磷脂酰肌醇蛋白多糖-3和细胞角蛋白-19联合免疫组化检测在肝细胞肝癌诊断和鉴别诊断中的价值分析

李林

（巴中市中心医院病理科 四川 巴中 636000）

肝癌主要包含肝细胞癌、胆管细胞癌、混合型癌三种类型，是一种比较常见的恶性肿瘤，在我国全部恶性肿瘤中排位第三，具有较高的发病率及致死率[1]。肝癌病症传统的治疗手段为手术治疗方式，但是肝癌患者通常由于各种因素无法开展手术治疗，因此，放射治疗技术逐渐成为不能应用手术治疗方式的患者的主要治疗手段，同时也是首选[2]。本次研究将巴中市中心医院病理科于2014年7月－2018年8月期间接收诊治的100例患者的肝癌组织作为研究样本，探究在肝细胞肝癌诊断和鉴别诊断中联合应用磷脂酰肌醇蛋白多糖-3(GPC-3)和细胞角蛋白-19(CK-19)免疫组化检测方式的临床疗效。现报道如下。

1.资料与方法

1.1 一般资料

选取2014年7月—2018年8月期间，巴中市中心医院病理科接收的100例患者的肝癌组织作为研究样本，本次研究选取的病理样本均为临床已确诊肝癌的首发病例，排除合并其他肿瘤及转移等异常情况。100份肝癌组织样本中，肝细胞肝癌、肝内胆管细胞癌、肝细胞肝癌伴随肝内胆管细胞癌病例数分别为66例、23例、11例。其中男性患者及女性患者分别为57例、43例。

1.2 研究方法

对全部患者开展磷脂酰肌醇蛋白多糖-3(GPC-3)和细胞角蛋白-19(CK-19)免疫组化检测处理，探究磷脂酰肌醇蛋白多糖-3(GPC-3)和细胞角蛋白-19(CK-19)在三种肝细胞癌患者中的检测情况。

1.3 检验方法

标本经固定（10%甲醛溶液）后切取肿瘤组织并依次行脱水、透明、浸蜡、包埋、切片（厚度4um）等处理措施，染色使用苏木素-伊红染色法（hematoxylin and eosin,HE），之后利用Edmondson-Steiner法判断标本分化程度（高分化、中分化、低分化）。免疫组化采用EnVision 2步法，即上述切片依次行烤片、脱蜡、逐级浓度乙醇脱水等步骤处理，之后利用过氧化氢溶液（3%）浸泡5min、PBS缓冲液浸泡3次（每次5min）。待上述步骤完成后将标本放于柠檬酸缓冲液中（pH6.0）行高温高压修复，即高压锅喷气后予以2min加热-中火2min-关火（焖）10min-37℃水浴冷却。待上述步骤完成后经PBS缓冲液冲洗3次（时间同上）并加入鼠抗人单克隆抗体（GPC-3一抗）、4℃环境过夜，之后再次经PBS缓冲液冲洗3次（时间同上）并加入通用型抗体（二抗 PV6000，37℃、10min），经PBS缓冲液冲洗3次（时间同上）并行DAB染色，经PBS缓冲液终止染色，乙醇脱水（浓度由低至高）至入二甲苯、封片。应注意的是，CK-19、GPC-3免疫组化染色步骤相同，但CK-19于高温高压修复后应放入37℃胃酶消化（1min）并行经PBS缓冲液冲洗3次（时间同上），之后加入鼠抗人单克隆抗体后步骤同GPC-3。

1.4 统计学处理

对试验数据采用SPSS18.0软件进行统计分析，计量资料采取t检验，用±s表示；计数资料用χ2检验，用百分比（%）表示。若P＜0.05，则表明差异具有统计学意义。

2.结果

2.1 磷脂酰肌醇蛋白多糖-3及细胞角蛋白-19在肝细胞肝癌、肝内胆管细胞癌、肝细胞肝癌伴随肝内胆管细胞癌情形中的表达情况见表1、表2。

表1 磷脂酰肌醇蛋白多糖-3在各癌肿中的表达情况

表2 细胞角蛋白-19在各癌肿中的表达情况

2.2 联合应用磷脂酰肌醇蛋白多糖-3及细胞角蛋白-19在肝细胞肝癌、肝内胆管细胞癌、肝细胞肝癌伴随肝内胆管细胞癌情形中的表达情况见表3。

表3 联合应用免疫组化检测在各癌肿中的表达情况

3.讨论

原发性肝癌是一种在中国和东亚地区具备高发性特征的恶性肿瘤疾病，遵照世界卫生组织测算发布的相关研究数据，在每10万人口中，肝癌疾病的年均报告病死例数介于20～40之间，是临床中常见的恶性肿瘤，其报告病死率长期占据第二位，对人群健康造成严重威胁。

原发性肝癌患者尤其是原发性肝细胞肝癌患者合并发生肝硬化疾病的可能性长期处于较高水平，在我国为64.25%～84.16%。在肝硬化患者的临床病程发生发展过程中，患者通常会发生肝脏组织基础细胞变性坏死病理过程，患者的间质结缔组织逐渐发生病理性增生，以及形成纤维间隔结构条件下，患者肝硬化病理组织周围残余的细胞通常会发生结节状再生病理现象，而且在患者肝脏细胞发生损害病理现象和增生病理现象的背景下，处于增生状态的细胞极有可能会发生间变病理变化，或者是癌变病理变化，继而给患者的综合性生存质量造成极其严重的不良影响，切实做好肝硬化患者的早期诊断治疗干预，对于优化患者的生存质量有重要意义。

从基础性形态学理论和细胞遗传学理论的角度展开阐释分析，通常将原发性肝癌疾病的病理类型具体划分为三个类型：肝细胞肝癌（HCC）、肝内胆管细胞癌（ICC），以及肝细胞癌合并肝内胆管细胞癌（CHC）。在常规性检查诊断技术方法的应用背景下，通常较难实现对上述三种病理表现类型肝癌患者的有效鉴别区分，需要临床医学工作者切实探索和研究具备实际应用价值的诊断与鉴别诊断技术。磷脂酰肌醇蛋白多糖-3物质是一种在血清学和组织学研究背景下具备充分代表性的肝脏肿瘤病理组织检测标志物，且磷脂酰肌醇蛋白多糖-3物质本身在良性肝细胞肝癌病理组织和恶性肝细胞肝癌病理组织中的表达程度具备显著的差异化特征，在因丙型肝炎病毒感染诱导的肝硬化疾病背景患者的病程早期发展阶段，原发性肝细胞肝癌患者病理组织中磷脂酰肌醇蛋白多糖-3物质的表达可能达100.00%，而在其他类型肝脏器官良性疾病病理组织和健康肝脏器官中的表达可能为0。我国部分学者研究报道，磷脂酰肌醇蛋白多糖-3物质在原发性肝癌患者病理组织中的表达比率通常可以达到81.50%，同时在癌症病理组织周围和远端性肝癌病理组织中通常不会表达，这一基本特点对于临床医师检查诊断原发性肝癌患者的基础性病理组织。具备一定的参考价值。

磷脂酰肌醇蛋白多糖-3归属于磷脂酰肌醇蛋白聚糖，同时也是一种癌胚蛋白，在胚胎中及生长发育过程中实现表达过程，对形态的形成过程及生长过程具有重要的控制作用[3]。磷脂酰肌醇蛋白多糖-3借助于糖基磷脂酰肌醇实现与细胞膜的连接过程，进而实现对细胞生长及分化的重要作用。在胚胎发育及胎儿时期，磷脂酰肌醇蛋白多糖-3的表达具备显著的器官组织特异性[4]。肝实质细胞的表达过程贯穿整个孕期。本次选取我院接收诊治的100例患者的肝癌组织样本作为样本，对全部患者开展磷脂酰肌醇蛋白多糖-3(GPC-3)和细胞角蛋白-19(CK-19)免疫组化检测，探究磷脂酰肌醇蛋白多糖-3(GPC-3)和细胞角蛋白-19(CK-19)在三种患者中的检测情况。发现，经磷脂酰肌醇蛋白多糖-3免疫组化检测处理后，肝细胞肝癌、肝内胆管细胞癌、肝细胞肝癌伴随肝内胆管细胞癌情形的阳性检测率分别为84.8%、17.4%、100.0%，三组阳性检测率对比存在显著性差异；经细胞角蛋白-19免疫组化检测处理后，肝细胞肝癌、肝内胆管细胞癌、肝细胞肝癌伴随肝内胆管细胞癌情形的阳性检测率分别为0、95.7%、100.0%，三组阳性检测率对比存在显著性差异。

综上所述，磷脂酰肌醇蛋白多糖-3免疫组化检测处理在肝细胞肝癌、肝内胆管细胞癌方面具备显著的灵敏性及特异性，而联合应用磷脂酰肌醇蛋白多糖-3(GPC-3)和细胞角蛋白-19(CK-19)免疫组化检测方式在肝细胞肝癌、肝内胆管细胞癌、肝细胞肝癌伴随肝内胆管细胞癌情形的临床诊断方面均具有显著作用。