添加不同水平复合中草药对蛋鸡生产性能和免疫指标的影响

张凯，贾丽军，杨春雷，崔小珍，张伯池，杜丽英*

(1.山西省农业科学院 饲料兽药研究所，山西 太原 030032； 2.山西省宁武县畜牧兽医中心，山西 忻州 036700)

中国是世界上最大的鸡蛋生产和消费国，鸡蛋产量约占全世界总产量的45%。母鸡大约在21～22周龄后进入产蛋期，而后稳定在90%左右。进入产蛋高峰期的蛋鸡，机能逐渐开始衰退，会出现抗氧化能力降低、代谢系统紊乱及自由基过剩等问题。因此，在蛋鸡养殖过程中，保健成为了产蛋期的关键。黄芪、杜仲、山楂及其提取物是常见的保健产品。有不少研究表明黄芪、杜仲和山楂等中草药具有调节脂质代谢[1,2]、免疫功能[3～6]、调节肠道菌群[8,9]、提高机体抗氧化酶活性[10～13]等生理功能。但目前研究主要以单一中草药为主，对复合中草药的研究相对较少，因此，本试验选用复合中草药作为添加剂，探讨其对蛋鸡生产性能和免疫功能的影响，并筛选出合适的添加量，为中草药在蛋鸡生产中的应用提供一定理论依据。

1 材料与方法

1.1 试验动物与材料

120日龄健康的、体重相近((1.40±0.10) kg)的海兰褐蛋鸡，购自平遥龙海种鸡场；复合中草药由本课题组研制，主要由黄芪、杜仲、山楂3种植物提取物配伍而成，比例为1∶1∶2。

1.2 试验设计

选取健康且体重相近的海兰褐蛋鸡300只，分为5个组，每组6个重复，每个重复10只鸡(分3笼饲养)；基础日粮见表1，分别在基础日粮的基础上添加0.4%、0.3%、0.2%和0.1%复合中草药，试验期为40 d，饲粮配制参照《NY/T33-2004蛋鸡饲养标准》和NRC《家禽营养需要》(1994)。

1.3 动物饲养管理

试验期每天人工饲喂2次，试验鸡只自由采食和饮水，观察鸡只有无异常行为，按常规程序对试验鸡只免疫和圈舍消毒。

2 测定指标与方法

2.1 产蛋性能

根据试验记录的产蛋数、蛋重、采食量，计算产蛋率，平均采食量和平均蛋重以及料蛋比。

2.2 血常规测定

在试验结束时以重复为单位随机抽取2只体重相近的鸡只(禁食12 h)进行翅静脉采血，利用全自动血液分析仪(迈瑞BC-3000plus)检测白细胞数目(WBC)、中性粒细胞绝对值(NEUT)、淋巴细胞绝对值(LY)、中性粒细胞百分比(NEUT%)、淋巴细胞百分比(LY%)、红细胞数(RBC)、血红蛋白浓度(HGB)、红细胞压积(HCT)、平均红细胞体积(MCV)、平均血红蛋白含量(MCH)、平均血红蛋白浓度(MCHC)、血小板数(PLT)、血小板体积分布宽度(PDW)、平均血小板体积(MPV)、大血小板比率(P-LCP)、血小板压积(MPV)等血液生理指标；同时用10 mL离心管收集血液，静置30 min，3 000 r·min-1离心15 min，取上清液保存，用比色法测定血清免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白M(IgM)、免疫球蛋白G(IgG)、血清补体C3、血清补体C4、一氧化合酶(NOS)和一氧化氮(NO)等血液生化指标，检测单位为北京华英生物技术研究所。

表1基础日粮组成和营养成分

Table1Compositionandnutrientlevelsofexperimentaldiets(air-drybasis)

原料Ingredients含量/%Content营养水平(2) Nutrition levle含量/%Content玉米57.00代谢能11.30豆粕16.00粗蛋白15.35棉粕4.00钙3.60喷浆玉米皮6.16有效磷0.30玉米酒槽及可溶物6.00赖氨酸0.81大豆油0.50蛋氨酸0.28石粉8.00磷酸氢钙1.00蛋氨酸0.14赖氨酸0.30食盐0.30氯化胆碱0.10预混料(1)0.50

注：(1)预混料为每千克饲粮提供The premix provided the following per kg of the diet: VA 8 000 IU，VD33 000 IU，VE 15 IU，VK32.0 mg，VB12.0 mg，VB24.0 mg，VB64.0 mg，泛酸钙calcium pantothenate 12 mg，烟酸nicotinic acid 40 mg，生物素biotin 0.1 mg，叶酸folic acid 1.0 mg，VB120.01 mg，Fe (as ferrous sulfate) 30 mg，Cu (as copper sulfate) 6.25 mg，Zn (as zinc sulfate) 70 mg，Mn (as manganese sulfate) 63.6 mg，I (as potassium iodide) 0. 4 mg，Se (as sodium selenite) 0.2 mg.(2)代谢能为计算值，其余为实测值。ME was a calculated value，the others were measured values.

2.3 数据处理

所有数据用Excel 2010 进行初步处理，数据用平均数±标准差表示。用SPSS 21.0 进行单因素方差分析，并采用Duncan氏进行多重比较(P<0.05 表示差异显著，P<0.01表示差异极显著)。

3 结果与分析

3.1 添加不同水平复合中草药对蛋鸡生产性能的影响

添加不同水平复合中草药对蛋鸡生产性能的影响见表2。添加复合中草药制剂能够显著提高蛋鸡平均蛋重和产蛋率(P<0.05)，与对照组相比，添加0.1%、0.3%和0.4%复合中草药平均蛋重分别提高6.4%、4.4%和6.0%(P<0.05)；添加0.3%复合中草药能够显著提高产蛋率约22.2%(P<0.05)。而添加不同水平复合中草药对蛋鸡平均采食量和料蛋比无显著影响(P>0.05)。

3.2 添加不同水平复合中草药对蛋鸡血清免疫性能的影响

添加复合中草药对蛋鸡血液IgA、IgM、IgG、C3和C4无显著影响(P>0.05)；但添加4%、3%、2%和1%水平的中草药能够分别降低血清NOS 17.8%、18.3%、13.4%和18.3%(P<0.05)，添加4%和3%的中草药能够降低血清中NO 27.3%和32.2%(P<0.05)；添加1%和2%中草药制剂对血清NO具有降低的趋势(P>0.05)(表3)。

表2添加不同水平复合中草药对蛋鸡生产性能的影响
Table2EffectofaddingdifferentlevelsofcompoundChineseherbalmedicineonproductionperformanceoflayinghens

处理Treatments平均蛋重/gAverage daily egg weight平均采食量/g·d-1Average daily feed intake 料蛋比 Feed:Egg产蛋率/%Laying rate对照组45.50±1.40a86.22±5.261.90±0.1546.67±3.47a0.4%添加组48.21±0.66b86.89±7.951.80±0.1647.20±4.86a0.3%添加组47.51±0.59b91.33±3.601.92±0.0857.04±3.47b0.2%添加组46.81±0.94ab84.98±8.441.81±0.1547.22±3.94a0.1%添加组48.43±0.47b86.89±6.461.79±0.1437.78±8.25a

注：同列不同字母之间表示差异显著(P<0.05)，下同。

Note: Values with different letters in the same column means significant (P<0.05), the same below.

表3不同水平复合中草药对蛋鸡血清免疫性能的影响

Table3EffectofdifferentlevelsofcompoundChineseherbalmedicineonserumimmunologicalperformanceoflayinghens

处理Treatments免疫球蛋白A/g·L-1Immunoglobulin A 免疫球蛋白MM/g·L-1Immunoglobulin 免疫球蛋白GG/ g·L-1Immunoglobulin 血清补体C3/g·L-1Serum complement C3血清补体C4/g·L-1Serum complement 一氧化合酶/U·mL-1Nitric oxide synthetase 一氧化氮/umol·L-1Nitric oxide对照组2.31±0.131.68±0.104.25±0.200.14±0.030.04±0.0350.60±2.96b28.08±2.59b0.4%添加组2.40±0.281.53±0.044.27±0.450.08±0.010.03±0.0141.58±2.93a20.57±3.64a0.3%添加组2.44±0.381.57±0.094.26±0.340.08±0.020.02±0.0041.34±2.32a19.03±2.94a0.2%添加组2.41±0.261.63±0.124.28±0.410.12±0.090.03±0.0143.83±2.85a25.42±2.59ab0.1%添加组2.35±0.261.59±0.134.25±0.440.12±0.130.03±0.0141.38±2.39a27.76±2.60b

3.3 添加不同水平复合中草药对蛋鸡血液免疫细胞的影响

与基础对照组相比，添加0.3%复合中草药能够显著提高白细胞数约69.0%(P<0.05)；添加0.3%、0.2%、0.1%复合中草药中性粒细胞数分别提高48.1%、116.0%和135.8%(P<0.05)；中性粒细胞百分比分别提高55.1%、86.9%和96.5%(P<0.0.5)；添加0.2%复合中草药能够降低淋巴细胞绝对值，大约为66.9%(P<0.05)。添加复合中草药对淋巴细胞百分比无显著影响(P<0.05)(表4)。

表4添加不同水平复合中草药对蛋鸡血液免疫细胞的影响
Table4EffectofaddingdifferentlevelsofcompoundChineseherbalmedicineonbloodimmunecellsoflayinghens

处理Treatments白细胞数/109个·L-1white blood cell中性粒细胞绝对值/109个·L-1Neutrophil granulocyte淋巴细胞绝对值/109个·L-1Lymphocyte中性粒细胞百分比/%Neutrophil granulocyte 淋巴细胞百分比/%Lymphocyte对照组4.55±1.22a1.06±0.31a1.30±0.76b24.36±7.06a17.10±5.630.4%添加组6.37±1.25ab1.84±0.91ab0.89±0.46ab31.52±10.65ab13.43±8.990.3%添加组7.69±1.23b2.63±1.11b1.06±0.79ab37.78±9.82bc16.78±9.840.2%添加组5.35±1.61a2.29±1.12b0.43±0.22a42.52±10.34bc9.28±7.980.1%添加组6.05±1.43ab2.50±0.71b0.67±0.42ab47.86±8.03c11.02±6.47

3.4 添加不同水平中草药对蛋鸡血液红细胞和血红蛋白的影响

添加不同水平中草药对蛋鸡血液红细胞和血红蛋白的影响见表5。与基础对照组相比，红细胞数、血红蛋白浓度、红细胞压积、平均红细胞体积、平均血红蛋白含量和平均血红细胞浓度均没有显著影响(P>0.05)。但与添加0.1%复合中草药相比，添加0.4%复合中草药平均血红蛋白含量降低20.7%(P<0.05)。

表5添加不同水平复合中草药对蛋鸡血液红细胞和血红蛋白的影响

Table5EffectofaddingdifferentlevelsofcompoundChineseherbalmedicineonbloodredbloodcellsandhemoglobininlayinghens

处理Treatments红细胞数/1012个·L-1Erythrocyte Count 血红蛋白浓度/g·L-1Hemoglobin content 红细胞压积/%packcd cell volume平均红细胞体积/fL Average red blood cell volume 平均血红蛋白含量/pg Mean hemoglobin content 平均血红蛋白浓度/g·L-1Mean hemoglobin concentration对照组1.60±0.4071.83±6.2420.37±5.93126.40±8.9046.92±9.94ab375.00±92.160.4%添加组1.61±0.2166.17±5.7120.67±2.82129.35±6.7341.50±5.63a324.83±51.970.3%添加组1.50±0.3367.50±6.2820.03±4.36135.44±9.3048.46±7.26ab346.17±63.260.2%添加组1.35±0.2671.67±6.6816.87±3.04125.90±6.9949.80±5.46ab401.80±58.630.1%添加组1.28±0.1465.83±5.3417.08±2.17134.78±9.5252.30±9.12b391.00±64.96

3.5 添加不同水平复合中草药对蛋鸡血液血小板的影响

添加不同水平复合中草药对蛋鸡血液血小板的影响见表6。添加复合中草药对血小板数、血小板体积分布宽度、平均血小板体积、大血小板比率和血小板压积没有显著影响(P>0.05)。

表6 添加不同水平复合中草药对蛋鸡血小板的影响Table 6 Effect of adding different levels of compound Chinese herbal medicine on platelet of laying hens

4 讨论与结论

由黄芪、杜仲和山楂组成的复合中草药含有大量的活性物质，如黄酮、黄芪多糖、木脂素、苯丙素、有机酸等，可以调节生产性能、繁殖机能及免疫功能[14～20]。本研究结果表明，添加复合中草药能够提高平均蛋重和产蛋率。这与马春阳[19]、程皇座等[20]的研究结果一致，说明复方种草药制剂能够改善蛋鸡的生产性能。本研究中尚未发现复合中草药对鸡蛋中哈氏单位有显著影响，但添加0.1%、0.3%和0.4%复合中草药具有提高哈氏单位的趋势，关于本试验条件下使用的复合中草药对蛋鸡生产性能的提高，可能与复合中草药的组成改善了蛋鸡健康状况，或者含有的功能性成分具有促进生长等方面有关。

血液是机体重要的内环境，直接参与营养物质转运与代谢等过程，血液的生理指标可以反映生理状况和健康状况。

动物机体的特异性免疫主要是由体液免疫和细胞免疫组成。不少研究已证实了中草药制剂具有提高免疫力的作用[21,22]。补体系统激活过程中，可产生多种生物活性物质，引起一系列生物学效应，参与机体的抗感染免疫，扩大体液免疫效应，调节免疫应答。靳二辉等[23]研究表明由黄芪、枸杞、金银花组成的复合中草药制剂对肉鸡免疫器官发育和免疫功能可产生不同程度的促进作用，其中以添加1.0%的复方中草药制剂效果最好。赵文文等[24]研究表明日粮中添加黄芪多糖能够提高蛋雏鸭的免疫性能、抗氧化能力和改善肠道绒毛形态，且与丁酸梭菌配合使用效果更好。金顺义等[25]研究表明饲料中添加发酵中草药能提高泌乳母猪的生产性能和免疫力以及断奶仔猪的成活率。 本试验结果表明添加复合中草药制剂能够降低NOS和NO的能力，同时具有提高血液免疫指标IgG、IgM和IgA的趋势，这与前人的结果类似，但具体的机制有待进一步研究。白细胞是机体血液中十分重要的一类血细胞，主要发挥低于病原体的作用；淋巴细胞反映机体的免疫功能水平，在机体免疫应答过程中发挥主要重要。本研究结果表明添加复合中草药能够提高中性粒细胞绝对值和百分比、白细胞数。

关于中草药对蛋鸡血常规研究相对较少。刘瑞生等[26]研究表明添加中草药添加剂嫩巩固提高肉羊血液中红细胞、白细胞、血红蛋白、淋巴细胞百分率、淋巴细胞绝对值和血小板计数。李春燕等[27]研究表明对适宜比例中草药添加剂对白细胞类大部分指标有促升高作用，红细胞类大部分指标也有促进升高作用，血小板则有促进降低作用；同时中草药添加剂能增强机体的免疫功能。虽然动物品种不同，但是本试验结果得到了类似的结果。本研究中添加复方中草药，其含有多种功能性因子，能够改善蛋鸡的免疫功能，考虑到本试验条件下实用的复合中草药功能性因子较多，其具体的改善免疫的机制有待进一步研究。

综上所述，在本试验条件下，通过添加由黄芪、杜仲和山楂组成的复合中草药饲喂蛋鸡后能够改善其生产性能和免疫性能，其中以添加0.4%的复合中草药效果最佳。