甘肃地区6325例不育男性精液分析

马宝良 高 轲 陈 思 陈康宁 丁永强 王志平 董治龙

兰州大学第二医院泌尿外科研究所/甘肃省泌尿系疾病临床医学中心/甘肃省泌尿系疾病重点实验室（甘肃兰州 730030）

精液质量分析是评估男性生育能力的重要方法之一，也是男性不育症疾病诊断、疗效观察的主要实验依据。不育夫妇初诊时男方至少按WHO技术规范做2～3次精液分析，方可大体评估其生育能力。现将本院诊治的男性不育患者精液分析结果回顾性分析如下。

资料与方法

一、一般资料

2009年7月至2014年10月来我院泌尿外科和妇科生殖门诊的6325例男性不育患者，年龄18～69（平均29.93±5.55）岁，均为婚后同居1年以上、性生活正常且未采取过任何避孕措施而妻子未怀孕者 （排除女方不育）。精液质量评价标准，参照《人类精液及精子-宫颈粘液相互作用实验室检验手册》第5版标准。正常精液参数：精液量≥1.5mL，pH≥7.2，精子浓度≥15×106/mL，精子总数≥39×106/mL，精子总活力[前向运动(PR))+非前向运动（PR）]精子≥40%，PR≥32%，存活率≥58%，正常形态精子≥4%。

二、方法

所有检测对象取精前均需无排精3～7天 （多要求禁欲5天，包括期间无手淫和遗精），采用手淫法获取全部精液于消毒的干燥玻璃烧杯内，36.5℃恒温箱保温。采集的标本均在我院泌尿外科研究所男科实验室进行分析，手工法检测精液量、液化时间、pH值。每10min检查1次液化程度，液化后立即进行精液分析。超过30min不完全液化者，采用机械吹打法促进液化，间隔10min吹打1次，在60min时吹打混匀后分析，并记录具体不液化时间。检测到无精子者，取出1mL精液3000×g离心15min，弃去大部分上清液，将少量精浆和沉淀物混匀后再次分析确认。

三、精液质量分析

采用北京同方神火科技有限公司清华同方精子、微生物动（静）态图像分析系统MX7，配合载物台温控仪以及MACRO红宝石精子计数板进行相关活力参数分析和精子形态分析。

四、实验室质量控制措施

精液常规分析易受采精方式、射精频度、温度、实验室条件、检验人员的技术熟练程度及主观判断能力等诸多因素的影响，导致分析结果发生偏差，所以精液的采集与分析必须严格按照标准化程序进行，才能反映和提供受检者临床状况的必要信息。近年来随着男科学和生殖医学的快速发展，对不少原有的概念和诊疗建议进行了修订，WHO组织成立了专门的委员会，通过收集临床数据，修订出版了新的《人类精液检查与处理实验室手册》（第5版），以期提高精液分析质量，同时对男科检验技术人员进行了精液分析质量控制培训，达到规范男科检验程序，提高检验质量，更好为临床诊疗服务。自觉遵从和执行实验室精液分析质量控制不仅对获取更加精确和准确的精液分析质量参数，也是实现规范和提高精液分析质量科研水平的目标。本男科检验技术员为参加WHO5版精液分析质控技术获得资质者，并在工作中严格遵从质控要求操作。

五、统计学分析

采用Microsoft Excel2007软件进行数据整理统计。数据以x±s表示，用SPSS22.0软件分析，均值比较采用t检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

结 果

一、6325例男性不流患者精液参数基本结果

在6325例男性不育患者中，年龄区间为18.00-69.00岁，平均年龄29.93岁；精液的pH值分布为3.20-9.00，平均值为7.44；精液体积16.50mL,平均值为2.96mL；精子密度503.12×106/mL,平均密度为75.01×106/mL；精子总数为 6486.59×106，平均值为 229.30×106；精子活力为100.00%，平均活力为63.06%；PR精子所占比例为100.00%，其平均值为46.14%；其他相关参数如曲线速度VCL、直线速度VSL、平均路径速度VAP、平均移动角度MAD、侧摆幅度ALH、鞭打频率BCF、直线浓度、直线活率、直线性LIN、摆动性WOB、前向性SRT、畸形率及正常率的范围和均值如表1所示。

二、精液参数正常与异常对比结果

从表2中，可以知道，在6325份精液样本中，精液各项参数正常的为3971例，约占62.78%；精液参数有异常的为2354例，约占37.22%；前者精液的pH值7.48±0.15、精液体积(3.22±1.02)mL、浓度(96.69±59.40)×106/mL、 精子总数 (305.99±200.63)×106、 活力 (77.01±10.27)%、PR精子 （57.56±12.10）%，后者精液的pH值7.36±0.49、精液体积(2.52±1.50)mL、浓度(38.46±58.98)×106/mL、精子总数(93.08±160.89)×106、活力(39.53±30.44)%、PR精子 （26.91±24.35）%。在参数异常精液中，pH异常 439份 （18.65%），精液体积异常 647份（27.49%），精子浓度异常1327份（56.37%），精子总数异常1379份（58.58%），精子活力异常1074份（45.62%），PR精子异常 1466份 （62.28%），精子畸形 751份（31.90%），各项参数均异常 121份（5.14%）。

表2 参数正常精液和参数异常精液比较(x±s)

讨 论

随着社会工业化的发展导致的环境污染一定程度上影响着男性生殖健康，男性不育症的发病率也在逐渐增加[1]。过去50年内，全世界男性精子数和精子量各下降了一半，在整个不育因素中，男性不育又占50%[2]。在我国，有文献分析表明男性精子质量也呈现下降趋势[3]，据统计，我国每8对育龄夫妇中就有1对面临不孕不育的困扰。据临床流行病学相关数据统计显示，在我国目前不孕不育的患者中，单纯女方因素约占40%，单纯男方因素约占40%，男女双方均有不孕不育病症的约占10%，不明原因不孕不育的约占10%。评价男性生育能力的最基本方法是精液分析[4]。通过精液分析，可推断男性生殖系统及相关内分泌器官的功能状态，为临床上男性不育的诊断和治疗提供重要的试验依据。人的精子从精原细胞开始到成熟需要64～74d[5]。初检者应做2次精液分析，2次精液采集的间隔应＞7d，但不能超过3周；因此，间隔1月做精液分析复查有可能出现结果变化。如果两次的结果有明显差异，应再取标本进行第三次分析。WHO在男性不育患者精液检测诊断指南中明确规定，首次精液检查合格者，可以认为他们的精液质量是正常的，而首次检查不合格者，必须重复检查精液，且应根据几次检查结果综合分析后做出判断[6]。我们在精液分析时，精液一般性状、浓度按WHO标准采用MACRO计数池进行分析，精子活力和精子相关运动轨迹参数的分析选用计算机辅助精液分析（CASA）系统，具有检测快、分析项目多、操作简便等优点而用于精液分析[7]，经过几年的实际使用，已得到广大患者的普遍认可，并已逐步普及。

按照WHO规定，正常人精液分析各参数的参考值为：精液在排精后1h内完全液化，精液量≥1.5ml，精子浓度≥15×106/mL，精子总数≥39×106/mL，精子总活力（PR+NP)≥40%，前向运动 PR≥32%,存活率≥58%，正常形态≥4%[8]。LIN、SRT和ALH反映精子运动的直线性，LIN、SRT的下降和ALH的上升代表了精子运动的直线性降低。本文结果显示，正常精液组SRT、LIN和ALH高于异常精液组，提示异常精液组精子运动的直线性有所降低。VCL、VSL、VAP反映精子的运动速度，精子运动能力低下的主要原因在于精子运动速度的降低，精子活力对受精十分重要，只有活动精子才能通过女性生殖道到达受精部位，且更需要精子特征性的微细运动以穿透卵丘和透明带[9]。经典的常规精液检查无法测定精子微细运动特点，而CASA能准确地测定这些参数，本文结果显示，与正常精液组比较，异常精液组VCL、VSL、VAP则呈显著性降低，再一次论证了VCL、VSL、VAP作为反映精子运动速度的参数是评估不育的重要指标，Sikka等[10]报道对由于精子运动能力低下而引起的男性不育症，可采用药物治疗，或通过精子体外处理技术刺激和改善精子运动速度，或选择性地采用ICSI治疗，从而达到帮助受孕的目的。因此，施行质量控制的CASA精液分析结果可以更准确更客观地了解精液质量的真实情况，并可作为评估男性生育能力的有效依据，及时复查精液分析有利于临床诊治。

5年间我院总共检测了6325余例，实验室检查结果提示，精液参数有异常的为2354例，约占37.22%，本地区不育症男性精液异常率低于全国多中心调查结果相近 （57.7%，2003年）[11]和张红斌等报道的川南地区（77.6%，2014年）[12]；这一方面与甘肃的地理位置及人群观念有关，导致男性不育患者就诊率较低，另一方面与相关医务人员记录数据有关，导致数据记录不详或不实。精液质量异常多为多项参数指标的综合异常，其中以精子活力异常为主，我们分析的结果活力异常率约45.62%（1074/2354），低于刘春玲等[13]报道的湖州地区（75.4%，2011年）和张运丽等[14]报道的长沙地区（65.71%，2012年）相近，而高于麦丽萍等[15]报道的佛山市（52.8%，2014年）和徐廷云等[16]报道的苏州地区（47.35%，2011年）相近,可能不同地域人群有差异。其次分别是精子形态异常、精子浓度异常、pH值异常、精液量异常。而引起不孕不育的直接原因表现为：精子总数、精子浓度、精 子 活 力 、PR 精 子 百 分 率 ，VCL、VSL、VAP、ALH、BCF、MAD等方面的综合异常，这些指标表现异常时要引起临床医生高度重视。

近年来，不育人群相对增多，一方面引起男性不育的原因有[17]：遗传因素中的染色体及相关基因异常，职业因素如司机、厨师和电焊等，环境中的重金属及塑料用品，自身不良习惯如吸烟、饮酒、熬夜、肥胖等，这些因素可通过损伤男性生殖器官、影响内分泌功能、改变精液参数等方面影响男性不育；另一方面引起女性不孕的原因有[18]：排卵功能障碍、输卵管阻塞、子宫内膜异位、输卵管异常，子宫或宫颈发育不良，其他不明原因等。因此，在进行不育检查时，不仅要考虑男方因素，也要考虑女方因素，个性化的对不育患者采取性行为指导、药物治疗或进一步深入检查后的其他治疗，提高不育不孕的治愈率。

综上所述，通过对甘肃地区6325例不育男性精液进行回顾性分析，可以了解该地区男性不育患者精液相关参数的大致情况，对临床的诊断和治疗提供参考依据，但应该注意不可完全依靠精液分析确定男子无生育或有生育。因此，对生育力低下夫妇中男性配偶作调查时，精液进行多项参数分析，可为男性不育的诊断和治疗提供有力的参考，也应该综合考虑各项因素，为不育患者提供有效的治疗方法。