王代波 刘国华 封天洪
摘 要:为进一步提升野生多穗柯资源的利用价值,针对野生多穗柯活性成分进行了系统的分析,同时系统对比了水煎煮法与超声波辅助提取法(乙醇浓度依次选取10%、30%、50%、70%、90%)的黄酮提取率,希望为多穗柯的推广应用提供一定的参考。
关键词:野生多穗柯;活性成分;提取物
多穗柯(Lithocarpus polystachyus Rehd)亦称作甜茶,其属于壳斗科,是一种药食两用的植物,在药、茶及糖等3个领域都有着广泛的应用[1]。从多穗柯活性成分进行分析,黄酮类化合物是其主要的活性成分,主要集中在叶部,通过多年的研究,当前从多穗柯叶部分离出的黄酮类化合物数量已经达到20余种。依照有关文献资料能够看出,多穗柯中的黄酮类化合物能够发挥抑菌、抗过敏、抗氧化以及降血糖等药理功能。上述药理功能当中黄酮类成分主要包含3-羧基根皮苷、根皮苷、三叶苷。根皮苷、三叶苷的生物活性在诸多领域有着广泛的应用,包括化妆品、药物及食品等[2]。为了进一步了解多穗柯活性成分,促进多穗柯资源的开发,进一步研究了野生多穗柯活性成分,现针对相关活性成分进行如下分析。
1 材料及方法
1.1 材料选取
材料选择贵州罗甸地区野生多穗柯,采集多穗柯叶,在进行冲洗、通风晾干处理之后,将其置入烘箱中烘干处理。选择粉碎机完全粉碎多穗柯叶,然后选择60孔(边长0.25 mm)与120孔(边长0.125 mm)的检验筛实施筛选处理,最终选择中间位置的样品。
1.2 标准溶液制备
选择10 mg芦丁对照品(通过120 ℃减压干燥处理之后,保持恒质量),将其置入50 mL容量瓶当中,同时融入30 mL 85%浓度的乙醇。通过微热让溶液完全溶解,放置到自然冷却状态,融入乙醇稀释到对应的刻度,摇匀处理之后,制作标准芦丁对照品溶液,浓度为0.2 mg/mL。
1.3 标准曲线制备
采用不同质量的芦丁标准品(0 mL、0.5 mL、1.0 mL、2.0 mL、3.0 mL、4.0 mL、5.0 mL)融入25 mL容量瓶当中,融入1 mL浓度5%的亚硝酸钠溶液,摇匀之后进行6 min的放置,接着融入10 mL浓度1.0 mol/L的NaOH,最终选择85%的乙醇进行稀释处理,具体需要稀释到对应刻度,摇匀之后进行15 min的放置。选择第1瓶行空白,选择在510 m位置进行吸光度测量,具体是以吸光值(y)当作纵坐标,芦丁浓度(x)则作为横坐标,进行标准曲线的绘制,最终方程为“y=0.074 7x-0.000 1,r=0.999 2”。
1.4 样品黄酮含量测定
选取5 g多穗柯嫩叶,进行干燥之后粉碎处理,融入乙醇溶液之后进行24 h的浸泡。采用超声波实施提取、过滤,完成蒸发之后将乙醇回收,加水定容到100 mL,获取对应的样品溶液。选取1 mL样品溶液,置入25 mL容量瓶当中,融入1 mL的5%浓度亚硝酸钠,摇匀之后进行6 min的放置,再融入10 ml浓度1 mol/L的氢氧化钠,加水定容到100 mL,摇匀之后进行15 min的放置。选择分光光度法在λ=510 nm的位置进行吸光度的测量,然后综合参考回归方程进行黄酮含量的计算。
2 结果
選择6份5 g的多穗柯嫩叶,进行烘干粉碎之后进行处理,选择水煎煮法与超声波辅助提取法(乙醇浓度依次选取10%、30%、50%、70%、90%),针对样品实施黄酮含量测定,详细结果见表1。
根据表1可知,选择超声波辅助提取法能够显著提升多穗柯当中黄酮分的提取率。在溶剂极性持续变小的情况下,黄酮提取率也呈现为不断增大的趋势,而在70%乙醇浓度的情况下,能够达到最高的黄酮提取率,90%乙醇浓度情况下的黄酮提取率则呈现降低的趋势,主要原因在于溶剂极性变小,多穗柯当中其余物质也同时被分离,导致黄酮提取率有所降低[3]。
3 讨论
多穗柯作为现阶段广泛应用的一种药食同源性植物,其具有较高含量的茶多酚、黄酮类化合物,但其本身的咖啡碱、还原糖相对较低,所以其具有理想的药用价值、食用价值[4]。根据研究内容可以看出,多穗柯当中黄酮的极性属于中性极性物质,其无疑为多穗柯总黄酮提取提供了有效的参数。从研究结果能够看出,超声波辅助提取法的优势突出,其主要是通过超声波机械作用、空化作用,促进植物细胞组织变形或者破壁,能够显著提升总黄酮提取率,70%浓度乙醇是最佳方案。
参考文献:
[ 1 ] 王坤,黄晓露,李宝财,等.30个多穗柯种源主要经济性状及活性成分分析与评价[J].西南农业学报,2019,32 (5):1051-1056.
[ 2 ] 于沙蔚.反相高效液相色谱法测定福建多穗柯中不同部位根皮苷的含量[J].海峡药学,2018,30(7):59-60.
[ 3 ] 黄晓露,蓝金宣,李宝财,等.不同光质处理对多穗柯幼苗光合色素及抗氧化酶的影响[J].广西林业科学,2017,46(4):354-359.
[ 4 ] 王坤,李开祥,陈金艳,等.野生多穗柯主要活性成分及其含量变化[J].经济林研究,2016,34(4):96-100,122.
(收稿日期:2019-10-23)