某地区GH高危人群HSV-2基因检测结果分析

杨戈（通讯作者） 陈明清 崔凡 雍刚 谢震 沈柱 林昭春

（1 四川省医学科学院·四川省人民医院皮肤病性病研究所 四川 成都 610072)

(2 四川省医疗卫生服务指导中心 四川 成都 610041)

生殖器疱疹(Genital herPes,GH)是由单纯疱疹病毒（HerPes simPlex virus，HSV）感染所致的常见病毒性性传播疾病，皮损易复发性及HSV致癌性是临床关注热点。既往认为GH多由单纯疱疹病毒Ⅱ型（HerPes simPlex virus-tyPe2，HSV-2）感染引起[1]，但随着近年来生态环境以及性接触方式的改变，由单纯疱疹病毒Ⅰ型（HerPes simPlex virus-tyPe 1，HSV-1）感染所致的GH比例有所增加[2]。为了解本地区HSV-2感染情况，本研究回顾性分析本地区361例疑似GH患者HSV-2脱氧核糖核酸（Deoxyribonucleic acid，DNA）筛查情况，并比较不同性别、年龄和季节阳性检出率的差异，现报道如下。

1.资料与方法

1.1 一般资料

2017年8 月～2018年1月在四川省医学科学院·四川省人民医院皮肤病性病研究所门诊就诊的疑似GH患者。排除标准：近3月内接受系统或局部免疫/抗病毒治疗，合并自身免疫性疾病、感染性疾病（包括其他性传播疾病及HIV感染）、严重系统性疾病、糖尿病、妊娠等以及有再次感染风险者。所有患者均自愿进行HSV-2核酸检测，并签署知情同意书。根据不同年龄分为≤20岁组、21～30岁组、31～40岁组、41～50岁组、51～60岁组及≥61岁组，按性别分为男性组和女性组，根据检测时间不同，分为秋季组（8～10月）和冬季组（11月-次年1月）。

1.2 方法

所有患者均采用实时荧光定量聚合酶链反应（realtime fluorescence quantitative Polymerase chain reaction，FQ-PCR）检测HSV-2DNA。步骤如下：(1)采集标本：先用消毒棉签拭去皮损表面分泌物，以无菌手术刀片采取皮损组织液及脱落细胞，将其放入装有灭菌生理盐水的样本管中，旋紧管盖，做好标本标注和日期，于-20℃保存，并在1周内检测。(2)采用FQ-PCR技术对样本中HSV-2DNA进行检测。AFD9600型实时荧光定量PCR仪由杭州安杰思医学科技有限公司生产，单纯疱疹病毒Ⅱ型核酸测定试剂盒由中山大学达安基因股份有限公司生产。主要步骤包括DNA提取、PCR扩增、结果分析及质量控制等，操作严格按照试剂说明书进行并在超净工作台中完成。所有仪器设备均运转正常，所有检测试剂均在有效期内。标本收集和实验方法均通过本院伦理委员会批准。计算各组阳性检出率（Positive detection rate，PDR）。

1.3 统计学分析

数据采用SPSS20.0统计软件进行统计学分析，计数资料采用率（%）表示，进行χ2检验，计量资料采用（±s）表示，进行t检验，P＜0.05为差异具有统计学意义。

2.结果

2.1 入选对象基本情况

361 例入选患者男性72.30%（261例），女性27.70%（100例），平均（39.38±13.38）岁，总体PDR 36.29%（131/361）。各组性别、季节和年龄上具有可比性（t=0.682、0.753，P=0.496、0.452均＞0.05）。秋季组男女比例145:57，冬季组116:43，经χ2检验两组性别比例差异无统计学意义（χ2=0.061，P=0.805＞0.05）。

2.2 不同性别和年龄阳性检出率的差异比较

各性别组阳性检出率，经χ2检验，两者无统计学差异（χ2=0.824，P=0.364＞0.05）；不同年龄段阳性检出率不同，经χ2检验，无统计学差异（χ2=1.646，P=0.342＞0.05），见表1。不同年龄段HSV-2DNA阳性男女患者分布趋势见表2，经Fisher's精确概率法检验，组间无统计学差异（P=0.625＞0.05）。尚发现2例年龄＞80岁检测阳性的男性患者。

表1 不同性别、年龄和季节HSV-2检出情况比较

表2 不同年龄段HSV-2DNA检测阳性性别分布

2.3 不同季节阳性检出率的差异比较

秋季组为34.16%，冬季组为38.99%，经χ2检验，两者无统计学差异（χ2=0.900，P=0.343＞0.05），见表1。秋季组检测阳性男女比例52:17,冬季组为39:23，经χ2检验，组间无统计学差异（χ2=2.390，P=0.122＞0.05）。

3.讨论

HSV感染为人类常见的疱疹病毒感染之一。根据血清型不同，可分为HSV-1和HSV-2。一般认为HSV-1主要是腰以上的感染，HSV-2则是腰以下的感染[3]。HSV除了引起易复发的单纯疱疹和生殖器疱疹外，尚可引起角膜炎、脑膜炎、脑炎，甚至坏死性肝炎[4]。妊娠期妇女HSV原发感染还可诱发流产、死产、胎儿畸形等不良妊娠结局。故HSV的核酸筛查十分必要，有助于及早发现和治疗HSV感染，减少其在高危人群的传播，减少不良结局的发生。虽然近年来发现HSV-1感染引起的生殖器疱疹比例增加[5]，但后者仍以HSV-2感染为主[6]。实时荧光定量PCR检测HSV-2核酸具有稳定性、灵敏度、特异性均高的特点[7]，本次采用该法检测HSV-2核酸，确保检测结果的稳定、准确和可靠。

361 例患者HSV-2DNA阳性检出率36.29%，低于既往报道的成都地区单纯疱疹病毒Ⅱ型55.65%的阳性检出率[8]，可能与入选患者就诊季节生殖器疱疹发病率相对较低有关。本研究发现不同性别患者的总体阳性检出率以及不同年龄段和季节的分组阳性检出率均无统计学差异，与国内其他研究结果类似[9-10]，与既往报道本地区男性感染率低于女性不同[8]，提示本地区男性HSV-2感染率有上升趋势，需加强HSV-2感染患者性伴侣同时筛查和防治。不同年龄段虽然阳性检出率有差异，但无统计学意义，与国内其他报道一致[8-11]。尽管如此，21～50岁年龄段阳性检出率最高，结合患者平均年龄，说明本地区HSV-2感染仍集中于性活跃人群。还发现2例年龄大于80岁HSV-2阳性的男性患者，提示应加强对老年高危人群的病毒筛查和防治。入选患者秋冬两季阳性检出率差异不显著，有待扩大样本进一步研究。