煎炸方式和煎炸食材对花生煎炸油中3-氯丙醇酯和缩水甘油酯含量的影响

刘玉兰，刘海兰，黄会娜，马宇翔，安 骏，王满意

（1.河南工业大学粮油食品学院，河南 郑州 450001；2.中粮福临门食品营销有限公司，北京 100020；3.中粮营养健康研究院有限公司，北京 102209）

油脂煎炸是一种传统的烹饪方式，煎炸食品因其独特的口感为人们所喜爱。油脂在高温条件下对不同食材进行煎炸，煎炸过程中油脂发生一系列的热氧化、热聚合、热水解、热分解等反应[1-3]，并与食材中组分发生作用，产生一些对人体健康不利的成分，如极性组分（polar components，PC）、多环芳烃等[4-9]，也可能会产生3-氯丙醇酯（3-monochloropropane-1,2-diol esters，3-MCPDE）和缩水甘油酯（glycidyl esters，GEs）[10-12]。Wong等[13]采用棕榈油在2 个温度（160、180 ℃）、4 个NaCl质量分数（0%、1%、3%、5%）下对土豆切片进行5 d的间歇煎炸，每天100 min，结果显示，棕榈油中3-MCPDE含量随煎炸时间的延长而逐渐减少，GEs含量则持续升高。Aniołowska等[14]采用棕榈油在180 ℃对冷冻土豆条进行5 d的间歇煎炸，每天8 h，发现煎炸油中GEs含量随煎炸时间的延长呈现下降趋势。2011年，国际癌症研究机构将3-MCPDE列为2B级，即“可能的人类致癌物”[15-18]，其对人体健康的危害不仅是因为3-MCPDE自身带有一定的毒性[19-20]，还因为其在肠道中能被脂肪酶水解生成3-MCPD，经人体吸收产生毒性[21-22]。德国风险评估委员会根据毒理学实验提出GEs本身不具有致癌性，但其在体内经脂质代谢产生的缩水甘油是具有基因毒性的致癌物[20]。目前还没有关于食用油和煎炸油中3-MCPDE和GEs的限量标准，但GB 2762—2017《食品安全国家标准 食品中污染物限量》中规定3-MCPD在固态调味品、液态调味品中的限量分别为0.4、1.0 mg/kg，欧盟食品科学委员会和联合食品添加剂专家委员会规定3-MCPD摄入量应小于2 μg/kg[22]。GB 7102.1—2003《食用植物油煎炸过程中的卫生标准》规定煎炸在用油的酸价和PC限量应分别不超过5 mg/g和27%，但在达到此限量时，煎炸在用油中3-MCPDE和GEs含量如何却少见报道。我国典型的煎炸食材有油条（煎炸面制食品）、鸡翅（煎炸肉制食品）、豆腐（煎炸高水分含量食品）等，近年煎炸薯条的产量也很大。本实验选用我国居民常用的花生油作为煎炸实验用油，采用连续煎炸和间歇煎炸两种方式，对4 种不同的典型食材进行煎炸，并用空白煎炸油作为对照，定期采集煎炸油样，检测其中3-MCPDE、GEs含量和PC质量分数，分析研究不同煎炸方式和不同煎炸食材的煎炸在用油中3-MCPDE、GEs含量及PC质量分数的变化以及增量关系，为煎炸在用油品质安全和质量控制提供技术支持。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

一级压榨花生油 河南某花生油加工企业；精制面粉河南金苑粮油有限公司；鸡翅 华英禽业有限公司；薯条 安徽惠之园食品有限公司；老豆腐、白砂糖、食用盐 郑州市丹尼斯超市；高活性干酵母、无铝快速复配油条膨松剂 安琪酵母股份有限公司。

1,2-二油酸-3-MCPDE、1,2-二油酸-3-MCPDE-D5、油酸GEs、油酸GEs-D5标准品（纯度≥97%） 上海安普实验科技股份有限公司；甲醇、异丙醇、正己烷、乙酸乙酯、甲基叔丁基醚（均为色谱纯） 美国生物VBS公司；苯基硼酸（纯度≥97%） 上海阿拉丁生化科技股份有限公司；碳酸氢钠（分析纯） 洛阳市化学试剂厂；硫酸钠、无水硫酸镁（均为分析纯） 天津市科密欧化学试剂有限公司；乙醚（分析纯）、硫酸（质量分数98%） 烟台市双双化工有限公司；氦气（纯度≥99.999%） 河南迎众化工产品有限公司。

1.2 仪器与设备

Trace1310-ISQ 气相色谱-质谱联用仪、毛细管色谱柱HP-5MS（30 mm×0.25 mm，0.25 μm） 美国Thermo Fisher公司；EF-81型煎炸锅 广州唯利安西厨设备制作有限公司；CS-B5型食品搅拌机 广州童心利机械厂；MTN-2 800 W氮吹浓缩仪 天津奥特赛恩斯仪器有限公司；ZD-85数显气浴恒温振荡器 江苏金坛市宏华仪器厂；KQ3200DE数控超声波清洗器 昆山市超声仪器有限公司；RE52-AA旋转蒸发仪 上海亚荣生化仪器厂；LD5-10台式大容量离心机 北京京立离心机有限公司。

1.3 方法

1.3.1 食材的制作与煎炸

油条：将面粉、膨松剂、酵母、食盐、白糖等混合均匀，与热水混合搅拌制成面团，醒发2 h，之后用面团制成若干面坯条（约10 cm×1 cm×1 cm），将两个坯条合在一起，轻捏拉长至15 cm，放入锅里炸约1.5 min至油条膨胀丰满、金黄酥脆时捞起沥油。

薯条：将超市购买的马铃薯条放入煎炸锅里炸约3～4 min至薯条浮出油面、表面金黄后捞出沥油。

鸡翅：将鸡翅洗净，用刀将鸡翅表面划一些小口，沥水晾干。将鸡翅放入锅里炸约4～6 min至鸡翅浮出油面、鸡肉呈金黄色后捞出沥油。

豆腐：将豆腐切成矩形（约6 cm×1 cm×1 cm），沥水晾干。待炸至豆腐浮出油面、呈金黄色后捞出沥油。

在煎炸锅中加入约8 L新鲜花生油并加热升温至（190±5）℃，对不同食材分别进行煎炸（空白油不添加食材）。连续煎炸：连续煎炸32 h，每间隔2 h取煎炸油样；间歇煎炸：每天早、中、晚各煎炸1 h，连续5 d共15 h，取每次煎炸油样。每次取煎炸油样约50 mL，置于磨口塞棕色瓶中，冷却至室温后贮存于-20 ℃待测。

1.3.2 煎炸油品质的检测

1.3.2.1 3-MCPDE和GEs含量检测

参照GB 5009.191—2016《食品安全国家标准 食品中氯丙醇及其脂肪酸酯含量的测定》第3法以及苗雨田[23]、杨贵芝[24]、王璐阳[25]等的方法，分别称取（100±5）mg待测油样于10 mL罗盖试管中，分别加入60 μL 2 mg/kg 3-MCPDE和GEs的内标溶液（分别为3-MCPDE-D5和GEs-D5）。在酸性条件下将GEs转化为3-溴代丙二醇单酯，其与3-MCPDE在酸性甲醇溶液中水解为3-溴代丙二醇（3-monobromo-1,2-propanediol，3-MBPD）和3-MCPD，用硫酸钠溶液和正己烷净化，然后加入乙酸乙酯/乙醚混合溶液提取，用饱和的苯硼酸衍生，将衍生后的溶液氮吹至干；加正己烷复溶，过滤膜至进样小瓶，最后用气相色谱-质谱仪进行检测。

色谱条件：弱极性毛细管柱HP-5MS（30 mm×0.25 mm，0.25 μm）；载气为氦气（纯度≥99.999%），流速为1 mL/min；进样口温度250 ℃，进样量1 μL，不分流进样；溶剂延迟时间为5 min；升温程序：50 ℃保持1 min，以2 ℃/min升至90 ℃，再以40 ℃/min升至270 ℃，并保持5 min。

质谱条件：电子轰击源；电离能量70 eV；离子源温度250 ℃；传输线温度280 ℃；扫描方式为选择离子监测模式。监测离子：3-MCPD衍生物：定量离子m/z 147，定性离子m/z 146、196、198；3-MCPD-D5衍生物：定量离子m/z 150，定性离子m/z 149、201、203；3-MBPD衍生物：定量离子m/z 240，定性离子m/z 147、242；3-MBPD-D5衍生物：定量离子m/z 245，定性离子m/z 150、247。

1.3.2.2 酸价与PC质量分数检测

酸价的测定参照GB 5009.229—2016《食品安全国家标准 食品中酸价的测定》的方法；PC质量分数的测定参照GB 5009.202—2016《食品安全国家标准 食用油中极性组分（PC）的测定》的方法。

1.3.2.3 3-MCPDE、GEs含量和PC质量分数及3 种成分总相对含量分析

对3-MCPDE、GEs含量和PC质量分数的数值作图，分析5 种煎炸油中3 种成分的总相对含量。

1.4 数据统计与分析

每个样品平行测定3 次，最终实验结果去除异常值后用 ±s表示。加标回收实验时，每个样品平行测定6 次。其他数据采用Excel 2010、SPSS 20.0软件进行统计分析；采用Origin 8.5软件画图。

2 结果与分析

2.1 煎炸油中3-MCPDE和GEs含量检测方法的建立

图1 3-MCPDE和GEs的气相色谱-质谱图Fig. 1 Gas chromatogram-mass of 3-MCPDE and GEs

如图1所示，3-MCPDE、GEs及其内标物的出峰时间依次为18.13、18.07 min和19.69、19.62 min。本实验中3-MCPDE在线性范围内的标准曲线线性决定系数大于0.998，回收率为94.5%～105.6%，相对标准偏差（n=6）在1.03%～3.35%之间；GEs在线性范围内的标准曲线线性决定系数大于0.999，回收率为93.1%～108.8%，相对标准偏差（n=6）在2.82%～5.46%之间。说明本方法对煎炸油中3-MCPDE和GEs含量的检测具有良好的重复性与精密度，能够满足本实验的检测要求。

2.2 不同食材连续煎炸油中3-MCPDE含量的变化

图2 不同食材连续煎炸油中3-MCPDE含量的变化Fig. 2 Changes in 3-MCPDE content in frying oil during continuous frying of different foodstuffs

从图2可以看出，花生油中3-MCPDE的初始含量为0.84 mg/kg。随着煎炸时间的延长，5 种煎炸油中3-MCPDE含量在煎炸初期的一定时间内逐渐升高，之后又呈现降低趋势。其中豆腐煎炸油中3-MCPDE含量升高最明显，在煎炸12 h时其含量达到最大值（17.45 mg/kg）；空白煎炸油在8 h时达到最大值（8.02 mg/kg）；鸡翅煎炸油在16 h时达到最大值（7.12 mg/kg）；薯条煎炸油在4 h时达到最大值（2.96 mg/kg）；油条煎炸油在12 h时达到最大值（2.08 mg/kg）。在32 h连续煎炸过程中，4 种食材煎炸油与空白煎炸油中3-MCPDE含量变化均存在明显差异，其中豆腐、空白、鸡翅、薯条煎炸油中3-MCPDE含量的差异更大，但煎炸后期鸡翅和空白煎炸油中3-MCPD的含量接近。这种差异可能与不同食材引入煎炸油中氯离子含量的不同（如豆腐制作时所用助剂中含有较多的氯离子）有关[26-27]。油脂高温受热时氯离子的存在对3-MCPDE形成有促进作用[25]。此外，也可能与不同食材煎炸过程中煎炸油温度的差异有关。

2.3 不同食材连续煎炸油中GEs含量的变化

图3 不同食材连续煎炸油中GEs含量的变化Fig. 3 Changes in GEs content in frying oil during consecutive frying of different foodstuffs

植物油脂中普遍含有GEs[28-29]。从图3中可以看出，花生油中GEs初始含量为2.43 mg/kg，在32 h连续煎炸过程中，5 种煎炸油中GEs含量均随煎炸时间的延长呈现增加趋势，其中空白煎炸油中GEs含量增幅最大（32 h时为66.34 mg/kg，增加26 倍），其次是油条煎炸油（32 h时为20.80 mg/kg，增加7.56 倍），薯条、豆腐煎炸油中GEs含量变化较小（32 h时分别为7.20、5.00 mg/kg），鸡翅煎炸油中GEs含量几乎没有变化。空白煎炸油中GEs含量增幅明显高于其他煎炸油，原因可能是其在整个煎炸过程中的油温高于含食材的煎炸油[13,30]。

2.4 不同食材间歇煎炸油中3-MCPDE含量的变化

如图4所示，随着煎炸时间的延长，油条、薯条、鸡翅、空白煎炸油中3-MCPDE含量变化与连续煎炸过程呈现相似的趋势，即先升高后降低，但豆腐煎炸油中3-MCPDE含量持续升高，至煎炸结束时已升高至12.88 mg/kg（增加14.33 倍）。鸡翅煎炸油在煎炸6 h时达到最大值（13.88 mg/kg）后小幅下降；油条、薯条以及空白煎炸油在3 h时分别达到最大值9.96、2.17、5.41 mg/kg，后呈下降趋势。在15 h间歇煎炸过程中，油条、薯条及空白煎炸油中3-MCPDE含量存在明显差异，豆腐与鸡翅煎炸油中3-MCPDE含量变化较大。对两种煎炸方式进行比较，连续煎炸16 h时的豆腐、薯条、空白煎炸油中3-MCPDE含量均高于间歇煎炸15 h时，但连续煎炸32 h时的油条、鸡翅煎炸油中3-MCPDE含量均低于间歇煎炸15 h。

图4 不同食材间歇煎炸油中3-MCPDE含量的变化Fig. 4 Changes in 3-MCPDE content in frying oil during intermittent frying of different foodstuffs

2.5 不同食材间歇煎炸油中GEs含量的变化

图5 不同食材间歇煎炸油中GEs含量的变化Fig. 5 Changes in GEs in frying oil during intermittent frying of different foodstuffs

从图5可知，在间歇煎炸过程中，5 种煎炸油中GEs含量均随煎炸时间的延长而升高，但薯条、豆腐煎炸油中GEs含量增幅较小，与鸡翅、油条和空白煎炸油中GEs含量增幅呈明显差异。间歇煎炸15 h后，豆腐、鸡翅、空白、油条、薯条煎炸油中GEs含量分别为9.00、40.36、47.05、46.47、9.06 mg/kg，分别增加了2.70、15.61、18.36、18.12、2.73 倍。与连续煎炸16 h煎炸油中GEs含量相比，间歇煎炸15 h的空白煎炸油中GEs含量低于连续煎炸油，而其余4 种煎炸油中GEs含量均较高于连续煎炸油。

2.6 不同煎炸油中PC含量和酸价的变化

从图6、7可以看出，无论连续煎炸还是间歇煎炸，4 种食材及空白煎炸油中PC质量分数均随煎炸时间的延长大幅持续增加。煎炸油中PC初始质量分数为3.34%，连续煎炸32 h后，PC质量分数增幅依次为：空白煎炸油＞薯条煎炸油＞鸡翅煎炸油＞油条煎炸油＞豆腐煎炸油，其对应PC质量分数分别为50.66%、36.47%、32.98%、29.00%、15.50%，除豆腐煎炸油PC质量分数未超标外，油条、鸡翅、薯条、空白煎炸油中PC质量分数分别于32、28、24、16 h时超出GB 5009.202—2016限量。不同食材连续煎炸油PC质量分数达限量时，3-MCPDE和GEs总量的排序为：空白煎炸油（66.51 mg/kg）＞油条煎炸油（21.48 mg/kg）＞豆腐煎炸油（12.93 mg/kg）＞薯条煎炸油（8.51 mg/kg）＞鸡翅煎炸油（6.60 mg/kg）。由此可知，PC质量分数达限量的时间点时，3-MCPDE和GEs总量的风险已经很高，其中空白煎炸油明显高于其他4 种。

图6 不同食材连续煎炸油中PC质量分数的变化Fig. 6 Changes in PC content in frying oil during intermittent frying of different foodstuffs

图7 不同食材间歇煎炸油中PC质量分数的变化Fig. 7 Changes in PC content in frying oil during intermittent frying of different foodstuffs

间歇煎炸15 h后，PC质量分数增幅依次为：鸡翅煎炸油＞薯条煎炸油＞油条煎炸油＞豆腐煎炸油＞空白煎炸油，其对应PC质量分数分别为26.27%、23.84%、20.29%、14.67%、14.22%，5 种煎炸油中PC质量分数均未超标。此时3-MCPDE和GEs总量排序为：鸡翅煎炸油（52.17 mg/kg）＞空白煎炸油（50.87 mg/kg）＞油条煎炸油（49.98 mg/kg）＞豆腐煎炸油（21.88 mg/kg）＞薯条煎炸油（10.64 mg/kg）。

由图8、9可见，不同煎炸方式、不同食材煎炸油的酸价均随煎炸时间延长逐渐升高。煎炸油的初始酸价为0.49 mg/g。连续煎炸32 h后，鸡翅、豆腐、油条、薯条和空白煎炸油的酸价分别上升至2.40、2.75、7.15、2.25、2.19 mg/g；间歇煎炸15 h后，其酸价分别上升至2.03、1.83、1.81、1.40、1.10 mg/g。除油条煎炸油在连续煎炸20 h后超出GB 5009.229—2016限量之外，其他煎炸油至煎炸结束时均未超出限量。

图8 不同食材连续煎炸油中酸价的变化Fig. 8 Change in acid value in frying oil during consecutive frying of different foodstuffs

图9 不同食材间歇煎炸油中酸价的变化Fig. 9 Change in acid value in frying oil during intermittent frying of different foodstuffs

2.7 不同煎炸油中3-MCPDE、GEs和PC总相对含量

图10 连续煎炸32 h不同食材连续煎炸油中3 种成分的总相对含量Fig. 10 Sum of 3 components in 32 h frying oil from consecutive frying of different foodstuffs

图11 间歇煎炸15 h不同食材间歇煎炸油中3 种成分的总相对含量Fig. 11 Sum of 3 components in 15 h frying oil from intermittent frying of different foodstuffs

从图10可见，连续煎炸32 h时，空白煎炸油中3 种成分的总相对含量最高（PC质量分数和3-MCPDE、GEs含量分别为50.66%、3.71 mg/kg和 66.34 mg/kg），其次是油条煎炸油、薯条煎炸油、鸡翅煎炸油，豆腐煎炸油最低。从图11可见，间歇煎炸15 h时，3 种成分总相对含量的排序是：鸡翅煎炸油＞油条煎炸油＞空白煎炸油＞豆腐煎炸油＞薯条煎炸油。

此外，同样的煎炸条件下，不同食材煎炸油中3 种成分在总相对含量中占比也有明显差别。如连续煎炸32 h时，空白、油条、薯条煎炸油中以PC和GEs为主，3-MCPDE含量相对较低，而鸡翅、豆腐煎炸油中以PC、3-MCPDE为主，GEs含量相对较低。

3 结 论

通过对不同食材的连续煎炸和间歇煎炸实验，以及对不同煎炸油样中3-MCPDE、GEs含量和PC质量分数的测定，明确了不同煎炸油中3-MCPDE、GEs含量的变化及其与PC质量分数的关系。无论煎炸食材和煎炸方式如何，随煎炸时间的延长，4 种食材煎炸油及空白煎炸油中3-MCPDE含量均呈现先升高后降低的趋势，而GEs含量则呈持续升高的趋势，但不同食材煎炸油中3-MCPDE和GEs含量升幅有明显差别。不同食材连续煎炸油中PC质量分数达27%的限量时，3-MCPDE和GEs总量的排序为：空白煎炸油（66.51 mg/kg）＞油条煎炸油（21.48 mg/kg）＞豆腐煎炸油（12.93 mg/kg）＞薯条煎炸油（8.51 mg/kg）＞鸡翅煎炸油（6.60 mg/kg），可见PC质量分数达到限量的时间点时，3-MCPDE和GEs总量的风险已经很高，其中空白煎炸油明显高于其他4 种煎炸油。间歇煎炸15 h后，5 种煎炸油中PC质量分数均未超过限量，此时3-MCPDE和GEs总量排序为：鸡翅煎炸油（52.17 mg/kg）＞空白煎炸油（50.87 mg/kg）＞油条煎炸油（49.98 mg/kg）＞豆腐煎炸油（21.88 mg/kg）＞薯条煎炸油（10.64 mg/kg）。同样的煎炸方式、不同食材煎炸油中3-MCPDE、GEs、PC 3 种组分的总相对含量增幅为：32 h连续煎炸时，空白煎炸油＞油条煎炸油＞薯条煎炸油＞鸡翅煎炸油＞豆腐煎炸油；15 h间歇煎炸时，鸡翅煎炸油＞油条煎炸油＞空白煎炸油＞豆腐煎炸油＞薯条煎炸油。目前我国还没有对食用油和煎炸在用油中3-MCPDE、GEs含量做出明确限量，但从本研究的结果来看，油脂煎炸过程中形成3-MCPDE和GEs的含量及其安全风险应引起关注。