干酪乳杆菌和粪肠球菌对乳猪生长性能、免疫功能的影响

朱孟玲，陈 华，张 超，曹沛宇

（江苏农林职业技术学院，江苏句容 212400）

在过去的几十年里，抗生素被应用于动物饲料以预防疾病和提高生长性能。然而，抗生素的使用也带来了耐药性和抗生素残留等一系列问题。因此，寻找抗生素替代品成为研究热点，益生菌因安全性和环境友好性受到研究者的青睐。据报道，某些益生菌可以提高动物的营养利用率、生长性能和免疫力，抑制致病菌如大肠杆菌等的生长，促进抗炎因子的形成，降低腹泻率，保持动物健康（金尔光等，2018）。新生仔猪胃肠道微生物群不稳定，容易发生腹泻等疾病。早期使用适当的益生菌进行干预可能有助于乳猪建立稳定的肠道微生物环境，促进动物早期的免疫发育（刘虎传等，2012）。干酪乳杆菌和粪肠球菌是两种常见的有益菌，作为饲料添加剂有良好的应用效果，但其在乳猪上的研究尚不完善，因此，本试验旨在探究新生乳猪口服两种益生菌对其生长和免疫的影响。

1 材料与方法

1.1 试验材料 干酪乳杆菌和粪肠球菌购自中国微生物菌种保藏中心，在MRS培养基中于37℃静置孵育48 h，测定菌液活菌数后于4℃保存待用，菌液中活菌数为1×109CFU/ml。

1.2 试验设计 试验在某规模化养殖场进行，选取15头经产母猪（2～4胎），产仔后每窝各选取8只乳猪平均分配到4组，每组30头乳猪。对照组口服生理盐水，试验1、2组分别口服干酪乳杆菌、粪肠球菌，试验3组口服两者的混合菌液（3∶ 1），在出生后第 7、14、21天各灌喂 2、3、4 mL生理盐水或菌液。乳猪在7日龄时开始饲喂教槽料，教槽料配方及营养水平见表1。

1.3 指标测定

1.3.1 生长性能测定 称量仔猪出生时及出生后第7、21、28天体重，计算出生21 d的平均日增重（ADG21）、出生21～28 d的平均日增重（ADG21～28）。

1.3.2 免疫功能测定 每天对乳猪进行腹泻评分，计算腹泻率。仔猪28日龄时每组选取与平均体重相近的乳猪各15头，屠宰后心脏采集血液样品，静置离心后取上层血清。用ELISA试剂盒测定血清中免疫球蛋白（IgA、IgG、IgM）浓度。

表1 教槽料配方及营养水平

1.4 数据统计 试验数据用SPSS 20.0进行方差分析，Duncan’s法多重比较，GLM多因素方差分析计算交互效应。数据均以“平均值±标准误”表示，P＜0.05为差异显著。

2 结果

2.1 干酪乳杆菌和粪肠球菌对乳猪生长性能的影响 由表2可知，相比于对照组，试验1、3组21日龄体重分别增加11.5%、13.4%（P＜0.05），试验 1、2、3组 28日龄体重分 别增加 10.2%、9.2%、11.0%（P＜ 0.05），ADG（21 d）分别增加16.7%、15.8%、17.6%（P＜0.05），ADG（21～28 d）分别增加17.5%、19.3%、27.7%（P＜ 0.05）；试验2组21日龄体重较对照组有所增加，但未达显著水平（P＞0.05）。

2.2 干酪乳杆菌和粪肠球菌对乳猪免疫功能的影响 由表3可知，益生菌处理组显著提高了乳猪血清中免疫球蛋白含量。与对照组相比，试验 1、2、3组血清中IgA 浓度分别升高99.2%、77.8%、121.7%（P＜ 0.05），IgG浓度分别升高54.0%、69.9%、50.3%（P＜ 0.05）。除此之外，试验1、2、3组腹泻率较对照组分别降低58.8%、52.5%、63.9%（P ＜ 0.05），试验 1、3组腹泻率显著低于试验2组。乳猪血清中IgM浓度未受到益生菌处理的显著影响，两种益生菌间无显著交互作用（P＞ 0.05）。

3 讨论

3.1 干酪乳杆菌和粪肠球菌对乳猪生长性能的影响 仔猪消化道为微生物提供了适宜的生存环境，新生乳猪肠道微生物主要来自母猪和周围环境，益生菌对动物肠道发育、健康及生长有积极作用。其中，干酪乳杆菌是乳杆菌属的一员，能耐受机体唾液中的酶、胃液中低pH、小肠的胆汁酸等防御机制，从而在肠道中存活率较大（曹瑞博等，2009）。粪肠球菌作为另外一种益生菌对环境也有较强适应能力及抵抗力，并且能耐受多种抗生素（鲍延娥等，2013）。干酪乳杆菌和粪肠球菌均被列入我国饲料添加剂目录，研究发现，两者均能促进肠道发育，增强机体抗氧化能力，提高动物生长性能和养分消化率，对机体健康有改善作用（王四新等，2018；刘松等，2017）。口服或饲粮中添加益生菌，使其定植在乳猪或断奶仔猪肠道中能调节肠道微生物群，从而提高机体免疫能力，减少消化疾病、改善营养消化和吸收。本研究中对新生乳猪分别灌喂干酪乳杆菌、粪肠球菌、两者混合菌液发现，益生菌处理组21日龄和28日龄体重显著高于对照组，ADG（21 d）和ADG（21～28 d）也显著增加，生长性能显著提高。王四新等（2018）研究发现，在32日龄北京黑猪饲粮中添加干酪乳杆菌制剂仔猪ADG显著提高，料肉比降低，肠道微生物丰度显著高于对照组。白秀梅等（2017）报道，在14日龄的三元杂交乳猪饲粮中添加干酪乳杆菌处理28 d，仔猪ADG和料肉比与对照组无显著差异，但添加量为107CFU/g时，仔猪总抗氧化能力显著提高。相似的研究报道，在1日龄肉鸡饲粮中添加干酪乳杆菌肉鸡生长性能未发生显著改变，但抗氧化能力显著提高（李阳等，2016）。魏清甜等（2014）以断奶仔猪为研究对象，结果显示，饲粮中添加粪肠球菌显著改善断奶仔猪ADG和料肉比。史自涛等（2015）在断奶仔猪饲粮中添加0.02%、0.04%的粪肠球菌处理31 d，仔猪ADG、平均日采食量均显著提高，而处理21 d时无显著影响。本试验结果与目前干酪乳杆菌在畜禽上的研究结果存在差异，可能是由于处理日龄及处理周期不一致，本试验对乳猪处理的时间较早，对乳猪肠道微生物群落的建立及生长性能影响更大。以上结果表明，干酪乳杆菌、粪肠球菌及两者联合使用均能促进乳猪生长

表2 干酪乳杆菌和粪肠球菌对乳猪生长性能的影响

表3 干酪乳杆菌和粪肠球菌对乳猪免疫功能的影响

3.2 干酪乳杆菌和粪肠球菌对乳猪免疫功能的影响 免疫功能低下、腹泻是影响新生和断奶仔猪生长的主要因素。血清免疫球蛋白包括IgA、IgG、IgM等，均由B淋巴细胞产生，是体液免疫的重要指标，同时也是体液免疫预防和抵抗感染的主要影响因素。新生动物的免疫物质主要来自于母乳，随着年龄增长和器官发育，动物自身的免疫力变得越来越重要。胃肠道提供的免疫细胞数量最多，因此，任何改变肠道状况的因素都会影响机体免疫。干酪乳杆菌和粪肠球菌能刺激机体增加黏膜表面和血清中IgA、IgG、IgM水平，粪肠球菌还可以代谢产生有机酸和细菌素，抑制大肠杆菌生长，缓解仔猪腹泻（刘欢欢等，2018；史自涛等，2015）。本研究结果显示，乳猪口服干酪乳杆菌或粪肠球菌均能显著增加血清中IgA、IgG浓度，并且能降低腹泻率。伊淑帅等（2015）在1日龄肉鸡饮水中添加干酪乳杆菌，肉鸡14日龄时胸腺指数显著高于对照组，21日龄时外周血中IgG含量显著升高。在14日龄的乳猪和1日龄肉鸡饲粮中添加干酪乳杆菌显著增强动物机体抗氧化能力，间接说明干酪乳杆可能增强机体免疫功能（白秀梅等，2017；李阳等，2016）。魏清甜等（2014）在25日龄断奶仔猪饲粮中添加粪肠球菌，血清中IgG含量显著升高，IgA含量有升高趋势，仔猪腹泻率显著下降。以上研究结果表明，干酪乳杆菌和粪肠球菌均能增强乳猪免疫功能，降低腹泻率。

4 结论

综上所述，新生乳猪口服干酪乳杆菌或粪肠球菌均能增强其免疫性能，降低腹泻率，从而促进生长，其中单独使用干酪乳杆菌，联合使用干酪乳杆菌和粪肠球菌效果最好。