实时荧光定量PCR技术检测妊娠晚期GBS感染的临床价值分析△

萧君明 尹青霞 黄婉婷

(中山市横栏医院检验科 中山 528478)

B型链球菌(GBS)为条件致病菌，寄生在机体泌尿生殖道与下消化道，是新生儿与孕产妇感染的主要细菌之一[1]。孕妇感染GBS后易出现宫内感染、胎膜早破等，经垂直传播引起新生儿脑膜炎、败血症等，危害性极大。细菌培养法是诊断GBS的金标准，因孕妇生殖道中存在多种细菌，培养基会抑制GBS生长，易出现漏诊，且耗时长，易贻误治疗时机[2]。实时荧光定量PCR检测具有敏感度高、检测时间短等优势，可快速、准确的获得GBS结果，逐渐被应用于GBS筛查中。本研究旨在分析实时荧光定量PCR技术检测妊娠晚期GBS感染的临床价值，报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2018年1月～12月在我院产检的200例单胎初产妇，年龄23～38岁，平均年龄(32.21±2.21)岁；孕周35～37周，平均孕周(36.01±0.22)周。纳入标准：取样本前未接受局部或全身使用抗生素，并未使用过洗液与过栓剂；无妊娠合并甲状腺疾病或糖尿病；签署知情同意书；心、肾等重要器官正常。排除标准：阴道分泌物涂片太少或太厚，染色、固定不良；合并滴虫性阴道炎、外阴阴道假丝酵母菌病、衣原体感染、粘液浓性宫颈炎等其他阴道感染。

1.2 方法

先将外阴分泌物擦去，用无菌窥器将阴道暴露，将无菌拭子插入阴道下1/3处，旋转1周采集阴道分泌物，取2份样本。将阴道拭子接种血琼脂平皿，并在35℃、10%CO2环境下孵育24～48h。使用普通细菌培养法和实时荧光定量PCR法检测GBS，严格按照试剂盒说明书实施操作。阴道分泌物中有一项检出GBS即为携带者。

1.3 观察指标

(1)记录入组孕妇GBS携带情况；(2)分析细菌培养法与实时荧光定量PCR法检测GBS阳性率；(3)观察GBS阳性与阴性者母婴妊娠结局。

1.4 统计学方法

采用SPSS21.0统计软件，n(%)表示计数资料，行χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 孕妇GBS携带情况

200例孕妇GBS携带率为10.50%(21/200)。

2.2 细菌培养法与实时荧光定量PCR法检测GBS阳性率

实时荧光定量PCR法检测GBS阳性率明显高于细菌培养法，差异有统计学意义(P<0.05)，见表1。

表1 细菌培养法与实时荧光定量PCR法检测GBS携带情况对比[n(%)]

检测方式例数阳性阴性细菌培养法2008(4.00)192(96.00)实时荧光定量PCR法20021(10.50)179(89.50)χ26.283P0.012

2.3 妊娠结局

2.3.1孕妇不良妊娠发生情况

GBS阳性组孕妇不良妊娠总发生率高于GBS阴性组，差异有统计学意义(P<0.05)，见表2。

表2 GBS阳性组与阴性组产妇不良妊娠对比[n(%)]

组别胎儿窘迫宫内感染早产胎膜早破产后出血合计GBS阳性组(n=21)2(9.52)3(14.29)2(9.52)3(14.29)2(9.52)12(57.14)GBS阴性组(n=179)10(5.59)6(3.35)6(3.35)9(5.03)7(3.91)38(21.23)χ20.0542.9940.6041.4510.38112.929P0.4720.0840.4370.2280.5370.000

2.3.2新生儿出生情况

GBS阳性组新生儿不良结局发生率高于GBS阴性组，差异有统计学意义(P<0.05)，见表3。

表3 GBS阳性组与阴性组新生儿出生情况对比[n(%)]

组别新生儿窒息新生儿感染新生儿低体质量肺炎合计GBS阳性组(n=21)1(4.77)3(14.29)3(14.29)2(9.52)9(42.86)GBS阴性组(n=179)2(1.12)8(4.47)6(3.35)7(3.91)23(12.85)χ21.6901.8522.9940.38110.459P0.1940.1740.0840.5370.001

3 讨论

妊娠期体内孕激素与雌激素水平升高、阴道pH值改变、糖原含量增加、免疫功能低下等会诱发阴道菌群失调，增加GBS繁殖风险[3]。GBS是一种革兰阳性兼性厌氧球菌，正常部位生长的GBS可逆行至胎盘，经炎症细胞吞噬作用分泌蛋白水解酶，降解胎膜蛋白，侵袭胎膜，诱发胎膜早破，并可经母婴垂直传播，引起阴道感染、子宫内感染等[4～5]。本研究中，GBS阳性组孕妇不良妊娠总发生率、新生儿不良结局发生率高于GBS阴性组，提示GBS感染会增加母婴不良妊娠结局的发生。因此，早期准确诊断，指导临床实施干预措施意义重大。

细菌培养法是临床筛查GBS的常用手段，但其具有敏感度差、耗时长、干扰多、阳性率低、重复性差等优缺点，临床应用受到一定的限制。本研究中，200例孕妇GBS携带率为10.50%(21/200)，实时荧光定量PCR法检测GBS阳性率明显高于细菌培养法，提示实时荧光定量PCR可有效检测GBS感染，利于临床早期实施措施干预，提高母婴结局。实时荧光定量PCR技术具有敏感度高、准确度高等优势，可在10～100min内获得检测结果，可动态反映病毒突变、复制情况，预测抗病毒治疗效果，与传统PCR检测相比，无需通过PCR后处理，操作简单便捷，可避免人为判断，结果更客观[6]。

综上所述，妊娠晚期GBS感染会增加宫内感染、胎膜早破、新生儿感染等不良结局的发生，实时荧光定量PCR可快速准确筛查GBS，指导临床早期预防性使用抗生素治疗，对改善母婴分娩结局起到关键性作用。