贵州艳山姜的生药学研究

贵阳市食品药品检验检测中心，贵州 贵阳 550081

艳山姜Alpiniazerumbet(Pert)Burtt et.Smith为姜科山姜属植物艳山姜的药用植物，生于海拔400～650 m的林中荫处[1]，别名玉桃、草扣、大良姜、大草蔻、土砂仁[2]，是贵州省少数民族地区的传统习用药物，广泛分布于我国东南部至西南部各地。最早记载于《广州常见经济植物》，收录于《全国中草药汇编》《中华本草》和2003版《贵州省中药、民族药质量标准》中，以新鲜或者干燥成熟果实入药，具有温中燥湿、行气止痛、截疟等功效，主治心腹冷痛，胸腹胀满，消化不良，呕吐腹泻，疟疾[3]等病症。现代药理研究艳山姜具有抗炎镇痛[4]、抗氧化、抗菌、杀虫驱虫、抗动脉粥样硬化[5]、抗胃及十二指肠溃疡[6]等作用。

艳山姜与砂仁、草豆蔻及同科同属的药用植物等易于混淆，导致药材出现互用的现象。现对艳山姜的基源、药材性状、分果横切面和粉末的显微鉴别特征进行生药学研究，旨在建立艳山姜的真伪鉴别方法，并为其质量标准的修订奠定研究基础。

1 仪器与材料

1.1 材料 实验用艳山姜采集于贵州贞丰、罗甸等地，经贵州中医药大学魏升华教授鉴定为姜科植物艳山姜Alpiniazerumbet(Pert)Burtt et.Smith的干燥成熟果实。

1.2 仪器 Leica DM2500光学生物显微镜和Leica S60立体显微镜(德国Leica Microsystems)；Leica RM2245半自动轮转切片机(德国Leica Biosystems)。

1.3 试剂试药 无水乙醇、乙醇、二甲苯、番红、固绿等。

2 方法

2.1 基原鉴定 通过对采集地原植物形态进行观察、测量和拍摄记录，采集原植物标本制作成蜡叶标本，核对艳山姜在《中国植物志》和《贵州植物志》中植物形态的描述，对其进行原植物鉴定，描述其植物形态特征。

2.2 性状鉴别 使用游标卡尺测量艳山姜果实和种子的长度、直径，采用肉眼、嗅觉和Leica S60立体显微镜观察艳山姜的形状、大小、颜色、表面特征、质地、断面、气味等。

2.3 显微鉴别 采用石蜡切片法[7]研究艳山姜的显微结构。取成熟的艳山姜果皮和种子在温水中浸泡24～48 h，然后放入70%FAA固定液(70%的乙醇90 mL，冰醋酸5 mL，37%甲醛5 mL)中固定24 h，依次在不同浓度的乙醇中逐级脱水，乙醇浓度按顺序依次为70%、80%、90%、95%、100%、100%，每次1 h。脱水后先用无水乙醇-二甲苯(1∶1)浸泡1 h；再用二甲苯浸泡1 h，反复2次至种子透明。透明后的材料置于65 ℃恒温箱中浸蜡，每隔30 min加固体石蜡1次，反复3次，后置换成纯石蜡后在恒温箱中放置6 h，使石蜡充分浸入种子中。包埋后修块、切片，片厚度18 μm。切好的蜡片在展片台上展开、贴片，再置50 ℃烘箱中烘干。在二甲苯中脱蜡，乙醇复水后番红染色1h左右，60%、70%、80%、90%的乙醇逐级脱水后，入固绿溶液中染色2 min，脱水后二甲苯透明封片。采用Leica DM2500光学生物显微镜观察、拍照记录艳山姜的果皮、种皮、胚、胚乳等显微结构，图片均用Leica LAS V4.3显像系统处理。

3 结果

3.1 植物形态特征 多年生常绿草本，株高1～2 m。叶片披针形，长30～60 cm，宽 5～10 cm，顶端渐尖而有一旋卷的小尖头，基部渐狭，边缘具短柔毛，两面均无毛；叶柄长1～1.5 cm；叶舌长5～10 mm，外被毛。圆锥花序呈总状花序式，下垂，长达30 cm，花序轴紫红色，被绒毛，分枝极短，在每一分枝上有花1～2(3)朵；小苞片椭圆形，长3～3.5 cm，白色，顶端粉红色，蕾时包裹住花，无毛；小花梗极短；花萼近钟形，长约2 cm，白色，顶粉红色，一侧开裂，顶端又齿裂；花冠管较花萼为短，裂片长圆形，长约3 cm，后方的1枚较大，乳白色，顶端粉红色；侧生退化雄蕊钻状，长约2 mm；唇瓣匙状宽卵形，长4～6 cm，顶端邹波状，黄色而有紫红色纹彩；雌蕊长约2.5 mm；子房被金黄色粗毛；腺体长约2.5 mm。蒴果卵圆形，直径约2 cm，被稀疏的粗毛，具显露的条纹，顶端常冠以宿萼，熟时朱红色；种子有棱角。花期：4～6月；果期；7～10月[1-8]。如图1所示。

3.2 性状特征 呈椭圆形、卵圆形或球形，两端略尖，长约2～3 cm，直径1～2 cm，表面黄棕色，略有光泽，有十数条隆起的纵棱，顶端具一突起，为花被残基，基部有的具果柄断痕。果皮质较脆，易纵向撕裂。剥去外皮，中有白色隔膜，将种子团分成3瓣，每瓣有种子4～15粒，排列疏松，易散落。种子为圆锥状多面体，长4～5 mm，直径3～4 mm，表面棕褐色，外被白色膜质假种皮，种脊为一条纵沟，一端有凹状种脐；质硬，将种子沿种脊纵剖两瓣，纵断面观呈斜心形，种皮沿种脊向内伸入部分约占整个表面积的1/2；胚乳灰白色。气香，味辛、微苦。如图2所示。

3.3 显微特征

3.3.1 果皮横切面 类“齿轮”型。外果皮为1列扁平细胞，外被角质层，可见非腺毛基部镶嵌在扁平细胞中，其下为1列类方形石细胞。中果皮宽广，其中为薄壁细胞，内含有草酸钙方晶；在每个小“齿轮”中部靠上或靠近内果皮处散有维管束。内果皮为1列扁平的薄壁细胞，易破碎。如图3所示。

3.3.2 种子横切面 呈类圆形。假种皮有时残存，为长方形或类方形薄壁细胞；种皮表皮细胞1列，类方形，壁较厚；表皮下为2～3列切向延长的薄壁细胞；色素层为数列棕色细胞，形态不一，其间散有类圆形油细胞2～3列；内种皮为1列栅状细胞，棕红色，内壁与侧壁极厚，胞腔小，内含类圆形硅质块。外胚乳细胞含淀粉粒和草酸钙方晶。内胚乳细胞含糊粉粒。如图4所示。

3.3.3 粉末特征 粉末灰棕色。果皮石细胞类圆形或不规则多角形，偶见长条形，单个或成群，直径12～38 μm，长18～72 μm，壁甚厚，胞腔狭小，孔沟明显，具层纹；可见螺纹导管；非腺毛单细胞或多细胞，基部膨大含棕色物，常断裂。种皮表皮细胞表面观呈多角形，直径约10～30 μm，壁稍厚，常与下皮细胞上下层垂直排列；下皮为1～3列薄壁细胞，略切向延长；色素层细胞皱缩，界限不清楚，含红棕色物，易碎裂成不规则色素块；油细胞散生于色素层细胞间，呈类圆形或长圆形，含黄色油状物；内种皮厚壁细胞黄棕色或红棕色，表面观多角形，直径约9～24 μm，壁厚，非木化，胞腔内含硅质块。外胚乳细胞充满淀粉粒集结成的淀粉团，常破裂，淀粉团散落在外，呈椭圆形或圆型，含细小草酸钙方晶。如图5所示。

4 讨论

通过比较研究，艳山姜有以下鉴别要点：①植物形态上：艳山姜和草豆蔻的植物形态相似，叶片均为披针形，顶端渐尖，总状花序，具小苞片，花萼钟状，唇瓣卵形，果实球形；不同点在于艳山姜花序下垂，花序轴紫红色，唇瓣顶端黄色具有紫红色纹彩，果实表面被稀疏的粗毛、有棱角。②性状鉴别上，其果皮表面黄棕色，有十数条隆起的纵棱，而砂仁中的阳春砂和绿壳砂有不明显三棱，表面棕褐色，密生刺状突起[9]；艳山姜种子团比草豆蔻连接紧密，略光滑[9]的种子团较疏松，易散落。③组织构造上，姜科药材的种子均是由种皮表皮、色素层、油细胞层、内种皮细胞以及胚乳细胞构成，不同点主要为艳山姜种子的油细胞散生于色素层细胞间，阳春砂和草果的油细胞层为单独1列油细胞[9]。④粉末显微上：艳山姜的种皮表皮细胞表面观呈多角形，而草豆蔻种皮表皮细胞表面观呈长条形[9]。⑤质量标准上，相对2003年版《贵州省中药、民族药质量标准》中艳山姜的质量标准[3]而言，增加了果皮的石细胞、螺纹导管、非腺毛和薄壁细胞的草酸钙方晶；完善了种子的种皮表皮细胞形状，大小，油细胞与色素层细胞的排列关系，内含物颜色，内种皮细胞颜色以及胚乳细胞所含淀粉团形状和草酸钙方晶等鉴别要点。