罗 青,杨玉珍,王国霞,刘瑞霞
(郑州师范学院 生命科学学院,河南 郑州 450044)
平菇(Pleurotus ostreatus)又名侧耳、糙皮侧耳、 蚝菇、黑牡丹菇,台湾又称秀珍菇,隶属于真菌门担子菌纲伞菌目侧耳科侧耳属,栽培成功率高,出菇快、产量高,是目前栽培较广泛的食用菌。平菇中的蛋白多糖对癌细胞有很强的抑制作用,并且含有多种维生素和矿物质,可以调节人体新陈代谢,增强抵抗力,还有降血压、减肥等功效,具有一定的药用价值,因此倍受人们欢迎,市场潜力巨大。
平菇的栽培始于20世纪初,意大利人首先进行了木屑栽培研究,40年代后期种植日广。中国在1930年前后,于长白山林区开始用枫树等阔叶树倒木栽培平菇中侧耳属的紫孢侧耳,1936年前后日本森木和中国的黄范希着手瓶栽,此后欧洲人卢撒德(1969)用山毛榉或其他阔叶树木屑栽培,乔斯(1969)种植于压碎的玉米芯上。近些年来,有很多对于平菇栽培原料的筛选,刘招龙利用稻草栽培平菇进行试验,发现最佳栽培条件为稻草79%、棉籽壳20%、玉米粉或大米1%;钟鄂荣等利用玉米芯栽培平菇进行试验,得到最佳基质配方为麸皮15%、黄豆饼粉3%、玉米粉9%;王庆武等利用大豆秸秆栽培平菇试验得到最佳基质配方:大豆秸秆86%、豆饼10%、石灰3%、钾肥1%;李艳芳等利用马铃薯秸秆栽培平菇进行试验得到最佳基质配方:马铃薯秸秆80%、稻草17%、石膏1%、石灰2%。大量研究不断推动平菇人工培育生产的发展。
目前,还未见有关利用油用牡丹籽果壳栽培平菇的相关报道。随着河南省大力发展油用牡丹种植产业,以及牡丹籽油的良好发展,牡丹籽果壳大量剩余。鉴于此,以油用牡丹籽果壳为栽培平菇的主要原料,对其最佳栽培配方进行探索,希望能为平菇栽培提供参考。
1.1.1 试验原料 牡丹籽果壳2种(分别为2018年收的旧果壳和2019年收的新果壳)、棉籽壳、其他辅助原料。
1.1.2 供试菌种 平菇菌种购买于河南省农业科学院。
1.1.3 实验仪器 电子天平、玻璃棒、烧杯(1 000 mL)、纱布、锅、三角瓶、酒精灯、接种环、接种镊、菌袋(12 cm×24 cm聚丙烯塑料袋)、电磁炉、高压灭菌锅(合肥华泰医疗设备有限公司)和人工气候箱(上海博迅实业有限公司医疗设备厂)。
1.2.1 原料处理 分别将新、旧牡丹籽果壳晒干并于烘箱70 ℃过夜烘干,用研钵方式粉碎,长度不超过0.5 cm左右,不易太碎。
1.2.2 培养基制备 培养基配方编号为A-E、X、A’-E’、X’(表1),其中,A-E中牡丹籽果壳为旧果壳,A’-E’中牡丹籽果壳为新果壳,配方X、X’为相应对照。每种配方分别配置11个培养袋。
按照配方称取原料和其他辅助原料搅拌均匀,并加适量的水,一般加入量60%~70%,以用手紧握基质时,能有水滴落下的湿度为最佳,否则不利于菌丝体生长。拌匀后堆成堆并停滞20 min使其充分吸收水分。用pH试纸测其酸碱度,利用NaOH或者HCl调节pH到7.0。
表1 培养基配方%
1.2.3 装袋灭菌 将配好的培养基装入培养袋12 cm×30 cm)中,拌好的原料应尽量在4 h之内装完,以免放置时间过长,培养料发酵变酸。装袋要求紧实,否则在翻堆时容易断裂,从而影响出菇。于高压灭菌锅121 ℃、0.1 MPa下灭菌2 h。
1.2.4 接种
待培养袋冷却至25 ℃以下接种,接种量设计2%、5%、10%3个标准,每个接种量做3个重复,在超净工作台内,遵循无菌操作原则进行接种。不同配方接种量见表2。
表2 不同配方接种量
1.2.5 发菌与出菇管理 将接种好的培养袋放入培养箱之前,应用75%乙醇将培养箱进行消毒处理。以“品”字行摆放培养,培养箱温度为25 ℃,空气相对湿度是70%,避光,保持培养箱内环境清洁通风,每隔7 d,进行翻垛,检查并及时处理有污染的培养袋,且记录一次菌丝体长度,等菌丝体长至半袋时,用消过毒的针扎增氧孔。当菌丝长满袋,并有原基出现时,设置培养箱12 h、20 ℃和12 h、10 ℃交替培养3~5 d,空气相对湿度为90%,给予适量光照。待子实体长出,观察并记录平菇长势。
以相同生长时间中平菇菌丝体的生长长度作为依据进行对比,整体上均以新牡丹籽果壳为主要原料时菌丝体生长长度比以旧牡丹籽果壳为主要原料时菌丝体生长长度要长一些。接种量2%时不同配方菌丝体生长平均长度情况见表3和图1。
表3 不同配方、接种量2%时菌丝体生长平均长度cm
图1 新、旧牡丹籽果壳不同配方、接种量2%时菌丝体生长长度
由表3和图1可看出,以新牡丹籽果壳为主要原料进行栽培的菌丝体长度普遍高于以旧牡丹籽果壳为主要原料进行栽培的菌丝体长度。而当接种量为2%,牡丹籽果壳含量为8%时(配方E和E’),在培养至14 d时,以新牡丹籽果壳为主要原料进行栽培的菌丝体长度,略低于以旧牡丹籽果壳为主要原料进行栽培的菌丝体长度。但是,牡丹籽果壳含量为8%(配方E和E’)的折线图走势整体高于空白对照,牡丹籽果壳含量为0的配方,即配方X1和X1’,也就是说加入牡丹籽果壳的菌丝培养要好于不加牡丹籽果壳的空白对照。
以新牡丹籽果壳为主要原料进行栽培的菌丝体长度普遍高于以旧牡丹籽果壳为主要原料进行栽培的菌丝体长度,接种量5%时不同配方菌丝体生长平均长度情况见表4和图2。
表4 不同配方、接种量为5%时菌丝体生长平均长度cm
图2 新、旧牡丹籽果壳接种量5%时菌丝体生长长度
由表4和图2可以看出,接种量为5%,只有牡丹籽果壳含量为8%时(配方E和E’)的折线图走势与空白对照,牡丹籽果壳含量为0的配方,即配方X2和X2’的折线图走势相近。
以新牡丹籽果壳为主要原料进行栽培的菌丝体长度普遍高于以旧牡丹籽果壳为主要原料进行栽培的菌丝体长度,接种量10%时不同配方菌丝体生长平均长度情况见表5和图3。
表5 不同配方、接种量为10%时菌丝体生长平均长度cm
图3 新、旧牡丹籽果壳接种量10%时菌丝体生长长度
由表5和图3可看出,以新牡丹籽果壳为主要原料进行栽培的菌丝体长度普遍高于以旧牡丹籽果壳为主要原料进行栽培的菌丝体长度。接种量为10%,牡丹籽果壳含量为8%时(配方E和E’)的折线图走势,在培养至14 d时,以新牡丹籽果壳为主要原料进行栽培的菌丝体长度略高于以旧牡丹籽果壳为主要原料进行栽培的菌丝体长度。同样,牡丹籽果壳含量为8%(配方E和E’)的折线图走势整体高于空白对照,说明含有牡丹籽果壳的平菇菌丝体生长要好于空白对照的菌丝生长。
综合3个不同接种量的牡丹籽果壳的菌丝体生长长度情况,可以得出,以新牡丹籽果壳为主要原料进行栽培的菌丝体长度普遍长于以旧牡丹籽果壳为主要原料进行栽培的菌丝体长度,因此,以新牡丹籽果壳栽培平菇的菌丝长势效果更好。
以菌丝体生长速度为指标,不同接种量的菌丝生长速度见表6—7。可以看出,接种量对菌丝体生长速度的影响上,无论新旧果壳都是接种量为10%的菌丝体生长速度最快。
表6 旧牡丹籽果壳不同配方菌丝体的生长速度cm/d
表7 新牡丹籽果壳不同配方菌丝体的生长速度cm/d
以接种量为10%的菌丝生长速度、菌丝颜色、菌丝粗细以及菌丝满袋时间为评价依据,分别得到牡丹籽新、旧果壳为主要原料的菌丝体生长情况,见表8—9。可以看出,在以旧果壳为主要原料的平菇栽培配方中,E配方菌丝体生长速度最快,其次是D、C、A配方,最慢的是B配方。不同菌丝体的长势均良好。满袋时间为E配方最快,其次是D、C、A配方,最慢的是B配方。在以新果壳为主要原料的栽培配方中,E’配方菌丝体生长速度最快,其次是D’、C’、B’配方,最慢的是A’配方。不同菌丝体的长势均良好。满袋时间以E’配方最快,其次是D’、C’、B’配方,最慢的是A’配方。
表8 旧牡丹籽果壳不同配方菌丝体的生长情况
表9 新牡丹籽果壳不同配方菌丝体的生长情况
通过观察平菇的出菇情况,包括子实体出现的早晚、子实体大小等,比较各配方的平菇出菇优劣情况。
以旧牡丹籽果壳为主要原料,菌丝体最先长满袋的配方为E配方(图4)。
图4 E配方(E9)菌丝体生长状况
图5 C’配方(C'9)子实体出菇
在以新果壳为主要原料的培养基配方中,最先出现菇蕾并出菇的配方为C’配方(图5),从菌丝体满袋到子实体出菇只用了3 d,菌丝发满袋需要21 d,也就是说此配方从接种到出菇只需要24 d,同时,子实体生长量较高。在以旧果壳为主要原料的配方中,最先出菇的是接种量为10%的D配方(图6),从菌丝体满袋到子实体出菇只用了7 d,菌丝长满袋需要22 d,也就是说此配方从接种到出菇只需要29 d。
本试验结果表明,以旧牡丹籽果壳为主要原料,菌丝体最先长满袋的配方为E配方(旧牡丹籽果壳8%、棉籽壳80%、麸皮10%、石膏粉1.9%、多菌灵0.1%)。最先出菇且平菇长势最好的配方为D配方(旧牡丹籽果壳28%、棉籽壳60%、麸皮10%、石膏粉1.9%、多菌灵0.1%)。
以新牡丹籽果壳为主要原料,菌丝体最先长满袋的配方为E’配方(新牡丹籽果壳8%、棉籽壳80%、麸皮10%、石膏粉1.9%、多菌灵0.1%)。最先出菇且平菇长势最好的配方为C’配方(新牡丹籽果壳48%、棉籽壳40%、麸皮10%、石膏粉1.9%、多菌灵0.1%)。可以看出,牡丹籽果壳含量为48%时,平菇菌丝体可正常生长,并且子实体产量更大,因此,菜农可选择新果壳的C’配方来种植平菇,不仅产量较高,还可以提前7 d上市,为广大菜农提供了很好的商机。
以新牡丹籽果壳为主要原料的平菇栽培中,菌丝体生长速度和满袋时间等生长情况整体上都好于以旧牡丹籽果壳为主要原料的平菇栽培效果。因此在农业生产中可以考虑将当年七、八月间收的牡丹籽果壳及时投入到秋季平菇的种植栽培中,既可以得到更好的栽培效果,又可以加快农业生产废弃物的资源转化。
该项研究既可以充分利用油用牡丹籽的果壳,使得牡丹不仅花可供人观赏、牡丹籽可以榨油,而且牡丹籽果壳也不浪费,变废为宝。对于平菇栽培来说又增加一种新的栽培基质原料。用牡丹籽果壳为主要原料培养平菇时,要分清果壳的年份,注意将新旧果壳区分开来。同时,在后续研究中,本课题成员还将对牡丹籽果壳栽培出的平菇营养成分进行研究,以探究其与常规栽培平菇间的差别。