香杞平脂咀嚼片的制备工艺优化与质量评价

陆敏，常晓婕，张文晋，刘宁，2，杨佳美，刘艳华，2，马学琴，2，杨建宏，2，余建强，2，李凤梅，2，*

（1.宁夏医科大学 药学院，宁夏 银川 750004；2.宁夏回药现代化工程技术研究中心，宁夏回医药协同创新中心，宁夏药物创新与仿制药研究重点实验室，宁夏 银川 750004）

高血脂症是一种常见而多发的代谢性疾病，是引起心脑血管疾病的重要危险因素，常见于中老年人[1]。中医学上无高血脂症的病名，认为高血脂症为本虚标实，属“血瘀”、“痰浊”范畴，临床辨证多归于肝肾亏虚、脾虚痰浊、气滞、血瘀[2]，治疗时大多采用补益肝肾、健脾益气、滋阴养血、活血化瘀、清热通便、消食化痰之药。从现代医学观点看，中药的降脂作用主要从抑制胆固醇的吸收、调节血脂代谢、促进胆固醇排泄来体现[1]。由于治疗高血脂的大多是为化学药物，虽然服用后起效快，但对身体具有损伤，而如果采用食疗的方式，虽然起效缓慢但通过长期食用，能够起到防治高血脂的作用[3]。

咀嚼片系指于口腔中咀嚼或吮服使片剂溶化后吞服，在胃肠道中发挥作用或经胃肠道吸收发挥全身作用的片剂[4]。它是一类可在口腔内嚼碎后咽下的片剂，大小一般与普通片剂相同，可根据需要制成不同形状的异形片[5]。具有口感好，服用方便，溶出迅速，吸收快，生物利用度较高等优点。研究表明，胡芦巴[6-7]茎叶及种子的水提物和醇提物均有显著的降血脂的作用。枸杞[8]可明显降低血清总胆固醇（total cholesterol，TC）、甘油三酯（triglyceride，TG）和低密度脂蛋白胆固醇（low-density lipoprotein cholesterol，LDL-C）。仙人掌[9]干粉和浸出液，可降低高脂血症小鼠血清TC、TG和LDL-C 含量，明显升高高密度脂蛋白含量。本研究使用单因素试验优化并筛选最佳处方，为了有效控制制剂质量，采用高效液相色谱法（high performance liquid chromatography，HPLC）法测定香杞平脂咀嚼片中主药胡芦巴中提取物胡芦巴碱的含量。

本研究将具有降血脂作用且具有宁夏地方特色的3种天然植物：枸杞、葫芦巴及仙人掌进行科学配伍，并通过单因素考查试验，优化制备工艺，研制成长期应用具有良好降血脂功效的健康食品—“香杞平脂咀嚼片”。本研究首次将枸杞、葫芦巴和仙人掌结合，制备香杞平脂咀嚼片，将宁夏地方特色资源优势转化为经济产业优势。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

枸杞提取物、葫芦巴提取物、仙人掌提取物、甘露醇等制剂使用辅料均为食品级别：鑫鑫食化有限公司；胡芦巴碱对照品：上海科顺生物科技有限公司；乙腈（色谱纯），其余试剂均为分析纯。

1.2 仪器与设备

YP202N 单冲压片机：上海中南医药机械有限公司；WFO-700W 送风定温干燥箱：上海爱朗仪器有限公司；岛津HPLC 仪[配有LC-20AT 泵、检测器SPD-20A、自动进样器 SIL-20A、InerSustain 色谱柱（4.6 mm×25 mm，5 μm）等]：岛津（中国）有限公司；KQ-500E 型超声波清洗器：昆山市超声仪器有限公司。AL104 电子天平：梅特勒-拖利多仪器上海有限公司。

1.3 制备工艺研究

1.3.1 制备工艺路线

香杞平脂咀嚼片制备工艺路线图，见图1。

图1 香杞平脂咀嚼片制备工艺路线图Fig.1 Preparation process diagram of xiang qi lower blood lipids chewable tablet

1.3.2 填充剂种类的筛选

试验分别选用甘露醇、α-乳糖、甘露醇：α-乳糖（质量比 1∶1）、甘露醇：α-乳糖（质量比 2∶1）为填充剂，使用14 目筛制粒，干燥，整粒，压片（机器压力为12 kg），考察片的口感、片剂外观、吸湿性和硬度为指标，筛选填充剂。

1.3.3 填充剂用量的筛选

用甘露醇做填充剂，按辅料用量分别为原料药的0.5 倍、1 倍、2 倍和 3 倍，分别使用 14 目筛制粒，干燥，整粒，压片（机器压力为12 kg），以口感、片外观和硬度为指标，筛选出最佳用量。

1.3.4 甜味剂的筛选

以甜菊糖作为甜味剂，分别按0.2%、0.4%、0.6%、0.8%、1.0%的质量进行制粒（14 目筛），干燥，整粒，压片（机器压力为12 kg），通过矫味效果确定用量。

1.3.5 酸味剂的筛选

以柠檬酸为酸味剂，分别按0.2%、0.4%、0.6%、0.8%、1.0%的质量进行制粒（14 目筛），干燥，整粒，压片（机器压力为12 kg），考察矫味效果，确定用量。

1.3.6 香精种类的筛选

香精选择为薄荷香精和橘子香精，分别按照加入质量分数为1%薄荷香精、1%桔子香精和0.5%薄荷香精加上0.5%桔子香精，分别使用14 目筛制粒，干燥，整粒，压片（机器压力为12 kg），考察矫味效果，确定种类。

1.3.7 香精用量的筛选

以薄荷香精加入质量分数为0.1%、0.3%、0.5%、0.7%、0.9%进行分别制粒（14 目筛），干燥，整粒，压片（机器压力为12 kg），考察矫味效果，确定薄荷香精用量。

1.3.8 润湿剂的筛选

分别以75%、80%、85%、90%、95%乙醇溶液进行制软材，分别使用14 目筛制粒，干燥，整粒，压片（机器压力为12 kg），通过以软材黏度、过筛情况、片外观和硬度为指标，筛选出最佳润湿剂。

1.4 胡芦巴碱的含量测定

1.4.1 色谱条件

色谱柱 InerSustain C18（4.6 mm×250 mm，5 μm）；流动相为乙腈：H3PO4溶液（10∶90，体积比）；流速为1 mL/min，检测波长：265 nm；柱温：30℃；进样量：10 μL。理论塔板数按胡芦巴碱峰计算不应低于4 000。

1.4.2 溶液的制备

对照品溶液的制备[10]：精密称取胡芦巴碱对照品0.003 3 g，加50%甲醇溶解并定容于10 mL 容量瓶，摇匀，作为贮备溶液。精密量取对照品贮备液1 mL 至5 mL 容量瓶中，加50%甲醇定容，摇匀，即得66 mg/L的对照品溶液。

供试品溶液的制备[11-12]：取香杞平脂咀嚼片20 片，精密称定，研细。取药粉约1.5 g，精密称定，置100 mL具塞锥形瓶中，加入50%的甲醇30 mL，密塞，振摇，超声处理50 min，放冷，过滤至50 mL 容量瓶中。锥形瓶用约10 mL 50%甲醇冲洗，洗液一并滤入容量瓶中。加50%甲醇定容至刻度，摇匀。溶液用0.45μm 微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液。

1.4.3 系统适用性试验

按色谱条件，分别将各溶液进样瓶放入进样盘中，设置程序，各进样 10 μL，记录色谱图[12-13]。

1.4.4 线性关系考察

精密量取对照品贮备液 0.1、0.5、1.0、1.5、2.0 mL，分别置于5 mL 量瓶中，加50%甲醇至刻度，摇匀，即得不同浓度的对照品溶液。根据1.4.1 的色谱条件下进样测定，以胡芦巴碱溶液浓度（X）（mg/L）为横坐标，峰面积（Y）为纵坐标，绘制标准曲线。

1.4.5 精密度试验

取同一对照品溶液，连续进样5 次，每次进样10 μL，按上述1.4.1 的色谱条件进行测定。

1.4.6 重复性试验

取同一批香杞平脂咀嚼片5 份，精密称定，按照“1.4.2”项下的方法制备供试品溶液，按1.4.1 下色谱条件进行测定。

1.4.7 稳定性试验

精密吸取“1.4.6”中的1号供试品，在20℃下放置0、2、4、6、8、12 h 后分别进样测定，记录峰面积。

1.4.8 加样回收率试验

取供试样品药粉6 份，各约1.5 g，精密称定，各加入浓度为0.450 mg/mL 的对照品溶液1 mL，按“1.4.2”项下方法平行制备供试品溶液，按1.4.1 的色谱条件进样，计算得回收率。

1.5 样品含量的测定

取3 批样品粉末各1.5 g，每批3 份，精密称定，测定样品中葫芦巴碱含量，结果用平均值表示。

2 结果与讨论

2.1 制备工艺

2.1.1 填充剂的确定

咀嚼片常用填充剂为蔗糖、糊精、乳糖、甘露醇等。蔗糖味甜，制出的片剂光滑，但易吸湿，且不适用于糖尿病人[13]，而糊精口感较差，故本试验分别选用甘露醇、α-乳糖、甘露醇∶α-乳糖（质量比 1∶1）、甘露醇∶α-乳糖（质量比 2∶1）为填充剂，结果见表1 与图2。

表1 不同填充剂对咀嚼片的影响Table 1 The influence of different fillers on chewable tablets

图2 药粉与不同填充剂的混合物的吸湿率Fig.2 Moisture absorption rate of mixture of materials and different fillers

表1表示甘露醇制备出的片硬度适中，更适合老人和小孩服用；图2 显示此原料的吸湿性强，在使用甘露醇作为填充剂的时候其吸湿性大大减小，所以本研究采用甘露醇作为填充剂。

2.1.2 填充剂用量的确定

以甘露醇做填充剂，以口感、片外观和硬度为指标，试验结果见表2。

表2 甘露醇用量对咀嚼片的影响Table 2 Effect of mannitol dosage on chewable tablets

综合各项指标，辅料与原料质量比为1∶1 时，口感和硬度均较适中，确定填充剂与原料药的质量比为1∶1 时效果较好。

2.1.3 甜味剂的确定

常用甜味剂包括天然的和合成的两大类。天然的甜味剂有蔗糖、单糖浆、蜂蜜、山梨醇、甘露醇、甜菊糖等；合成的甜味剂有糖精钠、阿斯巴甜和甜蜜素。本试验选择天然甜味剂-甜菊糖。它具有高甜度、低热能的特点，其甜度是蔗糖的200 倍～300 倍，热值仅为蔗糖的1/300。是一种可替代蔗糖非常理想的甜味剂，常作为保健甜味添加剂。通过矫味效果确定最终用量，结果见表3。

表3 甜味剂用量对咀嚼片口感的影响Table 3 Effect of the dosage of sweetener on the taste of chewable tablets

因为药物本身有一定的甜味，所以加入甜菊糖如果量过大，会产生甜腻感，效果不佳。将甜菊糖用量调至0.1%后，甜味适度，掩盖苦味能力最佳，矫味效果好。

2.1.4 酸味剂的确定

柠檬酸是最为常用的酸味剂，且安全可靠易于获得，本研究采用柠檬酸作为酸味剂，通过矫味情况确定最终用量。柠檬酸用量为0.2%时酸味不够，0.4%时酸味一般。将柠檬酸用量调至0.3%时，酸度合适，与甜菊糖混合效果最佳，结果见表4。

表4 酸味剂用量对咀嚼片口感的影响Table 4 Effect of the dosage of sour agent on the taste of chewable tablets

2.1.5 香精的确定

采用橘子香精和薄荷香精中的一种或复配进行掩味，通过矫味情况确定最终用量，结果见表5、表6。

表5 不同香精对咀嚼片口感的影响Table 5 Effects of different flavors on the taste of chewable tablets

表6 薄荷香精用量对咀嚼片口感的影响Table 6 Effect of the amount of mint flavor on the taste of chewable tablets

综上所述，在使用薄荷香精用量在0.3%的时候掩味效果是最佳。

2.1.6 润湿剂的选择

由于原料药吸湿情况严重，如果使用纯水会使制粒困难，难以过筛，最终根据软材黏度，过筛情况和片的外观和硬度确定最终使用85%乙醇进行制粒，得到的颗粒较好，结果见表7。

2.2 葫芦巴含量测定

2.2.1 高效液相系统适应性

对照品与供试品的高效液相色谱图见图3。

如图3所示供试品和对照品色谱图相应的位置上，有相同的的胡芦巴碱峰。

表7 乙醇润湿剂对咀嚼片制粒情况的影响Table 7 Effect of ethanol wetting agent on granulation of chewable tablets

2.2.2 方法学考察

葫芦巴碱线性关系曲线图见图4。

由图4可知，胡芦巴碱的检测浓度在6.6 mg/L～132 mg/L 时与峰面积值呈良好线性关系，y=13 380x-2 123（R2=0.999 9）。并根据1.4.1 操作得到精密度的相对标准偏差（relative standard deviation，RSD）为0.22%；重复性的RSD 为2.00%；在12 h 内的RSD 为1.40%；得到6 份样品的平均加样回收率为95.38 %，RSD 为1.13%，表明该高效液相仪器精密度良好，此方法重复性较好，且供试品溶液在12 h 内稳定。

图3 对照品、供试品的高效液相色谱图Fig.3 HPLC chromatogram of reference，test and negative control

图4 葫芦巴碱线性关系曲线图Fig.4 The linear relationship graph of Trigonelline

2.2.3 样品含量测定

根据操作“1.5”得到3个批次样品的平均含量为0.25 mg/g，RSD 值为 0.80%。

3 结论

研究通过制备工艺研究最终制备工艺为：枸杞、仙人掌和葫芦巴3种提取物质量分数共占49.15%，甘露醇49.15%，甜菊糖0.1%，柠檬酸0.3%，薄荷香精0.3%，将以上物质混合均匀，使用85%乙醇进行制软材，过14 目筛制粒，50℃烘箱干燥 2 h，整粒，加入整粒后占颗粒质量1%硬脂酸镁混匀，10 mm 冲头压片（机器压力为12 kg）得到香杞平脂咀嚼片。随着人们对健康的重视，人们也意识到食疗能够起到促进健康长寿，防治疾病的作用[3]。近年来，人民生活水平的提高，饮食不规范导致血脂异常，而市面上有关于调节血脂平衡的药物多数是化学合成药物，具有较强的不良反应和副作用，且无法长期食用，治标不治本，因此通过开发香杞平脂咀嚼片，不仅能够为防治高血脂的人们提供多种产品选择，还能将宁夏的本土资源进行利用转化，将资源利用。前期通过动物实验研究[14]，证明香杞平脂咀嚼片具有降血脂的功效，同时对肝脏具有保护作用。此研究对香杞平脂咀嚼片进行质量研究，结果表明该咀嚼片质量可控，葫芦巴碱含量为0.25 mg/g。证明此工艺得到的香杞平脂咀嚼片符合咀嚼片的制备要求，安全可靠，有较好的外观，口感清爽，质量可控，且具有一定的降血脂和保肝的功效，为今后进一步实验和产品深入开发提供基础。