李佳琦, 孙丽侠, 肖双双, 任文静, 胡 洪, 白 晰, 戴四发
(安徽科技学院 动物科学学院,安徽 凤阳 233100)
肉鸡是热敏感畜禽,适宜的温热环境使其发挥最大生产潜能,反之,温度过高或过低都不利于其生长发育,当环境温度过低会增加动物的采食量来保持动物体温恒定,当环境温度过高则会降低动物的采食量从而来降低动物体温[1-2]。集约化、规模化养殖使肉鸡在夏季易出现整体或局部热应激,导致生长异常,免疫机能损害,生产性能降低,体重均匀度差,造成较大经济损失[3-5]。
谷氨酰胺(Gln)是动物在应激条件下需外源补充的抗应激氨基酸,具有增强机体抗氧化能力、减缓应激、防止感染、缓解疲劳、降低氧化作用、增强免疫力等多种功能。文献资料表明日粮添加Gln可提高热应激肉鸡生产性能,增强血清抗氧化能力[6]。已有不少研究表明Gln可缓解热应激对肉鸡的负面效应[2,6],但Gln如何影响热应激肉鸡血液细胞状况的报告较少。本试验以血液细胞指标为出发点,研究日粮中添加Gln对热应激肉鸡血液中红细胞、白细胞、血小板的影响,为进一步探讨相关机理奠定基础。
L-Gln(纯度大于99.0%,美国AMRESCO公司);血液细胞分析试剂盒(批号2018012101,深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司);BC-2800Vet兽用全自动细胞分析仪器(深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司)等。
常规饲养艾拔益加白羽肉鸡(AA肉鸡)至39日龄,选择体重、大小接近的肉鸡300只,平均分成5组(每组6个重复,每个重复组10只),Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组分别在日粮中添加0%、0%、0.5%、1.0%、2.0%的Gln。至42日龄时开始急性热应激试验,其中Ⅰ组为适温对照组(23±1 ℃;相对湿度:45%~50%),Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组为热应激组(34±1 ℃;相对湿度:60%~65%),处理时间为12 h和24 h。日粮按照本课题组文献进行配制[2],试验全程肉鸡均自由采食和饮水。
急性热应激12、24 h时从各重复组中各取1只试验肉鸡,翅下静脉收集血液(抗凝处理),进行白细胞(WBC)、红细胞(RBC)、血小板(PLT)数量的测定。急性热应激处理24 h后,再称量肉鸡体重和采食量,根据增重和采食量计算料重比。
应用SPSS 18.0软件,通过单因素方差分析法进行数据统计分析,邓肯法进行组间差异性比较,P<0.05表示差异显著。
由表1可知,热应激显著降低(P<0.05)肉鸡增重和采食量,降低幅度分别为11.9%和18.7;与热应激Ⅱ组相比,日粮添加Gln(Ⅳ、Ⅴ组)显著提高(P<0.05)热应激肉鸡采食量,增加幅度分别为12.5%和13.2%。
表1 日粮中添加不同浓度的Gln对急性热应激肉鸡生长性能的影响
注:各行肩标字母不同为差异显著(P<0.05),相同字母或无字母为差异不显著(P>0.05)。下同。
由表2可知,12 h时,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组白细胞数量无显著差异。24 h时,热应激显著提高(P<0.05)肉鸡血液白细胞数量,提高幅度为10.7%;与热应激Ⅱ组相比,日粮添加Gln(Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组)显著降低(P<0.05)热应激肉鸡血液白细胞数量,降低幅度分别为4.2%、5.3%和5.1%。
表2 日粮中添加不同浓度的Gln对急性热应激肉鸡血液白细胞的影响
根据表3可知,12 h时,热应激显著降低(P<0.05)肉鸡血液血小板数目,降低幅度为52.9%,热应激各组之间无显著差异。24 h时,热应激显著降低(P<0.05)肉鸡血液血小板数目,降低幅度为39.1%;热应激各组之间无显著差异。
表3 日粮中添加不同浓度的Gln对急性热应激肉鸡血液血小板的影响
由表4可知,12 h时,热应激显著提高(P<0.05)肉鸡血液红细胞数目,提高幅度为20.6%;与热应激Ⅱ组相比,日粮添加Gln(Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组)显著降低(P<0.05)热应激肉鸡血液红细胞数量,降低幅度分别为10.9%、17.5%和16.7%。24 h时,热应激显著提高(P<0.05)肉鸡血液红细胞数目,提高幅度为9.2%,热应激各组之间无显著差异。
表4 日粮中添加不同浓度的Gln对急性热应激肉鸡血液红细胞的影响
高温高湿环境是制约集约化养殖发展的主要因素之一。家禽体表没有汗腺并被覆羽毛,易在高温高湿环境下发生热应激,降低生产性能和免疫能力,严重时引起休克或死亡[7]。本研究结果表明热应激显著降低肉鸡采食量,这与Bai[6]研究结果一致。在热应激的状态下,采食量降低、呼吸加快、增强体表血流量等;而采食量的降低会导致摄入的营养不足,造成消耗机体内部贮备的营养物质来满足机体所需要的能量和物质供应,导致血液中相关指标的变化[8]。血液是动物机体重要的组成部分,主要功能有交换、运输和防御,是体内各组织器官之间以及体内组织器官与外界环境之间的桥梁;血液把营养物质运输到各组织器官,同时将代谢废物运输至排泄器官排出体外。当动物体受到外界因子影响而发生生理或病理变化时,这些变化都会通过血液指标变化反映出来。因此,血液指标被广泛用来评价动物的代谢、营养状况及对环境的适应状况,而血液中某种血细胞的含量通常与其生理功能相关[9]。
血液白细胞是肉鸡机体重要的免疫细胞,具有吞噬有害因子,产生病原抗体,增强应激和疾病时机体免疫力。在机体处于急性热应激时,通过代偿机制提高血液白细胞数来抵抗热应激的负面效应。血小板主要功能是机体发生受伤时可以快速止血。作为血液的重要组成部分红细胞,主要功能是运输O2和CO2。高温环境下,肉鸡张口呼吸粗重,幅度与频率速度急剧增加,机体水分丧失迅速,引起血液红细胞数量增加[10]。本研究结果表明,急性热应激显著提高24 h血液白细胞和红细胞数目,但显著降低其血小板数目。黄淑成等[10]研究表明,不同急性热应激可引起红细胞和白细胞数目的提高,与本研究结果基本一致。由以上结果可知,急性热应激会激发肉鸡机体抗应激系统,来抵抗应激危害。
肉鸡机体Gln分为外源性Gln(来源于日粮)和内源性Gln(来源于机体组织器官合成)。在生理常态下,内源性Gln可满足机体需要。然而,应激或者疾病状态下,内源Gln合成很难满足机体组织器官,需外源补充,提高抗应激能力[11]。已有大量研究表明,Gln可改善热应激肉鸡生长速度、采食量、血清和肠道抗氧化功能等[12]。然而,Gln对热应激肉鸡血液细胞的影响鲜见报告。Bai等[6]研究Gln对长期热应激血清生化指标的影响时发现,Gln可缓解热应激对肉鸡血液生化指标的负面效应。在本研究中,Gln可降低热应激肉鸡血液白细胞和红细胞数目,说明Gln能调整热应激肉鸡的血液细胞状况,有效改善血液功能,实现抗热应激的效果,进而改善肉鸡的生产性能。可以进一步假设,Gln对热应激肉鸡的缓解机制可能通过血细胞来发挥其抗氧化和增强免疫力功能[6],这方面值得今后深入探讨。
综上所述,急性热应激可降低肉鸡生长性能和血液血小板数目,提高血液白细胞和红细胞数目,饲料中添加Gln可有效缓解急性热应激的负面作用,具有一定的抗热应激功能。