大连市某农村妇女高危型HPV持续感染的 影响因素分析*

刘明月，崔璐，李晓枫，马莉，陈欣，金星，高晓虹

（大连医科大学公共卫生学院 流行病教研室，辽宁 大连 116044）

宫颈癌是一种严重危害女性生殖健康的恶性肿瘤，在全世界女性恶性肿瘤中发病率居第3位[1]。2012年，全球宫颈癌新发病例约527 600例，死亡人数约265 700例[2]。人类自身免疫功能可消除≥90%人乳头瘤病毒（human papilloma virus, HPV）感染[3]，高危型HPV持续感染是宫颈癌发生、发展的主要原因。本研究对2 000例妇女进行HPV筛查，并且2年后对其进行随访。探讨高危型HPV持续感染因素，为降低高危型HPV持续感染和宫颈癌的发生提供参考依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料

本研究依托2015年国家公益性行业科研专项“适合中国农村地区的宫颈癌筛查技术与示范研究”，采用多中心人群筛查队列研究。为保证研究对象的代表性，采取多阶段抽样方法，选取2015年1月—2015年 12月（第1年）大连市某地区的宫颈癌筛查项目点抽取当地户籍或常住人口的2 000例妇女作为筛查对象，选择过去3年中未参加过筛查的人群。第3年 （2017年度）对已被筛查对象进行随访。纳入标准：①年龄35～64岁；②无宫颈癌疾病史，宫颈完整；③无临床怀孕可疑症状；④理解研究程序，自愿参与。排除标准：①怀孕或哺乳期妇女；②月经期或任何情况导致的引导出血；③患有宫颈癌或因宫颈疾病切除宫颈。本研究通过北京协和医院伦理委员会审查（编号S-705），筛查对象签署知情同意书。

1.2 仪器与试剂

SLAN-96P型荧光定量PCR仪（上海宏石医疗科技有限公司），高危型HPV核酸分型测定试剂盒（上海之江生物科技股份有限公司，Z-TD-0324-04-24）。共有15种高危HPV亚型，依次为HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、66、68及 82型。

1.3 方法

1.3.1 问卷调查研究对象在研究人员指导下完成宫颈癌筛查调查表，调查表内容包括年龄、疾病史及月经等基本信息。为保证参与者的个人隐私及问卷答案的真实性，本研究将采取调查员及妇女一对一、面对面访谈式问卷调查，之后进行妇科检查、样本采集及临床检查相关表格填写。根据检查结果填写临床检查表、诊断结果表。

1.3.2 宫颈细胞取样①妇科医生将窥阴器或阴道张开器暴露宫颈，将宫颈分泌黏液拭去；②将宫颈刷轻轻插入宫颈口1.0～1.5 cm，顺时针缓慢转动宫颈刷3～5圈；③将专用细胞保存液置于有样本的取样管中，取出宫颈刷放入取样管后，拧紧瓶盖；④样本应尽快送检，若不能则在室温保存＜24 h。

1.3.3 宫颈脱落细胞样本处理样本细胞保存液充分震荡摇匀，吸取1 ml液体转至1.5 ml离心管中13 000 r/min离心5 min。沉淀加无菌生理盐水1 ml混匀，13 000 r/min离心5 min，小心吸弃上清。沉淀直接加入100 μl核酸提取液充分混匀，100℃水浴或99℃干浴10 min，13 000 r/min离心5 min，取上清4 μl作为聚合酶链反应（PCR）模板。

1.3.4 HPV脱氧核糖核酸（DNA）分型检测检测方法及结果判定按照高危型HPV核酸分型测定试剂盒（荧光PCR法）说明书严格执行。PCR反应条件：94℃预变性2 min,94℃变性2 min，93℃退火10 s，62℃延伸31 s，共40个循环；单点荧光检测在62℃，反应体系为40μl。

1.4 质量控制

正式调查开始前培训调查员，并运用调查问卷进行预调查。为保证整个研究过程高质量，进行妇科检查的医护人员将按统一标准接受培训。在整个初筛当天流程未结束前，知情同意书、调查问卷及临床检查表全程交由妇女本人保管。参与者完成所有项目后，质量控制组工作人员需对上述用表进行质量控制。

1.5 统计学方法

数据分析采用SPSS 24.0统计软件。计数资料以率（%）表示，比较用χ2检验，影响因素的分析用多因素Logistics回归模型，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 基本情况

2015年度对2 000例农村妇女进行HPV筛查，感染型别共有14种，阳性191例，阳性率为9.55%。2017年随访1 432例妇女，进行HPV检查，感染型别共有15种，阳性151例，阳性率为10.54%。见 表1。

表1 2015年、2017年HR-HPV感染型别分布

2.2 随访及感染情况

2017年对1 432例研究对象完成随访，随访率为71.6%。2015年筛查的191例阳性患者中，2017年筛查中有50例失访、51例持续感染、90例自然清除。141例感染高危型HPV随访对象中，51例为持续感染高危型HPV，持续感染率为36.17%；90例为自然清除高危型HPV，自然清除率为63.83%。

2.3 高危型HPV持续感染的单因素分析

高危型HPV持续感染的甲状腺疾病、高血压、阴道分泌物异常、宫颈炎及尿道感染因素比较，经χ2检验，差异有统计学意义（P＜0.05）；而年龄、吸烟、采取避孕措施、肿瘤及怀孕次数比较，经χ2检验，差异无统计学意义（P＞0.05）。见 表2。

表2 高危型HPV持续感染的单因素分析

2.4 高危型HPV持续感染的多因素Logistics回归分析

将单因素分析中有差异的影响因素纳入多因素Logistics回归模型中，按照引入标准0.05和排除标准0.10进行分析。结果显示，甲状腺疾病和宫颈炎是高危型HPV持续感染的危险因素（P＜0.05）。见表3。

表3 影响高危型HPV持续感染的多因素Logistics回归分析参数

3 讨论

HPV是一种双链环状的DNA病毒，可特异感染人皮肤及黏膜。目前已发现的HPV亚型有200余种，分为高危型和低危型，其中最常见的致癌亚型是HPV16和HPV18[4-6]。近年来，HPV发病率呈年轻化趋势，尤其是在经济欠发达的国家和地区，对女性生殖健康带来极大的危害[7]。随着病因学研究的不断发展、发现，持续的高危型HPV感染是引起宫颈癌重要因素，研究高危HPV持续感染的影响因素具有重要意义。

本研究结果得出，高危型HPV感染在2015、2017年度感染率分别为9.55%和10.54%，此结果低于赵佳[8]和钟威达[9]等的17.5%和25.96%，与郭月环[10]的11.17%接近。我国女性宫颈癌的发病率和病死率呈逐年上升趋势，且具有地域差异[9]。本研究调查结果显示，高危型HPV持续感染率为36.17%，这一结果高于钟兴明等[11]和宁尼亚[12]的25.76%和19.55%，可能是由于本研究的研究对象来源于农村妇女，医疗水平和个人卫生有差异所造成。因此，需要在以后研究中进一步探讨。

高危型HPV感染作为造成宫颈癌的发生、发展主要的致病因素，除此之外，还有多种致病因素也同时存在。如能在早期有针对性地对引起宫颈癌发病的高危影响因素进行预防，对降低宫颈癌的发病率具有重要的意义。高危型HPV感染发生在子宫颈癌病变前，并且是引起宫颈癌病变的主要因素。宫颈癌在发生高危型HPV感染前治愈率高达85%[13]，而在发生高危型HPV感染后患者的治愈率下降，甚至在持续出现HPV感染的患者中治愈率＜50%。控制感染高危型HPV非常重要，预防持续感染HPV病毒也极其重要，所以本研究通过对141例感染高危型HPV研究对象进行影响因素分析。

通过单因素分析结果得出，年龄、吸烟、肿瘤及怀孕次数方面比较无差异，其中年龄因素与宁尼亚[12]和张蕴蕊[14]的研究结果相反。张蕴蕊的研究指出，持续感染的高危型HPV主要分布在31～50岁年龄段[14]，造成本研究结果原因可能是年龄的纳入范围有缺陷。本研究年龄集中在40～60岁，缺少20～30岁年龄段女性。吸烟因素与覃小敏等[15]的研究结果一致，张蕴蕊[14]的研究呈现出被动吸烟不是高危型HPV持续感染的危险因素。甲状腺疾病、高血压、阴道分泌物异常、宫颈炎症或阴道治疗及尿道感染方面比较有差异，说明这5种影响因素可能是高危型HPV持续感染影响因素。通过多因素Logistics回归模型分析结果显示，宫颈炎和甲状腺疾病是高危型HPV持续感染的危险因素。HPV感染是导致宫颈炎最常见的因素，一般情况下宫颈炎都是与HPV感染有关，宫颈癌的发病过程相对缓慢且连续，在宫颈炎症的患者中持续的HPV感染更容易导致患者发生宫颈癌的患病概率，早期治疗宫颈炎症对预防宫颈癌具有重要作用。甲状腺是调节机体代谢的重要内分泌器官，其分泌异常会引起机体多种系统疾病。由于甲状腺疾病是高危型HPV持续感染的危险因素文献过少，需要更多的研究结果支持本研究结果。

综上所述，宫颈炎和甲状腺疾病因素是影响感染者高危HPV持续感染的危险因素，此结果可为感染者持续感染高危型HPV的预防提供依据。