陈亚运
五种不同产地番荔枝果实的抗氧化活性比较
陈亚运
(泰州职业技术学院江苏泰州225316)
本实验对5种不同产地的番荔枝果实的抗氧化作用进行研究。采用ABTS+法和DPPH法分别测定番荔枝果实的抗氧化能力,结果显示:5种不同产地的番荔枝果实均表现出一定的抗氧化作用,其中,广东产番荔枝果实抗氧化能力最佳。
番荔枝;抗氧化;ABTS+;DPPH
抗氧化能力是评价水果的重要指标,热带著名水果番荔枝又名释迦、佛头果,原产于美洲,现在全球热带地区均有种植。其果实味道甘美,甜而不腻,营养丰富(含蛋白质2.34 %,脂肪0.3 %,糖类20.42 %)[1],深受消费者喜爱。然而,有关番荔枝果实抗氧化作用研究却鲜有报道,更没有对不同产地的果实抗氧化能力进行比较的研究。本实验选取种植在中国大陆南方5省的番荔枝果实,采用ABTS+法和DPPH法对其体外抗氧化能力进行测定。
新鲜的番荔枝果实分别购自于云南省临沧市;海南省三亚市;广西省防城港市;福建省漳州市;广东省汕头市。其形均为圆形或椭圆形,黄绿色,直径5~10 cm,外表无毛,粗糙,被白色粉霜,经泰州市药检所白钢钢研究员鉴定均为番荔枝科植物番荔枝(Linn)的成熟果实。
电子天平(AY-220 ,SHIMADZU)。
数控超声波清洗机(KQ-500 DE,昆山市超声仪器有限公司)。
冷冻干燥机(FD-1-50 ,北京博医康生物科技有限公司)。
高速离心机(H1650 -W,湖南湘仪离心机仪器有限公司)。
ABTS+法总抗氧化能力检测试剂盒购自碧云天生物科技公司。
DPPH法试剂盒购自凯基生物科技有限公司。
新鲜的番荔枝果实经低温干燥后,保存于干燥器中。取五种产地的干燥的番荔枝果实,剪碎后经研磨成细粉,过筛,精密称定五种不同产地的果实样品粉末各1 g,分别加入到含有20 mL水的锥形瓶中,于超声机上室温超声60 min。静置称重,加水补齐损失的溶剂。离心后,取上清液经0.22 μm的微孔滤膜过滤,储存于离心管中,备用。
人体的正常生理反应(如呼吸)、外界放射线照射等因素都能在人体体内产生自由基[2]。过量自由基与癌症、衰老或其它疾病都有关联。水果中的抗氧化剂可清除自由基的危害并延缓身体衰老。因此,研究番荔枝果实的抗氧化能力可为评价番荔枝果实品质以及比较不同产地间差异提供重要参考。
2.2.1 ABTS法测定抗氧化能力
精密称取3 mgABTS+粉末溶于0.735 mL去离子水中得7.4 mmol/LABTS+储备液,称取1 mg过硫酸钾粉末溶于1.43 mL去离子水中得2.6 mmol/L过硫酸钾储备液,分别吸取ABTS+储备液和过硫酸钾储备液0.2 mL混合均匀,于室温下避光静置12 h,使用时用无水乙醇稀释40 倍得ABTS+工作液,注意现配现用。
参照文献[3],将待测溶液稀释成不同浓度的稀释液,每个浓度均移取20 μL样品加入到96 孔板中,加入130 μLABTS+工作液,并采用酶标仪于734 nm处测定工作液的吸光度。为排除样品和溶剂自身颜色的影响,需同时设置空白组
(乙醇+ ABTS+)和背景组(乙醇+样品)。其他产地的样品溶液同以上操作。ABTS+自由基清除率计算公式如下:
其中,A0表示ABTS+空白吸光度,Ai为给药后的吸光度,所有测定操作重复3次,取平均值。
2.2.2 DPPH法测定抗氧化能力
参照文献[4],配制DPPH溶液:采用9无水乙醇溶解DPPH并定容成50 μg/mL的反应液。吸取50 μL无水乙醇,加100 μLDPPH溶液于96 孔板中,混匀后于25 ℃下避光反应30 min,于517 nm波长处测定吸光度。清除率的计算公式同2.2.1。
如表1所示,不同产地的番荔枝果实均具有较好的清除ABTS+自由基的能力,相比之下,广东产番荔枝果实清除该自由基能力较强,而福建产的番荔枝果实清除能力相对较弱。
表1 不同产地番荔枝果实不同浓度下对ABTS+自由基的清除率
与3.1项下清除ABTS+自由基相似,表2中不同产地的番荔枝果实也均表现出较好的清除DPPH自由基的能力。更类似的是,广东产番荔枝果实清除DPPH自由基能力也是最强,而福建产的番荔枝果实清除DPPH自由基能力也相对最弱。
表2 不同产地番荔枝果实不同浓度下对DPPH自由基的清除率
0.78 μg/mL1.56 μg/mL3.12 μg/mL6.25 μg/mL12.5 μg/mL 海南5.39 %11.39 %20.25 %20.65 %33.69 % 云南9.09 %17.3%23.4%42.17 %50.69 % 福建4.42 %7.25 %13.47 %22.19 %29.46 % 广西2.83 %6.55 %14.54 %26.07 %30.32 % 广东66.11 %78.04 %79.1%79.29 %77.37 %
本研究采用三种不同的方法测定了五种不同产地番荔枝果实的抗氧化能力。结果显示,五种番荔枝果实均具有一定的抗氧化能力,其中广东产番荔枝果实抗氧化能力最强。
[1]中国科学院中国植物志委员会.中国植物志[M].北京:科学出版社,1982.
[2]王存堂,高增明,姜辰昊等.黄色洋葱皮不同溶剂多酚提取物的抗氧化成分及抗氧化活性[J].食品工业科技,2019.
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10.3969/j.issn.2095-1205.2019.05.18
TS255.1
C
2095-1205(2019)05-32-02