应用酶联免疫吸附试验和磁微粒化学发光免疫法检测孕妇乙型肝炎表面抗原的意义

蓝唯

【摘 要】目的：分析酶联免疫吸附试验和磁微粒化学发光免疫法检测孕妇乙型肝炎表面抗原的意义。方法：选取2018年1月至12月期间我院收治的80例乙型肝炎孕妇，均采取酶联免疫吸附试验和磁微粒化学发光免疫法检测乙肝表面抗原，分析两种检测方法结果。结果：80份样本中酶联免疫吸附法检出阳性64份，阳性率为80.0%，电化学发光免疫检测出阳性77份，阳性率为96.25%，两种检出阳性率差异显著（P<0.05）。结论：对于孕妇乙型肝炎表面抗原检测中磁微粒化学发光免疫检测法准确性高于酶联免疫吸附法，临床可优选使用。

【关键词】酶联免疫吸附试验;磁微粒化学发光免疫法检测;乙型肝炎表面抗原

【中图分类号】R512.6【文献标识码】B【文章编号】1672-3783（2019）06-03--02

慢性乙型肝炎（HBV）为一种常见的传染性疾病，相关部分统计数据显示我国目前具有约1亿人受乙肝病毒影响[1]，使得慢性乙肝成为威胁人民生命健康的杀手。目前慢性乙肝的检测方法主要为酶联免疫吸附试验（ELISA）、磁微粒化学发光免疫法（CLIA）等技术，ELISA用于HBsAg定性检测，CLIA用于定量检测，因此两种检测方法阳性率如何为本次研究重点。

1 资料与方法

1.1 基础资料来源

2018年1月至12月期间在我院接受治疗的80例乙型肝炎病人，患者相关诊断均符合2015版中华医学会感染病学分会制定的《慢性乙型肝炎防治指南》的相关标准[2]。80例孕妇年龄20-41岁，平均（32.0±2.6）岁，孕周16-33周，平均（22.3±5.2）周，本次患者均同意相应的检测方法并与我方签订相应协议。

1.2 方法

抽取清晨空腹肘静脉外周血5ml于具有抗凝剂的试管中，室温下静止约1h后离心，离心设置为4000r/min，离心5min，离心后吸取上清液，分为A、B试管中，-70℃保存。A试管使用ELISA检测，所用试剂为上海荣盛生物药业有限公司生产，酶标仪及洗板机为瑞士帝肯，严格按照说明书操作。B试管使用CLIA方法检测，仪器为郑州安图公司生产的A2000化学发光仪，试剂为郑州安图生物工程有限公司生产的磁微粒化学发光法乙肝表面抗原定量检测试剂盒，检测按照试剂盒方法及步骤。

1.3 阳性结果判断标准

ELISA检测法：标本的OD值≥COV为阳性，CLIA法检测后数值>0.05IU/ml为阳性，确认试验以抑制率>50%为阳性。

1.4 数据分析

组间数据纳入统计学分析软件SPSS20.0中分析，X2检验分析计数资料，组间数据比价后P<0.05为差异明显。

2 结果

80份样本中酶联免疫吸附法检出阳性64份，阳性率为80.0%，磁微粒化学发光免疫检测出阳性77份，阳性率为96.25%，两种检出阳性率差异显著（X2=1.16，P=0.026）。

3 讨论

乙型肝炎病毒是一种具有强传染性的病毒，一般母婴为该种病毒传染的主要途径，婴儿感染该种病毒后可能出现流产、早产以及胎儿畸形等严重结果，因此对于孕妇人人员进行乙型肝炎病毒检测尤其重要，其直接影响新生儿接受乙型肝炎疫苗免疫策略。

目前监测乙肝的方法较多，使用频率较高的方法为酶联免疫吸附试验、磁微粒化学发光免疫法检测、胶体金免疫层析发等。在我国大部分医院监测乙型肝炎表面抗原一般采取酶联免疫吸附试验，但该种检测方式要求样品浓度较高，而临床样本浓度较低使得检测敏感性低从而出现漏诊对于患者治疗带来不良影响。胶体金免疫层析分析方法是检测在酶联免疫吸附基础之上的一种检测方式，该种检测方式操作简单，无需特殊设备支持均可获得该项效果，因此在乙型肝炎表面抗原的检测中较多使用，但该种检测方式也存在一定短板，容易出现假阳性和假阴性，导致临床检测结果不稳定。磁微粒化学发光免疫法检测一般为仪器自动完成检测，具有较高灵敏度、准确性且无辐射，对于检测人员安全性高。该技术采用双抗体夹心法原理进行检测，用抗-HBs抗体包被磁微粒，用辣根过氧化物酶标记的抗-HBs抗体制备酶结合物，通过免疫反应形成抗体-抗原-抗体-酶复合物，该复合物催化发光底物发出光子，发光强度与HBsAg含量成正比。检测过程中样品在仪器中具有缓冲液处理，利用表面活性剂能够增加脂类和蛋白质的溶解度的特点，减少非特异性物质的结合，并清除未结合的物质，利用缓冲液增强离子强度，并提供弱碱性环境，使吸附在载体上的非特异性抗体、抗原或其他蛋白质成分远离它们的等电点，转变为带更多负电荷的离子，有利于其溶解而被彻底冲洗干净，使得检测的阳性率获得保证。酶联免疫吸附试验不及发光检测法具有高灵敏度和可重复性，因此具有较高漏检率及假阳性，加上酶的纯度和反应过程容易受到环境因素影响，使得结果准确度不高。

在本次检测分析中80例乙型肝炎孕妇分别采取酶联免疫吸附试验、磁微粒化学发光免疫法检测，结果酶联免疫吸附试验阳性率为80.0%，磁微粒化学发光免疫法检测阳性率为96.25%，提示磁微粒化学发光免疫法检测更加理想，结果与前人报道基本一致[3]。总之，经本次对比分析我们认为对于孕妇乙型肝炎表面抗原的检测中使用磁微粒化学发光免疫法检测阳性率明显高于酶联免疫吸附试验，临床可根据具体情况优先选择。

参考文献

Yao QQ，Dong XL，Wang XC，et al. Hepatitis B virus surface antigen（HBsAg）-positive and HBsAg-negative hepatitis B virus infection among mother-teenager pairs 13 years after neonatal hepatitis B virus vaccination[J]. Clin Vaccine Immunol，2013，20（2）：269-275.

中华医学会肝病学分会，中华医学会感染病学分會. 慢性乙型肝炎防治指南（2015 年更新版）[J]. 临床肝胆病杂志，2015，31（12）：1941-1960.

邱文杰. 酶联免疫吸附与磁微粒化学发光法检测乙型肝炎病毒的对比研究[J].世界临床医学，2016，，10（17）：241-242.