体外诊断试剂产品校准品量值传递方法

谢静 张莹

摘 要 体外诊断试剂检测系统的准确性需要通过校准品不间断的比较链进行量值传递。校准品量值传递的有效性、可靠性是厂商保证其检测结果准确、可追溯、可重复的重要工具，只有严格按照溯源链进行量值传递，才能保证检测系统能提供可靠的、有参考意义的检测结果。

关键词 校准品 量值传递 溯源 不确定度

中图分类号：R981.9 文献标志码：C 文章编号：1006-1533（2019）13-0043-02

Method for the transfer of calibration quality of in vitro diagnostic reagent products

XIE Jing， ZHANG Ying*

（Shanghai Food and Drug Administration Certification and Review Center， Shanghai 200020， China）

ABSTRACT The accuracy of in vitro diagnostic reagent detection system needs to be transmitted through the continuous comparison chain of calibration products. The validity and reliability of calibration product value transfer is an important tool for manufacturers to ensure that their detection results are accurate， traceable and repeatable. Only when the quantity value is strictly transmitted according to the traceability chain， can the detection system provide reliable and reference test results.

KEy WORDS calibration product； value transfer； traceability； uncertainty

隨着医疗健康产业的发展，体外诊断产业的规范化和标准化，临床检验的精密度与稳定性越来越被重视，体外诊断试剂产品量值传递是实现临床检测结果准确可追溯的重要工具，只有保证产品校准品量值传递的有效性，才能在量值上保证临床检验结果的准确性。

1 校准品量值传递对体外诊断试剂检测准确性的意义

ISO17511：2003中对计量学溯源的解释为：通过一条具有规定不确定度的、不间断的比较链，使测量结果或测量标准的值能够与规定的参考标准，通常是与国家标准或国际标准联系起来的特性。实验室的定量检测，量必须有准确定义，这样可以使得医疗的措施可以被正确使用，并且在不同时间和空间都可用以被比较，报告给医生或者其他卫生人员及患者的结果必须准确，包括正确和精密，精密即为重复性好，正确是结果有可比性。

对于溯源性的要求，欧盟关于体外诊断用品导则（Directive 98/79/EC）要求：“校准物和（或）质控物的定值，必须通过现有较高级别的参考测量程序和（或）参考物质保证其溯源性”。《医疗器械生产质量管理规范体外诊断试剂现场检查指导原则》中8.7.1应当建立校准品、参考品量值溯源程序。对每批生产的校准品、参考品进行赋值。因此，校准品的量值传递对体外诊断试剂的检测准确性的影响是毋庸置疑的，校准品量值的实质影响是临床检验的结果，只有重视对体外诊断试剂的量值传递的研究，不断提高检验技术，才能最终使得诊断结果准确一致，各个检测系统、各家医院、不同时期的检测结果具有可比性，最终促进临床检验事业的发展，使患者受益。

2 校准品量值溯源的类型

2.1 测量结果在计量上可溯源至SI的被测量

有可用的一级参考测量程序和一个或多个（经认证的）一级参考物质（作为校准品）。达到这样水平的有约25～30个类型的量，具有良好确定的组分，例如：一些电解质、代谢物、甾体激素及一些甲状腺激素等。

2.2 测量结果不能在计量上追溯至SI的被测量

1）有可用的国际约定的参考测量程序（不能被称为一级参考测量程序）和一种或多种用此参考检测测量定值的国际约定校准物质，如糖化血红蛋白。

2）有可用的国际约定的参考测量程序，但没有国际约定的校准物质。符合这些条件的约有30种类型组分的量，如：如某些凝血因子、血细胞（ICSH参考方法）、高密度脂蛋白胆固醇等。

3）有可用的一个或多个国际约定的校准物质（用作校准品）及赋值方案，但没有国际约定的参考程序。符合这些条件的约有300多种量，如：使用世界卫生组织（WHO）国际标准的量（蛋白激素、某些抗体和肿瘤标志物等）。

4）既无参考测量程序，也无校准的参考物质可用。制造商自行建立“自用”源测量程序和源校准品，为产品校准品定值。符合这些条件的约有300种组分的量，如某些肿瘤标志物和抗体。

据此，量值的传递可根据有无国际参考物质/国家标准品和参考测量程序的情况分为以上5种不同的类型。

3 参考物质和参考测量程序

1）国际参考物质与参考测量程序由国际检验医学溯源联合委员会（JCTLM）主要负责评定。JCTLM于2002年由国际计量局（BIPM）、国际临床化学与检验医学联合会（IFCC）和国际实验室认可合作组织（ILAC）共同成立。JCTLM有2个工作组，工作组1主要负责评价候选的参考物质和参考测量程序；工作组2主要负责评价候选的参考测量实验室。JCTLM工作组评价依据的标准包括：ISO17511、ISO15193、ISO15194、ISO18153、ISO/IEC17025和SO15195：2003。通过评价的参考物质、参考测量程序和参考测量实验室将会公布在JCTLM秘书处的网站上。

2）国家参考物质由中国食品药品检定研究院标准物质与标准化研究所研究、制备、标定、审核和分发，并定期发布体外诊断试剂国家标准品和参考品目录。截至2019年1月，有效的体外诊断试剂标准物质共有97种。

3）若无国际参考物质、也无国家参考物质，也没有约定的参考方法，最好采用纯物质制备替代的参考物质，并建立内部测量程序，制造商应考察程序的科学性、严谨性，一般采用回收的方法对自定义的源参考物质的量值进行确认和修正。在实际工作中，大部分企业采用新鲜患者标本作为源参考物质，选定行业内公认较好的参考测量系统，给新鲜患者标本定值，再以定值后的患者标本给固定检测系统校准，系列定值的新鲜患者样本从量值上认为可以溯源至公认的参考测量系统，从而实现校准的可溯源性。需注意的是，业内公认较好的测量系统需要进行进一步确认，常规方法之间的比对，不属于确认的范畴，在此，我们需要对常规测量系统与参考测量系统使用一定数量的样本进行回归验证以确认其量值溯源的可靠性，这种确认我们通常认为应该是全量程的确认而不是某一个点的确认。

4 校准品量值传递的方法——直接赋值法与比对法

1）直接赋值法。是用直接定值的方法，用高一级参考物质或参考测量系统，直接给厂商的校准品进行定值，以此传递量值。

2）比对法。用选定参考检测系统的检测结果对厂商校准品的定值进行回归调整。最终再与参考值进行比对，当斜率接近于1，截距接近于0，即表示厂商检测系统可以溯源至参考测量系统，此种溯源方法即通过校准品进行量值传递。

5 校准品的不确定度

根据JJF1001-2011的定义，测量不确定度简称不确定度，表征合理地赋予被测量之值的分散性，与测量结果相联系的参数。

GB/T 21415（ISO 17511）《体外诊断试剂校准品和质控品的计量学溯源》规定，“制造厂商的计量学溯源责任从产品校准品的定值，到二级参考物质或二级参考测量程序”。体外诊断试剂生产厂商通过的校准品的逐级量值传递，直至医院患者样本，保证包括检验试剂、检验仪器、校准品、样本这一固定的检测系统可以稳定地、持续地输出检测结果，保证检测系统的量值溯源性，临床结果的计量学溯源性。每一级、每一浓度的校准品在依靠自身的浓度进行量值传递，逐级传递至患者检测的结果，每一级的校准品均因其自身稳定性、均一性、赋值过程引入不确定度校准品的不确定度，而这个不确定度也会传递到患者的检测结果，校准品的不确定度是衡量校准品赋值可靠性的定量指标，因此，制定科学有效的方法计算校准品不确定度是关系到患者检测结果准确性的关键因素之一。

评定校准品不确定度的流程可分为4个步骤：①确定被测量目标的不确定度，如校准品的测量不确定度范围，根据检测项目定为各自浓度的1%～5%。②识别不确定度来源确定评估方案，在溯源体系建立的过程中，体外诊断试剂校准品不确定度的来源主要包含3个方面：第一，校准品的定值过程，包含仪器与试剂的精密度、上一级校准品的不确定度、校准品的复溶或修正等。第二，校准品均匀性，包含瓶间均匀性与瓶内均匀性。第三，校准品稳定性。③量化不确定度分量。根据指定的不确定度评定方案，分别计算不确定度分量。④计算合成不确定度和扩展不确定度。在定值过程中尽可能减少或消除引起不确定度的影响因素，也可通过减少校准次数来降低不确定度，将不确定度控制在目标不确定度范围内。

需要注意的是，在量值传递过程中，为保证能达到被测量的目标不确定度，需要规定每一个等级校准品的目标不确定度，被测量的目标不确定度需要满足终端客户的临床需求。

6 讨论

体外诊断试剂检测系统的准确性需要通过校准品不间断的比较链进行量值传递。是厂商保证其检测结果准确、可追溯、可重复的重要工具，只有严格按照溯源链进行量值传递，才能保证检测系统的根本目标——临床检验机构能为患者提供可靠的有参考意义的检测结果。因此，诊断试剂的溯源性在我们日常的技术审评中也是重点关注的内容之一。

结合审评的经验和送审资料的情况，在技术审评中对于产品溯源性的关注点我们主要集中在以下几点：

1）不间断的校准链，各级校准品相应的校准文件，这些文件应包括物质、方法、测量系统、影响因素、不确定度评估及统计技术的描述。

2）校准文件中测量方法应包括方法学考察，统计方法应合理有效，不确定度评估应科学、合理、有效。

3）表述的規范性。测量项目的参照对象（测量标准、程序）没有明确的计量等级时，应声称溯源至制造商的工作校准品。

4）溯源性的保证。很多企业采用已获证产品开展量值传递过程，这里应该明确，产品级校准品不是有证参考物质，不是量值标准，用产品校准品进行量值传递时无法保证量值可靠性，因此需同时考虑校准物的准确性和可互换性，需要通过回归计算确认其可溯源性。

5）对于若无国际参考物质、也无国家参考物质，也没有约定的参考方法的时候，需要对常规测量系统与参考测量系统使用一定数量的样本进行回归验证以确认其量值溯源的可靠性，这种确认我们通常认为应该是全量程的确认而不是某一个点的确认。需要特别关注常规方法之间的比对，不属于溯源范畴，在建立溯源性后是可以通过比对等方式进行确认的。