注射用前列地尔不同水分测定方法的对比研究

陈青连 雷小平 冯雅

摘 要 目的 ： 建立以甲酰胺-甲醇（1∶1）为溶剂的费休法测定注射用前列地尔的水分。方法：以甲醇和甲酰胺-甲醇（1∶1）混合溶液为溶剂，分别采用直接加样法和溶解转移法比较方法的合理性。结果：以甲酰胺-甲醇（1∶1）为溶剂，溶解转移法测得的样品水分为1.3%，RSD为10.0%；日间精密度良好，RSD为4.8%。 结论：本法用于注射用前列地尔的水分测定具有较好的准确性和精密度。

关键词 注射用前列地尔 费休法 水分测定

中图分类号：R972.4； R927.1 文献标志码：A 文章编号：1006-1533（2019）07-0071-03

Comparison of different methods for the moisture determination in prostaglandil for injection

CHEN Qinglian*， LEI Xiaoping， FENG Ya

（ Hangzhou Ausia Biological Technology Co.， Ltd.， Hangzhou 310018， China）

ABSTRACT Objective： To establish a Fischers method for the moisture determination in alprostadil for injection with formamide-methanol （1：1） as a solvent. Methods： The rationality of the method was compared between direct sample-adding method and dissolution transfer method. Results： Moisture content in the sample was 1.3% with RSD 10% by dissolution transfer method and its inter-day precision was good with RSD 4.8%. Conclusion： This method for the moisture determination in alprostadil for injection has good accuracy and precision.

KEY WORDS alprostadil injection； Fischers method； moisture determination

前列地爾（alprostadil）是一种疗效确切的高生物活性血管扩张药，属于天然前列腺素（PGE1）类[1]，主要用于老年心血管疾病的治疗，对冠心病、动脉硬化、心肌梗死等疾病有一定的治疗作用[2]。

费休法是利用碘在吡啶和甲醇溶液中氧化二氧化硫时需要定量水分参加反应的原理测定样品中的水分含量，适用于在费休试液中溶解且不与费休试液发生生成水的化学反应的药物及制剂的水分测定。注射用前列地尔质量标准已收载于《中国药典》2015年版二部[3]，其水分测定法为第一法费休法下的容量滴定法[3]103-105。

测定样品中的水分时，样品必须完全溶解在卡尔·费休试剂中。如果样品未完全溶解，会形成乳浊液，导致部分水分无法进行滴定反应，测得的水分含量偏低[4]。

由于注射用前列地尔冻干粉针剂中添加赋形剂右旋糖酐40，不溶于甲醇、乙醇、乙醚、丙酮等[3]170，故选择一定比例的甲酰胺-甲醇作为助溶剂进行水分测定[5]。

小规格冻干针剂水分测定一直以来是检验人员难以处理的问题，主要原因在于取样难，由于每瓶装量仅为几毫克，传统方法均需取样数瓶至数十瓶，在取样过程中无法防止样品急剧吸潮。同一样品在不同实验室不同人员进行测定时数值相差很大。当规格小加之冻干真空压塞，取样更难，在破真空时由于大量空气进入瓶内，样品易吸潮并黏结于瓶壁，从而需要进一步增加取样瓶数和取样时间。这样所测得的样品水分完全失真[6]。注射用前列地尔规格为100 mg，测定时平均装量约为20 mg，存在装量较小，且极易吸潮，采用直接加样法测定水分难以得到准确的结果，故考虑溶解转移法进行测定。

本研究选择分别以甲醇和甲酰胺-甲醇（1∶1）为溶剂，分别采用直接加样法和溶解转移法测定水分。该方法测定注射用前列地尔水分未见报道，通过分析两种方法测定结果的分析比较，为该品种建立更准确的水分测定方法提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 仪器

V30水分滴定仪（梅特勒-托利多仪器（上海）有限公司），BS210S电子天平（赛多利斯（上海）贸易有限公司）。

1.1.2 试药

注射用前列地尔（杭州澳亚生物技术有限公司自制，批号17012023，规格：100 mg）；费休试液（天津市四友精细化学品有限公司）；无水甲醇、甲酰胺（分析纯，上海凌峰化学试剂有限公司）。

1.2 方法

1.2.1 直接加样法

取注射用前列地尔5瓶，去除铝盖后，将其捣碎，采用减量法，精密称定其重量，倒入滴定杯中，分别以甲醇和甲酰胺-甲醇（1∶1）混合溶液为溶剂，用费休试液滴定至终点，各重复测定10次。

1.2.2 溶解转移法

2 结果

2.1 甲酰胺-甲醇比例选择

取注射用前列地尔1瓶，按1∶9、2∶8、3∶7、4∶6、5∶5、6∶4、7∶3、8∶2和9∶1比例，用移液管分别加入甲酰胺、甲醇试剂，摇匀，观察溶液是否澄清。结果表明，当甲酰胺-甲醇的比例达到5∶5及以上时，溶液为澄清，故选择甲酰胺-甲醇1∶1为溶剂进行下一步试验。

2.2 样品水分测定

直接加样法和溶解转移法水分测定数据见表1。

分别对直接加样法和溶解转移法溶解转移法、甲醇溶剂法和甲酰胺-甲醇（1∶1）溶剂法的水分数据采用Minitab软件进行了双样本t值检验分析[7-8]（表2）。采用直接加样法，用甲醇和甲酰胺-甲醇（1∶1）两种溶剂测定的水分差值为0.365 9%，t值为-3.24，显著性P值为0.005；采用溶解转移法，用甲醇和甲酰胺-甲醇（1∶1）两种溶剂测定的水分差值为0.234 2%，t值为-4.26，显著性P值为0.001。以甲醇为溶剂，采用直接加样法和溶解转移法测定的水分差值为0.483 1%，t值为6.47，显著性P值为0.000；以甲酰胺-甲醇（1∶1）为溶剂，采用直接加样法和溶解转移法测定的水分差值为0.614 8%，t值为6.08，显著性P值为0.000（表2）。使用相同加样方法、采用不同溶剂检验或使用相同溶剂、采用不同加样方法，其两组检测结果显著性P值均小于0.01，说明使用不同溶剂检测或不同加样方法，测定结果之间均有显著性差异。

2.3 数据分析

通过上述数据可知，甲醇溶剂法测得注射用前列地尔的水分小于甲酰胺-甲醇溶剂法，认为是样品未完全溶解，导致水分未完全释放至溶液中，无法进行滴定反应，使测得结果偏低。直接加样法测得的水分大于溶解转移法，判断样品具有引湿性，认为是去塞后，样品与空气直接接触，吸收了空气中的水分所引起的差异，且溶解转移法测定的水分差异较小。综上所述，选择以甲酰胺-甲醇（1∶1）为溶剂采用溶解转移法测定为宜。为了进一步证实该方法的合理性，考察该方法的日间精密度。

2.4 日间精密度实验

以甲酰胺-甲醇（1∶1）为溶剂，按溶解转移法，取注射用前列地尔每天5瓶测定水分，连续5 d，所测定的水分含量分别为1.338 0%、1.228 3%、1.197 3%、1.191 7%、1.228 9%，平均值为1.2%，RSD为4.8%。表明不同时间按本法测定注射用前列地尔水分含量的重复性和日间精密度良好。

3 討论

卡尔·费休容量法最常用的滴定溶剂是甲醇，而注射用前列地尔不溶于甲醇，样品未完全溶解，水分没有完全参与反应，测得的水分含量偏低，且溶液中的不溶颗粒，在搅拌过程中更易对仪器电极带来磨损，故选择甲酰胺为助溶剂，与甲醇按1∶1混合作为溶剂。注射用前列地尔存在装量较小，且极易吸潮，采用直接加样法测定水分难以得到准确的结果，故考虑溶解转移法进行测定。为确定本法的合理性，进行了日间精密度实验，结果中间精密度良好。以甲酰胺-甲醇（1∶1）为溶剂，溶解转移法测定注射用前列地尔的水分具有较好的准确性，且精密度良好，且更易于操作，利于水分测定。用卡尔·费休法测定样品中的水分时，必需注意环境的温湿度，湿度过大对检测结果影响极大，使检测结果偏大，一般温度维持在25 ℃左右，相对湿度控制在50%以下比较适宜。

参考文献

[1] 杨玲， 高家荣， 李颖， 等. 前列地尔的不良反应中文文献分析[J]. 安徽医药， 2016， 20（3）： 603-606.

[2] 赵娟. 前列地尔的药理作用临床分析[J]. 中国继续医学教育， 2016， 8（6）： 149-150.

[3] 国家药典委员会 . 中华人民共和国药典2015年版（二部）[M]. 北京 ： 中国医药科技出版社， 2015： 849.

[4] 王爱萍， 龚维， 刘新， 等. 卡尔·费休法测定水分的样品处理方法[J]. 理化检验：化学分册， 2016， 52（3）： 369-372.

[5] 秦剑波， 李浩冬， 江芳， 等. 卡尔费休容量法测定利塞膦酸钠的水分[J]. 药物鉴定， 2011， 20（10）： 32-33.

[6] 张小红， 康兰芳. 卡尔费休库伦滴定法测定注射用氨溴酸高乌甲素水分方法的探讨[J]. 今日药学， 2013， 23（12）： 811-812， 821.

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[8] 林丽. 两组独立数据差异性统计检验方法及应用的研究[D]. 上海： 上海交通大学， 2007： 1-43.