鸡肉组织中四环素类药物残留检测方法

张智

摘要：科学使用兽药能有效防范动物疫情，确保动物健康生长，但不合理地使用兽药和饲料添加剂，会导致药物残留，影响畜产品的质量安全。该文论述了鸡肉组织中四环素类抗生素药物残留检测技术，以进一步提高抗生素残留检测质量。

关键词：鸡肉;四环素;药物残留;检测技术

中图分类号：S859.84

文献标识码：B

doi： 10.3969/j.issn.2096-3637.2019.11.048

引言

抗生素在禽类动物养殖中使用十分普遍，但是抗生素不合理使用，也是导致畜禽制品中抗生素残留超标的主要原因，在某些地区滥用抗生素已成为制约养殖业健康发展的主要问题。四环素类抗生素在禽类动物养殖中已广泛应用，但很多养殖户，尤其是中小规模养殖户，不注重合理使用药物，普遍存在滥用药物现象，导致过量的抗生素在肉鸡体内聚集，损害肝脏组织，使致病原对多种抗生素的抵抗能力增强，抗生素在肌肉组织中残留量也不断增加，对消费者身心健康造成巨大威胁。

微生物检测法

鸡肉组织中四环素类抗生素药物残留检测方法应用最早是微生物检测法，其工作原理是根据抗生素对某些微生物正常生长机能代谢具有抑制作用判定检测样品中微生物药物残留。经常使用到的微生物检测方法，包括纸片法、抑制法。纸片法主要是利用某些能对致病菌繁殖产生抑制作用的物质，通过抑制致病菌生长，在纸片上能形成明显的抑菌罔，以此判定肌肉组织中是否存在四环素残留。抑制法主要是利用某种益生菌的副产物能与某些化学物质产生反应，检测肌肉组织中是否存在四环素残留。该项技术主要会应用到嗜热链球菌、l，2，3，5一氯化三苯四氮唑，嗜热链球菌体内会产生一种叫琥珀酸脱氢酶的物质，这种物质和1，2，3，5一氯化三苯四氮唑相互作用能形成一种红色的代谢产物，以此证明肌肉组织中是否存在四环素残留，抑制法最早应用于乳汁抗生素残留检测[1]。

薄层色谱法

在对鸡肌肉组织中是否存在四环素进行初步筛选中应用该种检测方法。该种检测方法的一个显著特点是操作简便，出结果快，可实现对多个样本的同一个批次检测，能在有限的时间内对大量样本进行处理。在应用中涉及到的化学试剂相对较少，更不需要复杂昂贵的器械投入，能在现场开展抗生素残留检测。但是在样品检测前仍然需要对样品进行复杂的处理，并且该种方法的灵敏度不高，不能对组织进行定量检測，重复效果较差。另外，在对样本进行处理过程中，需要使用到的仪器和设备较多，需要使用紫外检测器或者串联荧光检测器进行检测。该种方法常用于鸡肉组织中四环素类抗生素药物残留初步筛选检测。

分光度检测法

分光度检测法主要是利用四环素具有一定吸光度的特点，在特定的紫外线区域内会表现出一定的吸光反应，以此检测组织样本中是否存在四环素残留。利用四环素类抗生素与某些金属离子产生一系列复杂的络合反应后产生沉淀物，然后再利用四环素的吸收光谱发生变化情况，进行定量测定。分光光度检测法主要包括紫外光谱检测法和荧光一紫外结合分光度检测法[2]。

3.1 紫外光谱检测法

紫外光谱检测法具有操作简单、结果快速、操作简便、设备简单、成本投入较低的特点，在组织快速检测中具有十分广泛的应用。在组织检测前，需要采取一定的技术手段，将肌肉中的蛋白质去除，然后测定吸光度大小，根据得到的曲线范围，判定组织样本中是否存在四环素残留。该种检测方法与国际上通用的抑制法相比，检测限度更低，灵敏性更强。

3.2 荧光一紫外结合分光度检测法

荧光一紫外结合分光度检测法是将紫外光谱法和荧光分光度检测法有效结合，这2种方法有效结合，使操作更加方便，分析精确度更高，但是整个检测结果的灵敏度不是很高。荧光法具有很高的灵敏度，但四环素类抗生素属于弱荧光物质，通常不能在荧光分度计上直接得到检测结果。而通过将荧光检测法和紫外线光谱检测法有效结合，能实现在荧光剂上直接检测四环素类抗生素的残留情况，测得四环素类抗生素的现象范围为0.10-9.00μg/mL。此外，测定四环素类抗生素还有溴化十六烷基三甲基胺荧光法，其检测下限史低，灵敏性更强，检测的现象范围通常为0.01-12.0μg/mL。该种检测技术除在鸡肉组织中应用外，在测定牛奶中四环素类抗生素残留，也具有很好的应用效果。

高效液相色谱法

高效液相色谱法是在高压环境下流动相的驱动，使样品通过高性能层析柱，然后将样品中的抗生素进行高效分离。该种检测方法通常需要有高性能的检测设备和先进的操作系统，成本投入较高，但灵敏性较好，自动化程度较高，结果重复性好。高效液相色谱法已成为目前鸡肉组织中四环素类抗生素药物残留应用最为广泛的一种检测技术，其应用范围更广，除应用在鸡肉组织中外，还会用到牛奶，其他动物组织类四环素检测。其中应用较为广泛的检测方法主要包括高效液相结合化学方法、高效液相一质谱联用法。

4.1 高效液相结合化学发光法

化学发光分析法具有灵敏度高，线性范围广，仪器没备简单，成本投入低的特点，通过将该种方法和高效液相色谱法有效结合，能有效发挥高效液相色谱具有高效分离的特性，使化学发光分析法成为一种有效的痕量和超痕量分析技术。该种方法常用于四环素类抗生素中的四环素、土霉素、金霉素、多西环素的检测，这种抗生素的检出限度为0.002-0.008μg/mL。

4.2 高效液相一质谱联用法

高效液相色谱法的显著优势能分离检测样本中的抗生素，它能为某些混合物的抗生素分离提供有效的选择，但是难以得到物质的结构信息，在检测中主要依靠与标准误对比判断残留物。而质谱检测法能提供物质的结构信息，具有样品使用量少、检测精确度高的特点，但是在进行样品分析中，需要进行纯化处理，具有一定纯度后，才能进行直接分析。通过将高效液相色谱法和质谱法有效联合，发挥2种方法各自特点，目前该种方法已广泛应用于禽类、猪肉、牛奶等畜禽组织样本的四环素类抗生素药物残留检测[3]。

结束语

为有效保障人类生命财产健康，促进养殖产业健康发展，应引导养殖户科学使用抗生素，正确认识抗生素的用途和危害，同时相关检疫人员和卫生监督人员还应进一步加强抗生素类药物残留检测，规范养殖户养殖行为，确保合理使用抗生素。

参考文献

[l]沈虎琴，檀华蓉，祁克宗，等斋禽粪便中的氟喹诺酮类与四环素类兽药残留同时提取的方法研究[J].分析测试学报，2012（3）：45-48.

[2]刘军，刘清，刘钰，等.牛乳中四环素类兽药残留量的监测调查[J].甘肃科技纵横，2002（5）：56.

[3]范志影，刘庆生，石冬冬，等.液相色谱一串联质谱法同时测定生鲜乳中四环素类和p一内酰胺类药物残留[J]。中国畜牧杂志，2013（9）：45-47.