绝经后女性高血压患者性激素结合球蛋白、性激素与LP-PLA2、A-FABP相关性研究

渠莉，韦涌涛，曹庆博，刘享亨

流行病学研究表明，男性和女性在原发性高血压患病率方面存在差异，而女性绝经后这种差异趋向平衡，提示性激素可能与高血压的发生和发展有关。有学者提出高血压也是一种低度的炎性疾病[1]，高血压与炎性因子之间互为因果，在炎症因子的刺激下引发动脉硬化。Marcello等[2]研究发现绝经后女性雌二醇（E2）与C反应蛋白（CRP）呈正相关，与性激素结合球蛋白（SHBG）水平呈负相关，但Bledar等[3,4]发现高血压与SHBG的关联独立于肥胖、胰岛素抵抗等代谢综合征和炎症因子CRP，高血压、炎症与性激素的相关机制目前尚为明确。近年来研究发现炎症因子脂蛋白相关磷脂酶A2（Lp-PLA2）和脂肪细胞性脂肪酸结合蛋白（A-FABP）活性水平均存在性别差异，这种差异是受到性别本身影响，还是受到主要危险因素差异的影响目前尚无定论，性激素是否与Lp-PLA2和A-FABP之间具有一定相关性，目前较少有研究。本研究通过对绝经后女性高血压患者血清炎症标志物Lp-PLA2、A-FABP水平与SHBG、总睾酮和E2的相关性研究，探讨性激素结合球蛋白、性激素与炎症标志物之间的关系。

1 资料与方法

1.1 研究对象与分组连续入选2014年8月至2015年10月于青岛市第八人民医院门诊就诊及住院的老年原发性女性高血压患者235例（绝经均≥5年），年龄54～76（65.35±7.43）岁。高血压诊断标准按《中国高血压防治指南2010》[5]：在未服用抗高血压药的情况下，收缩压≥140 mmHg和（或）舒张压≥90 mmHg（1 mmHg=0.133kPa）；既往有高血压病史，目前正在使用降压药，血压虽然未达到上述水平，亦可诊断为高血压。排除标准：继发性高血压、冠状动脉粥样硬化性心脏病（冠心病）、心功能不全、肝、肾功能不全、脑血管意外、外周血管疾病、内分泌疾病（如糖尿病等疾病）及生殖系统等疾病。排除急慢性感染、肿瘤、近期手术或创伤、结缔组织病及影响炎性因子水平的因素。所有入选者均知情同意，且本研究得到我院伦理委员会批准。

1.2 方法

1.2.1 一般临床资料收集一般检查询问病史，并于受试当日清晨测定身高、体重，计算体质指数（IBM）：体重（kg）/身高（m）2。血压测量采用标准汞柱式坐位测量法：休息15 min后，用标准汞柱式血压计测坐位右上臂血压3次，取其均值为血压值并记录。人体测量学：测量腰围时被研究者站立，两脚稍分开约25 cm，选择髂前上棘与第12肋下缘连线的中点水平位进行测量。臀围：测量时前经耻骨联合，后经两侧臀部最高点的最长径线。腰臀比（WHR）=腰围（cm）/臀围（cm）。

1.2.2 标本采集和实验室检查所有受试者均在禁食12h后于清晨采空腹静脉血使用测量仪OLYMPUS AU2700自动生物化学分析仪检测空腹血糖（FPG）、总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）。另取静脉血5 ml，置于抗凝管中，摇匀，3000 r/min离心15 min，收集上层血清，分装EP管后冻存于-20℃冰箱内；采用化学发光免疫法测定空腹胰岛素（RI）、雌二醇（E2）、总睾酮（T）；采用胶乳增强的免疫比浊法测定高敏C-反应蛋白（hs-CRP）；采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测脂蛋白相关磷脂酶A2（Lp-PLA2）、脂肪细胞性脂肪酸结合蛋白（A-FABP）、性激素结合球蛋白水平（SHBG）。ELISA检测试剂盒均购自美国R＆D公司，批内变异＜8%，操作严格按试剂盒说明书进行。

1.3 统计学处理所有数据均采用SPSS 19.0统计学软件分析。计量资料均符合正态分布，采用均数±标准差（x±s）表示。SHBG、E2、T为连续性变量，且符合正态分布，对这三个指标进行预测时，采用层次回归分析模型，以SHBG、E2、T分别作为因变量，预测变量作为自变量，先后以年龄、BMI、WHR、TG、TC、HDL、LDL、RI、SBP、 DBP 、Lp-PLA2、A-FABP为控制变量建立模型。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 一般资料分析已验证年龄、BMI、WHR、SBP、 DBP 、TG、TC、HDL、LDL、RI、Lp-PLA2、A-FABP、E2、T、SHBG均符合正态分布（表1）。

表1 CHD与对照组基本资料及生化指标比较[（x±s），n（%）]

表2 CHD与对照组在血小板参数和血清IL-6水平上的比较（x±s）

2.2 炎症标志物对SHBG的影响在控制年龄、BMI、WHR、TG、TC、HDL、LDL、RI、SBP、DBP、hs-CRP对SHBG的影响后，Lp-PLA2与SHBG成负相关（-0.262±0.126，P=0.040），且具有统计学意义，A-FABP（-0.012±0.040，P=0.766）和SHBG没有相关性（表2）。

2.3 炎症标志物对E2的影响在控制年龄、BMI、WHR、TG、TC、HDL、LDL、RI、SBP、 DBP、hs-CRP对E2的影响后，Lp-PLA2（-0.013±0.053，P=0.806）、A-FABP（-0.006±0.017，P=0.734）和E2均没有显著相关性，结果无统计学意义（表3）。

2.4 炎症标志物对T的影响在控制年龄、BMI、WHR、TG、TC、HDL、LDL、RI、SBP、 DBP、hs-CR对T的影响后，Lp-PLA2（-0.063±0.130，P=0.630）、A-FABP（-0.010±0.041，P=0.812）与T均没有显著相关性，结果无统计学意义（表4）。

表1 基础资料分析（n=235）

表2 炎症标志物对SHBG的影响

表3 炎症标志物对E2的影响

表4 炎症标志物对T的影响

3 讨论

炎症在动脉硬化性疾病的发生、发展中的作用已得到广泛认可。近年来有研究认为高血压也是一种低度的炎性疾病[6]，老年人低度炎症状态与老化发生的激素环境相关[7]，绝经后妇女性激素和促炎状态之间可能存在关系[8]。这些研究大多针对雌激素[9]，认为雌激素对冠心病的发生发展有保护作用，但临床试验结果显示，激素替代治疗并不会降低绝经后女性冠心病的风险[10]。另一些研究结果则更倾向于雄激素和性激素结合球蛋白（SHBG）与绝经后妇女的不良心血管危险因素相关[11,12]。Bledar等[3,4]研究发现高血压与SHBG的关联独立于肥胖、胰岛素抵抗等代谢综合征和炎症因子CRP，CRP不是独立相关纽带，还有其它机制和因素作用于高血压、炎症与性激素之间的关联，因此寻找能够反映与性激素相关的炎症循环标志物对于绝经过后女性心血管疾病的防治具有重要意义。近年来一些研究发现，新型炎症标志物血清脂蛋白相关磷脂酶A2（Lp-PLA2）、脂肪细胞性脂肪酸结合蛋白（A-FABP）与高血压密切相关，其水平升高会增加心血管事件发生风险，但流行病学研究在男、女性人群中所获得的结果却存在差异[13,14]，本研究选取这两种炎症指标进行研究，进一步探讨高血压、炎症与性激素之间的关联。

脂蛋白相关磷脂酶A2 （Lp-PLA2）是一种新型炎性反应标志物，由巨噬细胞等炎症细胞分泌生成，受炎性介质调节，由PLA2G7基因编码。Yoshihiro等[15]研究发现，包括PLA2G7基因在内的11种基因多态性与高血压有关。鉴于近年来国内外多项研究显示男性Lp-PLA2活性水平高于女性[13,16]，Lp-PLA2在预测无症状男女两性心血管事件的结论亦不相同[17,18]，这种差异是由于性别本身（如性激素水平）所致，还是由于受到其他因素在男女两性中分布特征不同的影响尚无定论。本研究选取绝经后老年女性高血压患者作为研究对象，探讨Lp-PLA与绝经后女性高血压患者性激素结合球蛋白、总睾酮和雌二醇（E2）的关系。在控制年龄、BMI、WHR、TG、TC、HDL、LDL、RI、SBP、 DBP的影响后发现，Lp-PLA2与SHBG成负相关（-0.262±0.126，P=0.040），有统计学意义；E2和T 与Lp-PLA2未发现有相关性。Lp-PLA2与SHBG成负相关可能基于以下机制：Lp-PLA2 通过水解ox-LDL产生具有促炎、促动脉硬化的介质oxFFA和Lyso-PC[19]，Lyso-PC 和oxFFA能够促使巨噬细胞表达白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）等促炎介质，从而激活该区域的炎症反应；SHBG主要由肝细胞合成，而肝细胞核转录因子-4a（HNF-4a）是调节SHBG启动子的转录因子，IL-6可以减少αHNF-4结合活性，肿瘤坏死因子α（TNF-α）通过激活NF-κB使肝脏产生HNF-4α减少在SHBG产生下调中发挥作用[20]，从而影响SHBG的转录活性与合成，可能是慢性炎症性疾病如高血压病人出现低水平SHBG[21]的原因。

近年来研究表明，血清脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白（A-FABP）水平与多种代谢及炎症相关性疾病密切相关，A-FABP能够促进血压的升高并加速高血压患者动脉粥样硬化的进程[22]，A-FABP水平可以影响颈动脉斑块的稳定性[23]。多项研究结果显示，A-FABP存在性别差异，女性血浆A-FABP水平要明显高于男性，A-FABP的表达可能受性激素的调节，但在年龄超过55岁的女性中A-FABP的这种性别差异仍然持续存在，提示雌激素对于调节A-FABP的表达作用不大，有人认为由于女性体内有更多脂肪组织[24]，也有人认为雄激素在男性体内对A-FABP起负向调节作用，而在女性则起到正向调节作用[14]。性激素和性激素结合球蛋白对A-FABP的表达或分泌是否有影响，仍需进一步的研究证实。本研究选取绝经后老年女性高血压患者，在控制年龄、BMI、WHR、TG、TC、HDL、LDL、RI、SBP、 DBP和CRP的影响后发现，A-FABP与SHB（-0.012±0.040，P=0.766）、E2（-0.006±0.017，P=0.734）、T（-0.010±0.041，P=0.812）均未显示出明显相关性，结果没有统计学意义，提示绝经后女性高血压患者性激素结合球蛋白及性激素对A-FABP的表达没有影响。我们的研究结果未能提示性激素结合球蛋白与A-FABP炎症指标相关,不排除与样本量大小有关,在大样本量下可能会有不同结论。

性激素结合球蛋白和性激素与高血压及动脉硬化炎症的作用机制复杂，其机制的进一步探讨可以为临床高血压、动脉硬化的防治提供新思路。