40.9 （C-8′）。以上数据与文献报道（魏娜娜和娄红祥，2012）一致，故鉴定化合物4为N-顺式-对-香豆酰酪胺。

化合物5 白色粉末。1H-NMR （500 MHz，dMSO-d6） δ：7.35 （2H，d， J = 8.5 Hz， H-2， 6）， 7.29 （1H，d， J = 15.6 Hz， H-7）， 7.13 （2H，d， J = 8.5 Hz， H-2′， 6′）， 6.76 （2H，d， J = 8.5 Hz， H-3， 5）， 6.71 （2H，d， J = 8.5 Hz， H-3′， 5′）， 6.47 （1H，d， J = 15.6 Hz， H-8）， 4.53 （1H， m， H-7′）， 3.17 （2H， m， H-8′a/8′b）。13C-NMR （125 MHz，dMSO-d6） δ：125.7 （C-1）， 129.6 （C-2， 6）， 116.3 （C-3， 5）， 158.7 （C-4）， 139.2 （C-7）， 118.8 （C-8）， 166.1 （C-9）， 134.5 （C-1′）， 127.6 （C-2′， 6′）， 115.2 （C-3′， 5′）， 156.9 （C-4′）， 71.6 （C-7′）， 47.5 （C-8′）。以上数据与文献报道（魏娜娜和娄红祥，2012）一致，故鉴定化合物5为 N-反式-对-香豆酰基章鱼胺。

化合物6 白色粉末。1H-NMR （500 MHz，dMSO-d6） δ：7.62 （2H，d， J = 8.5 Hz， H-2， 6）， 7.12 （2H，d， J = 8.5 Hz， H-2′， 6′）， 6.70 （2H，d， J = 8.5 Hz， H-3， 5）， 6.69 （2H，d， J = 8.5 Hz， H-3′， 5′）， 6.47 （1H，d， J = 1 Hz， H-7）， 5.78 （1H，d， J = 1 Hz， H-8）， 4.53 （1H， m， H-7′）， 3.17 （2H， m， H-8′a/8′b）。13C-NMR （125 MHz，dMSO-d6） δ：125.7 （C-1）， 129.6 （C-2， 6）， 116.3 （C-3， 5）， 158.7 （C-4）， 137.5 （C-7）， 118.9 （C-8）， 166.6 （C-9）， 134.5 （C-1′）， 127.6 （C-2′， 6′）， 115.2 （C-3′， 5′）， 156.9 （C-4′）， 71.5 （C-7′）， 47.4 （C-8′）。以上数据与文献报道（魏娜娜和娄红祥，2012）一致，故鉴定化合物6为 N-顺式-对-香豆酰基章鱼胺。

化合物7 浅黄色结晶。1H-NMR （500 MHz， CDCl3） δ：7.21 （1H，d， J = 2.0 Hz， H-2）， 6.78 （1H，d， J = 8.0 Hz， H-5）， 7.08 （1H，dd， J = 8.0， 2.0 Hz， H-6）， 7.51 （1H，d， J = 16.0 Hz， H-7）， 6.39 （1H，d， J = 16.0 Hz， H-8）， 3.91 （3H， -OCH3）;13C-NMR （125 MHz， CDCl3） δ：127.2 （C-1）， 109.4 （C-2）， 146.5 （C-3）， 147.7 （C-4）， 114.0 （C-5）， 123.5 （C-6）， 56.1 （-OCH3）。以上數据与文献报道（王青虎等，2014）一致，故鉴定化合物7为阿魏酸。

化合物8 淡黄色粉末。1H-NMR （500 MHz，dMSO-d6） δ：12.96 （1H， s， 5-OH）， 7.92 （2H，d， J = 9.0 Hz， H-2′， 6′）， 6.92 （2H，d， J = 9.0 Hz， H-3′， 5′）， 6.78 （1H， s， H-3）， 6.48 （1H，d， J = 2.1 Hz， H-8）， 6.18 （1H，d， J = 2.1 Hz， H-6）;13C-NMR （125 MHz，dMSO-d6） δ：94.0 （C-8）， 98.8 （C-6）， 102.8 （C-3）， 103.7 （C-10）， 11 6.0 （C-3′， 5′）， 121.2 （C-1′）， 128.5 （C-2′， 6′）， 157.3 （C-9）， 161.2 （C-4′）， 161.4 （C-5）， 163.7 （C-7）， 164.2 （C-2）， 181.7 （C-4）。以上数据与文献报道（徐燕和梁敬钰，2005;田菁等，2005）一致，故鉴定化合物8为芹菜素。

化合物9 黄色粉末。1H-NMR （500 MHz，dMSO-d6） δ：12.97 （1H， s， 5-OH）， 10.87 （1H， s， 7-OH）， 9.96 （1H， s， 4′-OH）， 9.45 （1H， s， 3′-OH）， 7.42 （1H，dd， J = 8.3， 2.2 Hz， H-6）， 7.39 （1H，d， J = 2.2 Hz， H-2）， 6.89 （1H，d， J = 8.3 Hz， H-5）， 6.67 （1H， s， H-3）， 6.44 （1H，d， J = 2.0 Hz， H-8）， 6.19 （1H，d， J = 2.0 Hz， H-6）;13C-NMR （125 MHz，dMSO-d6） δ：164.6 （C-2）， 103.3 （C-3）， 182.1 （C-4）， 161.9 （C-5）， 99.3 （C-6）， 164.6 （C-7）， 94.3 （C-8）， 157.8 （C-9）， 104.2 （C-10）， 122.0 （C-1′）， 113.8 （C-2′）， 146.2 （C-3′）， 150.2 （C-4′）， 116.5 （C-5′）， 119.5 （C-6′）。以上数据与文献报道（徐燕和梁敬钰，2005）基本一致，故鉴定化合物9为木犀草素。

化合物10 淡黄色粉末。1H-NMR （500 MHz， CD3OD） δ：6.20 （1H，d， J = 16.0 Hz， H-8）， 6.79 （1H，d， J = 8.5 Hz， H-5）， 6.95 （1H，dd， J = 8.5， 2.0 Hz， H-6）， 7.02 （1H，d， J = 2.0 Hz， H-2）， 7.53 （1H，d， J = 16.0 Hz， H-7）;13C-NMR （125 MHz， CD3OD） δ：127.7 （C-1）， 115.8 （C-2）， 146.9 （C-3）， 149.4 （C-4）， 116.6 （C-5）， 122.8 （C-6）， 147.0 （C-7）， 115.1 （C-8）， 171.1 （C-9）。以上数据与文献报道（朱仝飞等，2017）基本一致，故鉴定化合物10为咖啡酸。

化合物11 黄色针状结晶。1H-NMR （500 MHz，dMSO-d6） δ：2.68 （1H， t， J = 14.2 Hz， H-7）， 3.12 （1H，dd， J = 14.6， 5.2 Hz， H-7）， 3.29 （1H， m， H-4）， 4.54 （1H，d， J = 13.8 Hz， H-6a）， 6.04， 6.18 （各2H， s， OCH2O）， 6.76 （1H， s， H-3）， 7.26-7.36 （3H， m， H-8， 9， 10）， 8.00 （1H，d， J = 7.7 Hz， H-11）， 8.27 （1H， s， -NH）。13C-NMR （（125 MHz，dMSO-d6） δ：142.6 （C-1）， l47.4 （C-2）， 106.6 （C-3）， 124.6 （C-3a）， 36.2 （C-4）， 168.8 （C-5）， 49.9 （C-6a）， 35.6 （C-7）， 133.8 （C-7a）， 128.5 （C-8）， 128.0 （C-9）， 127.3 （C-10）， 126.4 （C-11）， 130.3 （C-11a）， 114.8 （C-11b）， 124.0 （C-11c）， 101.1 （OCH2O）。以上数据与文献报道（刘布鸣等，2014）一致，故鉴定化合物11为 5-氧阿朴菲碱。

化合物12 白色针晶。1H-NMR （500 MHz， CDCl3） δ：0.75， 0.77， 0.90， 0.91， 0.93， 0.98， 1.13 （各 3H， s， 7×CH3）， 5.30 （1H， brs， H-12）;13C-NMR （125 MHz， CDCl3） δ：38.6 （C-1）， 27.5 （C-2）， 79.2 （C-3）， 38.9 （C-4）， 55.4 （C-5）， 18.5 （C-6）， 32.8 （C-7）， 39.4 （C-8）， 47.8 （C-9）， 37.2 （C-10）， 23.2 （C-11）， 122.8 （C-12）， 143.8 （C-13）， 41.8 （C-14）， 27.8 （C-15）， 23.6 （C-16）， 46.7 （C-17）， 41.1 （C-18）， 46.0 （C-19）， 30.8 （C-20）， 34.0 （C-21）， 32.6 （C-22）， 28.2 （C-23）， 15.8 （C-24）， 15.6 （C-25）， 17.3 （C-26）， 26.1 （C-27）， 183.5 （C-28）， 32.2 （C-29）， 23.7 （C-30）。以上数据与文献报道（刘布鸣等，2014）基本一致，故鉴定化合物12为齐墩果酸。

3 结论

本研究从小花清风藤的干燥叶中共分离得到12个化合物，其中化合物2、4-9为首次从清风藤属植物中分离得到，化合物1、3、10为首次从该植物中分离得到，化合物1-6为苯丙酰胺类生物碱，化合物8，9为黄酮类化合物，化合物7，10为苯丙素类化合物，还有两个小花清风藤中常见的化合物，分别是化合物11为阿朴菲类生物碱，化合物12为五环三萜类皂苷，这些化合物与文献报道的小花清风藤中的化学成分类型完全相符。从化学结构角度来看，6种苯丙酰胺类生物碱被集中分离得到，表明该类生物碱应为小花清风藤中较为常见的一类化合物，其他与化合物1-6结构类似的生物碱类化合物，也应广泛分布于该植物中。

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