武子敬,林梦瑶,杜跃中
(1.通化师范学院,通化134002;2.吉林人参研究院,通化134001)
黄精 (Polygonati Rhizoma)为百合科植物黄精(Polygonatum sibircum Red.)、 多花黄精(Polygonatum Cyrtonema Hua)或滇黄精 (Polygonatum Kingianum Col1.et Hemsl.)的干燥根茎,收载在《中国药典》,开始载于《名医别录》[1]。按药材形状不同,分别习称为“鸡头黄精”、“姜形黄精”、“大黄精”等[2]。 黄精性平、味甘,无毒,归脾、肺、肾经,具有增强免疫功能、降血糖、降血脂、解压抗疲劳、抗炎、抗菌、抗病毒、抗肿瘤等功效[3]。主要化学成分为多糖、甾体皂苷、蒽醌类、还含有木脂素、黄酮,以及对人体有利的丝氨酸、甘氨酸等10多种氨基酸[4]。为了进一步了解黄精的药理作用,本文选用健康的小鼠作为实验对象,考察黄精的耐缺氧作用。
昆明种健康小鼠100只,体重20±2g,雌雄各半,实验动物由长春高新医学动物实验研究中心提供。
黄精提取液:取黄精100g,加水浸泡12h,倒入锅中加水煎煮3次,每次煎煮1h,过滤,合并3次滤液,浓缩至100mL,得到浓度为1g·mL-1的黄精提取液,冷却备用[5]。
小鼠灌胃器;注射器;电子天平(上海箐海仪器有限公司,型号FA1104N);250mL广口瓶;钠石灰、亚硝酸钠、凡士林等均为分析纯。
将小鼠随机分为5组,每组10只,分别设黄精提取物高剂量组、黄精提取物中剂量组、黄精提取物低剂量组、空白对照组(灌胃生理盐水)和盐酸氯丙嗪为阳性对照组,黄精高、中、低剂量组分别按15g·kg-1·d-1、10g·kg-1·d-1、5g·kg-1·d-1给药[6], 各组均连续给药 7天,灌胃量为 0.1mL·10g-1。
按照上述分组及给药7d后的小鼠50只,于末次给药1h后,将各组的每只小鼠同时分别放入的250mL磨口瓶内(每瓶1只),每个瓶中放入10g钠石灰,主要起到干燥剂和吸收二氧化碳的作用,在瓶口处均匀涂上凡士林作密封[7]。从小鼠放入瓶中密封开始计时,记录小鼠在磨口瓶中存活的时间,实验结果记录整理见表1。
按照上述分组及给药7d后的小鼠50只,于末次给药1h后将各组小鼠按240mg·kg-1剂量,逐只腹腔注射亚硝酸钠,注射剂量为0.1mL·10g-1,注射后立即用秒表记录,观察小鼠存活时间,以呼吸停止为指标[8]。实验结果记录整理见表2。
表1 黄精对小鼠常温常压耐缺氧实验的影响(±s)
表1 黄精对小鼠常温常压耐缺氧实验的影响(±s)
注:*与空白对照组相比差异显著(P﹠0.05),**与空白对照组相比差异极显著(P﹠0.01)。
组别 鼠数/只 给药浓度 存活时间/min空白对照组 10 - 31.75±3.21黄精提取物低剂量组 10 5g·kg-1 35.78±6.54*黄精提取物中剂量组 10 10g·kg-1 66.64±11.04*黄精提取物高剂量组 10 15g·kg-1 88.58±10.56**盐酸氯丙嗪阳性对照组 10 10mg·kg-1 93.87±10.03
不同剂量的黄精提取物能够延长小鼠在密闭缺氧条件下的存活时间,且随剂量的增加小鼠存活时间增加。黄精提取物低剂量组与空白对照组没有明显的提高小鼠的存活时间;黄精提取物中剂量组与黄精提取物高剂量组明显的提高了小鼠的存活时间,其中黄精提取物高剂量组与空白对照组差异最为明显,且与盐酸氯丙嗪组阳性对照组最为接近 (数据见表1),通过实验数据表明黄精提取物对小鼠有增强耐缺氧能力的作用。
三种不同浓度剂量的黄精提取物均能不同程度的延长小鼠对亚硝酸钠中毒存活时间。黄精提取物低剂量与空白对照组相比较没有明显差异;黄精提取物中剂量组与黄精提取物高剂量组明显提高了小鼠的存活时间,其中黄精提取物高剂量组与空白对照组比较,有显著性差异,且与盐酸氯丙嗪组阳性对照组数据最为接近(数据见表2),通过实验数据说明黄精具有增强小鼠耐缺氧能力的作用。
表2 黄精对小鼠亚硝酸钠中毒耐缺氧实验的影响(±s)
表2 黄精对小鼠亚硝酸钠中毒耐缺氧实验的影响(±s)
注:*与空白对照组相比差异显著(P﹠0.05),**与空白对照组相比差异极显著(P﹠0.01)。
组别 鼠数/只 给药浓度 存活时间/(min)空白对照组 10 - 18.53±2.62黄精提取物低剂量组 10 5g·kg-1 20.29±3.08*黄精提取物中剂量组 10 10g·kg-1 28.94±4.76*黄精提取物高剂量组 10 15g·kg-1 37.55±5.12**盐酸氯丙嗪阳性对照组 10 10mg·kg-1 43.45±4.47
通过实验研究发现黄精提取物的中、高剂量组在提高小鼠的耐缺氧能力上与空白组有明显差异,说明黄精可提高机体的耐缺氧能力。
常温常压耐缺氧实验模型是会使小鼠在密闭广口瓶中,随着不断呼吸,广口瓶中的氧气会越来越少,而二氧化碳则由于钠石灰的吸收而不会明显增加,则使小鼠因外环境供氧减少而发生了乏氧性缺氧,表现为竖毛、转圈、后肢向外后方伸直、抽搐等,最后因严重缺氧而死亡[9]。黄精提取物高、中剂量组较空白对照组均能够延长小鼠的存活时间,其中黄精提取物高剂量组效果最为明显。
亚硝酸钠中毒存活实验模型是在给小鼠注射亚硝酸钠后,可以使小鼠体内的血红蛋白中二价铁转变为三价铁血红蛋白,使血红蛋白丧失携氧能力,导致没有办法将足够的氧输送到身体各部,造成机体缺氧中毒,最后致使小鼠死亡[10]。黄精提取物高、中、低剂量组均有不同程度的提高小鼠的存活时间,其中黄精提取物高剂量组可以明显的延长小鼠的存活时间。
缺氧是一种劣性刺激,可使组织细胞得不到所需的氧,进而影响机体的供氧功能,最终会导致机体心、脑等重要器官损伤,严重时会发生机体供氧不足而死亡[11]。缺氧是一种紧张性的刺激,可能会引起机体的各种应激性反应[12]。轻度缺氧时,主要引起机体代偿性反应,比如表现为呼吸加深加快,心跳加速,心输出量增加,血液重新分配,以保证重要器官的血液供应;而严重缺氧时,机体出现代谢机能障碍,甚至会导致机体死亡;急性缺氧时,机体来不及完成代偿反应[13],各种缺氧情况都会造成机体器官不同程度的损伤。目前,缺氧是造成细胞损伤的最常见原因,可以诱发体内各系统的功能改变,是引起临床各科多种疾病甚至死亡的最重要和最常见的因素之一[14],因此提高机体的耐缺氧能力,是一件非常值得研究的工作。黄精具有降血糖、增强免疫功能等的作用,本论文只在耐缺氧方面做了实验研究,其具体机理还有待于进一步探讨与研究。