黄守敏 胡向奇
(安庆职业技术学院, 安徽 安庆 246003)
在农业生产过程中,为了防治植物病虫害,保证和提高农作物产量,经常需要用到农药。过度使用化学农药,对农作物、土地、水源等会造成不良影响。利用植物资源开发的植物性农药(俗称“中草药农药”)能在自然界降解,一般不会污染环境及农产品,对人和牲畜相对安全。因此,研究开发植物性农药意义重大。
可以用于配制农药的植物种类很多。本次研究,通过室内实验,主要测试分析了草木犀(Melilotus officinalis)、竹叶花椒(Zanthoxylum armatum)、水苏(Stachys japonica)、马蹄金(Dichondra repens)、卫矛(Euonymus alatus)、小窃衣(Torilis japonica)、刻叶紫堇(Corydalis incisa)、齿果酸模(Rumex dentatus)等8种植物的粗提物,对小菜蛾(Plutella xylostella)、柑橘红蜘蛛(Panonychus citri)、桃蚜(Myzus persicae)、玉米象(Sitophilus zeamais)等4种植物害虫的毒杀及驱避效果。
实验用仪器主要有:Gzx-9076 MBE型数显鼓风干燥箱,BIC-300智能人工气候培养箱,GZP-250 s光照培养箱,FW135中草药粉碎机,IKA®RV10旋转蒸发仪,BSM420.3电子天平。
实验用试剂:浓度为95%的乙醇。
供试生物:小菜蛾,采自安庆市郊区菜地,放入智能人工气候箱里饲养。对成虫给予10%的蜂蜜水作为补充营养,对幼虫每天给予适量新鲜的甘蓝叶片,饲养2~3代后用于供试。柑橘红蜘蛛、桃蚜、玉米象均采自安庆市周边,分别饲养2~3代后用于供试。饲养箱的温度设置为25 ℃,湿度维持在60%以上;光周期为12 h光照12 h黑暗。
试验所用草木犀、竹叶花椒、水苏、马蹄金、卫矛、小窃衣、刻叶紫堇、齿果酸模等8种植物,采自安徽省西南地区。供试部分为这几种植物的叶片。
1.2.1 粗提物的制备
将供试的新鲜植物叶片洗净烘干,用粉碎机粉碎,然后过40目筛。取一定量的植物叶片干粉放入玻璃容器中,加入2倍体积的无水乙醇,在室温避光条件下浸泡4 d,然后过滤。去除残渣后得到的滤液,在旋转蒸发仪中蒸馏(50 ℃,100 rmin),获得植物粗提物浸膏。待浸膏干燥后用电子天平称重,并避光保存于4 ℃的冰箱中备用[1-2]。
1.2.2 粗提物的毒力测定
(1) 测试水苏、竹叶花椒和草木犀提取物对柑橘红蜘蛛的毒杀作用。将这3种植物粗提物浸膏用清水稀释,分别配成5种不同浓度(质量浓度)的稀释液。水苏浸膏稀释液的5种浓度为3.5、1.75、0.875、0.438、0.219 gmL;竹叶花椒浸膏稀释液的 5种浓度为2、1、0.5、0.25、0.125gmL;草木犀浸膏稀释液的5种浓度为1、0.5、0.25、0.125、0.0625 gmL。设清水对照。将新鲜柑橘叶片洗净晾干,与供试的柑橘红蜘蛛一起,放入提取物的不同浓度稀释液中浸渍5 s,然后将试虫与叶片一起放入培养皿。在培养24、48、72 h后,检查死亡虫数[1-3]。每种浓度的稀释液测试均进行3次,每个培养皿中均放入10只试虫。
(2) 测试水苏、草木犀、竹叶花椒、马蹄金、卫矛和小窃衣提取物对桃蚜的毒杀作用。将这6种植物的提取物,分别用清水稀释,配成5种浓度的稀释液。其中,竹叶花椒、马蹄金、卫矛和小窃衣提取物稀释液的5种浓度为1、0.5、0.25、0.125、0.0625 gmL;水苏和草木犀提取物稀释液的5种浓度为10、5、2.5、1.25、0.625 gmL。设清水对照。新鲜桃叶洗净晾干,与供试的桃蚜一起,分别放入不同浓度的稀释液中浸渍5 s,然后连虫带叶放入培养皿。在培养24、48、72 h后,检查死亡虫数[1-3]。每种浓度的稀释液测试均进行3次,每个培养皿中均放入10只试虫。
(3) 测试竹叶花椒、草木犀、小窃衣、刻叶紫堇和齿果酸模提取物对小菜蛾的毒杀作用。采用小叶碟添加法。将这5种植物提取物,分别用清水稀释,各配成5个梯次浓度(10、5、2.5、1.25、0.625 gmL)的稀释液。设清水对照。分别测试5种植物粗提物对小菜蛾3龄幼虫的毒杀活性。采集新鲜的甘蓝叶片,剪成小叶(1cm×1cm),放入供试植物提取液中浸渍2~3 s,取出自然晾干,放入塑料培养盒(H=7.5 cm,D=5 cm)中,接入已饥饿4 h的试虫。待处理24、48、72 h后检查结果,并计算LC50和毒力回归方程[2,4-5]。每种浓度的稀释液测试均进行3次,每个培养盒中均放入10只3龄小菜蛾。
(4) 测试水苏、草木犀、小窃衣、刻叶紫堇和齿果酸模提取物对玉米象成虫的驱避作用。将水苏提取物用清水稀释,配成6.8、3.4、1.7、0.85、0.425 gmL等5个浓度梯次的稀释液;草木犀、小窃衣、刻叶紫堇、齿果酸模等4种植物提取物,均稀释配成1、0.5、0.25、0.125、0.0625 gmL等5个浓度梯次的稀释液。将10 g已消毒的无虫整粒小麦放入直径为 6 cm的培养皿中,按每皿0.5 mL的用量滴入不同浓度的植物提取液并用手摇匀,再将上述培养皿放入同一塑料盒中。每个塑料盒中均放入15日龄左右的玉米象成虫20只,盖好盒子,用深蓝色布遮光,让试虫在黑暗条件下自然分散。待接虫24、48、72 h后,检查成虫分布情况,然后计算驱避率[6]。每种浓度的稀释液测试均进行3次。设清水对照。
运用SPSS20.0软件,求出毒力回归方程、LC50值、相关系数(r)及95%置信区间。
水苏、竹叶花椒和草木犀3种植物粗提物,对柑橘红蜘蛛的毒力活性,室内测试72 h后的情况如表1所示。这3种植物提取物对红蜘蛛均表现出较好的毒杀活性。与竹叶花椒、草木犀相比,水苏提取物对红蜘蛛的毒杀效果更为明显。
表1 水苏等3种植物提取物对柑橘红蜘蛛的毒力测定结果
水苏、竹叶花椒、草木犀、马蹄金、卫矛和小窃衣等6种植物粗提物对蚜虫的毒力活性,室内测试 72 h的结果如表2所示。这6种植物提取物对桃蚜均表现出较好的毒杀活性。其中,小窃衣提取物对蚜虫的毒杀效果更为明显。
竹叶花椒、草木犀、小窃衣、刻叶紫堇、齿果酸模等5种植物粗提物对小菜蛾的毒力活性,室内测试72 h的结果如表3所示。竹叶花椒、小窃衣提取物对小菜蛾表现出相似的毒杀活性,齿果酸模提取物对小菜蛾的毒杀效果更为明显。
表2 小窃衣等6种植物提取物对桃蚜的毒力测定结果
表3 齿果酸模等5种植物提取物对小菜蛾的毒力测定结果
水苏、竹叶花椒、草木犀、马蹄金、卫矛、小窃衣等6种植物粗提物对玉米象成虫的驱避作用,室内测试的结果如表4所示。这6种植物提取物对玉米象成虫均表现出较好的驱避活性。其中,卫矛提取物对玉米象成虫有明显的驱避作用。
表4 卫矛等6种植物提取物对玉米象的毒力测定结果
注:栖息虫数为3次重复的总栖息数。
随着生活水平的提高,人们对农产品的质量和安全性要求越来越严格,对农药的安全使用非常重视。与化学农药相比,植物性农药对环境友好、安全性较高,具有更广阔的开发前景。本次通过室内实验,测试了采自安徽省西南地区的8种植物的粗提物的杀虫活性。实验结果表明,草木犀、竹叶花椒、水苏、马蹄金、卫矛、小窃衣、刻叶紫堇和齿果酸模的粗提物都具有一定的杀虫作用。比较而言,水苏提取物对红蜘蛛的毒杀效果较好,小窃衣提取物对蚜虫的毒杀效果较好,齿果酸模提取物对小菜蛾的毒杀效果较好,卫矛提取物对玉米象成虫有比较明显的驱避作用。