FSTL1和Fas蛋白在亚临床甲状腺功能减退稽留流产中的表达及意义

王 菲

［作者单位］450000河南郑州，河南中医药大学第三附属医院（王菲）

亚临床甲状腺功能减退 （subclinical hypothyroidism，SCH）是指机体促甲状腺素升高，而游离甲状腺素正常的一种甲状腺疾病。孕龄期女性发生SCH风险较高，0.25%~2.50%妇女妊娠期可并发SCH，绝大多数SCH患者未见明显的临床症状和体征，导致病情往往被忽视、延误。张立岩等调查发现SCH患者中5%~8%可进展为甲状腺功能减退，病情进展可严重影响胎儿宫内生长发育，甚至引起死胎、死产或围生期死亡，直接造成自发性流产、早产、胎盘早剥等不良妊娠结局［1］。稽留流产是指死亡胎儿未能及时排出仍滞留于宫内，SCH稽留流产致病机制目前尚未完全明确，部分国内外专家认为可能与卵泡抑素样蛋白1（FSTL1）或Fas蛋白等细胞凋亡相关基因的表达有关［2，3］。该研究通过观察SCH稽留流产患者绒毛蜕膜组织中FSTL1、Fas蛋白的表达，旨在分析FSTL1、Fas蛋白在SCH稽留流产疾病形成过程中发挥的作用，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2016年4月—2018年4月来笔者所在医院治疗确诊为SCH稽留流产的患者45例。纳入标准：经超声检查证实为稽留流产，实验室检查提示血清促甲状腺激素 （TSH）＞3.0 μIU/ml，血清游离甲状腺素（FT4）正常；排除因遗传、感染等因素引起的稽留流产；孕前甲状腺功能正常，无其他自身免疫障碍类疾病病史；均自愿配合该研究并签署知情同意书者。将SCH稽留流产患者设为观察组，年龄 24~35 岁，平均（28.86±3.10）岁；孕期 7~11周，平均（9.25±1.41）周；孕次 2~5 次，平均（2.98±0.65）次；流产次数 0~4 次，平均（2.23±0.75）次；产次0~3次，平均（1.31±0.48）次。另选取同期自愿要求终止妊娠的健康早孕妇女35例作为对照组，年龄23~36 岁，平均（28.59±3.23）岁；孕期 7~11 周，平均（9.07±1.55）周；孕次 2~5 次，平均（2.81±0.73）次；流产次数 0~4 次，平均（2.30±0.81）次；产次 0~3 次，平均（1.28±0.46）次。两组患者基本资料经比较无统计学差异（P＞0.05），具有可比性。

1.2 检查方法 两组患者均于吸宫术前采集肘静脉血4 ml，3000 r/min离心 15 min后取上清液置于－20℃冰箱内保存，采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测血清FSTL1、Fas蛋白水平；术后留取妊娠组织，在无菌环境下分别取出绒毛组织及蜕膜组织制成悬液，离心取单细胞悬液置于10%中性甲醛溶液中固定8~24 h，常规低温石蜡包埋，置－20℃冰箱内保存，切片机连续切片后进行脱蜡、免疫组织化学染色。

1.3 结果判定 镜检可见棕黄色颗粒为阳性，采用双盲法进行读片，随机选取5个高倍视野，阳性细胞比例＜10%为阴性（－），比例为10%~25%为弱阳性（+），比例为 26%~50%为阳性（++），比例＞50%为强阳性（+++）。

1.4 统计学方法 采用SPSS 20.0统计学软件进行数据分析，等级资料采用秩和检验，计量资料经统计均符合正态分布，以（x±s）表示，组间比较采用独立样本t检验。P＜0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 两组孕妇血清FSTL1、Fas蛋白水平比较 观察组血清FSTL1、Fas蛋白水平明显高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05），见表 1。

表1 两组孕妇血清 FSTL1、Fas蛋白比较（x±s，μg/L）

2.2 两组孕妇绒毛组织中FSTL1、Fas蛋白表达比较 观察组孕妇绒毛组织中FSTL1、Fas蛋白表达水平明显高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表2。

表2 两组孕妇绒毛组织中FSTL1、Fas蛋白表达比较（例）

2.3 两组孕妇蜕膜组织中FSTL1、Fas蛋白表达比较 观察组孕妇蜕膜组织中FSTL1、Fas蛋白表达水平较对照组显著升高，差异有统计学意义 （P＜0.05）。 见表 3。

表3 两组孕妇蜕膜组织中FSTL1、Fas蛋白表达比较（例）

3 讨论

妊娠12周以内胎盘绒毛正处于生长高峰，胎儿或胚胎因不同原因停止发育，死亡后胎盘仍紧密固定于底蜕膜导致胎儿滞留于宫腔无法顺利排出，称为稽留流产［4］。胎儿停止生长病因复杂，遗传因素、内分泌功能紊乱、解剖结构异常等原因均可引起稽留流产。SCH可增加流产率、引起不良妊娠已成为临床共识，甲状腺功能减退可导致机体新陈代谢水平降低，造成母体与胎儿能量供应不足而严重影响胎儿生长发育，同时甲状腺激素可调节下丘脑-垂体-卵巢轴功能，甲减患者卵巢轴功能失调引起子宫成熟障碍，胎盘血管增生功能下降，导致胚胎移植发育、胎盘生长及蜕膜分化过程异常［5］。甲状腺功能减退造成的妊娠妇女甲状腺激素低水平状态可抑制促甲状腺激素释放激素（TRH）分泌功能减退，打破机体激素水平平衡状态，导致黄体生成素（LH）、促卵泡激素（FSH）及孕激素等性激素分泌作用减退，卵巢调节功能及胎盘发育功能发生障碍，增加不良妊娠发生风险，严重影响妊娠妇女及胎儿生命健康。因此，探究SCH稽留流产患者致病机制，明确其影响因素并针对性制定阻断疾病进展方案，对治疗及预防SCH稽留流产具有一定临床价值。

FSTL1又称转化生长因子β1诱导蛋白 （TSC-36），属于卵泡抑素家族中的一种细胞外基质糖蛋白，含有卵泡抑素、细胞外钙离子结合结构域。FSTL1具有调控细胞增殖、分化、凋亡等生物学功能。张艳等［6］研究发现FSTL1存在于胚胎早期间充质中，可调控血管内皮细胞与心肌细胞增殖分化过程来影响胚胎时期心脏功能发育。FSTL1生物学功能复杂多样，熊锦文等［7］发现FSTL1可在人类胎盘组织绒毛外滋养层细胞中特异性表达，稽留流产患者绒毛蜕膜组织FSTL1 mRNA表达高于健康流产患者，认为FSTL1特异性结合转换生长因子相关配体，通过影响信号传导导致胚胎发育异常。

Fas蛋白属于肿瘤坏死因子受体超家族中的一种跨膜蛋白，与Fas配体（FasL）结合后可参与第二信使系统介导的信号转导，启动致死性信号转录引起细胞凋亡。刘曼等［8］研究发现Fas系统可通过参与蛋白酶介导的级联反应诱导卵泡颗粒细胞凋亡引起大鼠卵巢卵泡闭锁。孕期前3个月，正常妊娠组织可表达Fas蛋白，同时孕酮持续释放可控制正常妊娠组织凋亡过程，达到平衡状态以保证妊娠顺利进行。妊娠期母体与胎儿之间存在免疫耐受，胎儿异体抗原进入母体，激活母体特异性T细胞，导致Th1/Th2型细胞因子失衡，促进Fas高表达以调控细胞凋亡过程来抑制Th1型细胞因子胚胎毒性作用，维持机体免疫耐受功能及正常妊娠，SCH患者Fas蛋白表达异常，导致妊娠期Fas系统介导的细胞凋亡调控功能紊乱，母体与胎儿免疫耐受机制破坏发生免疫排斥，从而促进稽留流产的发生［9］。

该研究发现，SCH稽留流产孕妇绒毛蜕膜组织中FSTL1、Fas蛋白表达水平均显著高于正常流产孕妇，该结果说明FSTL1、Fas蛋白在子宫妊娠组织中高度表达与SCH孕妇发生稽留流产有密切关系，FSTL1、Fas蛋白可能造成妊娠期母体与胎儿炎性反应增强，特异性T淋巴细胞活化，诱导机体免疫应答状态，导致胎儿受免疫系统攻击出现生长停滞状态，同时孕妇子宫增殖成熟不足，胎盘出现肌化而牢固地粘连于子宫壁层，造成死胎难以排出体外。

综上所述，FSTL1、Fas蛋白的表达异常对SCH稽留流产孕妇疾病进展有重要作用，FSTL1、Fas蛋白表达增高可能是引起SCH稽留流产重要因素之一，针对该类患者采用调节优势应答状态来影响FSTL1、Fas蛋白的表达水平或许可达到早期预防及治疗SCH稽留流产的目的。