姜红佳
(北京昌平区中医医院妇产科,北京 102200)
HPV高危险型主要与宫颈癌和癌前病变具有相关性[1],有研究表明99.7%的宫颈癌症患者都能检测出高危型HPV,高危型的HPV的持续感染是引发宫颈癌和癌前病变的重要原因[2],正常情况下90%以上的高危型HPV能够被人体免疫器官清除,少部分不能被机体清除时将转化为持续感染。宫颈癌的发生和发生是一个长期的过程,从HPV感染到宫颈癌发生跨度能够超过20年,病变前对其加以控制,将有效的预防宫颈癌的发生[3]。本文从高危型HPV的角度入手,分析其与相应的妇科检查的相关性,为宫颈癌的预防提供理论依据。
选择2017年6月~2018年6月来我院进行HPV检测的患者600例,均有性生活史、非孕期、无子宫和宫颈切除史,此前均未检测出高危型HPV和宫颈病变,并且不存在自身免疫性疾病,患者的就诊原因为接触性出血、白带增多、白带血丝等。同时对以上患者进行TCT和阴道镜辅助组织活检。患者在检测时非经期,检测前24小时没有进行性生活、阴道药水冲洗和用药。
1.2.1 高危型HPV的DNA检测
首先对宫颈细胞进行采样,具体方法是用专用的采样刷在宫颈外口逆时针旋转几圈,刷取一定的宫颈脱落细胞,置于缓存保护液中,在4℃冰箱中保存。
取子宫颈部脱离细胞0.5-1 mL,3000 r离心后去上清,对细胞进行重悬,再次离心去上清,剩余沉淀用DNA提取试剂盒提取DNA,获得的DNA一部分用于作为PCR扩增的模板,一部分冻存在-20℃。
高危型HPV的DNA检查方法:HC2-HPV-DNA检查方法能够检测出13种高危型HPV,具体操作方法按照试剂盒操作。当样本光读量读数与阴性测量比值>1.0时,表示结果为阳性,在此基础上对高危HPV-DNA进行分型检测,采用荧光定量聚合酶链反应技术,不同的型的HPV具有不同的引物,当样品的CT值小于40时,结果为阳性。
1.2.2 宫颈TCT检查
样品来自高危型HPV的DNA检查剩余样本,用Thinprep处理仪对样本进行处理,然后用TBS分级系统对细胞进行诊断,具体分级为正常细胞、炎症细胞、ASCUS(非典型鳞状上皮细胞),LSTL(低度鳞状上皮内病变)和HSIL(高度鳞状上皮内病变)。
1.2.3 病理学检查
进行阴道镜常规检查,阴道镜下对病变最严重的地方进行定位活检,如果没有异常多点取样,在宫颈鳞触交界3、6、9、12点进行取样。10%的甲醛固定后病理镜检,结果可分为正常或炎症、CIN I(一级癌前病变)、CIN II(二级癌前病变)、CIN III(三级癌前病变和浸润癌)和宫颈癌,
本研究统计学软件SPSS 19.0进行分析,计数资料进行描述性统计。
600例患者中200例高危型HPV感染,年龄分布如表1所示,基本上呈正态分布,峰值集中在31-40岁,其次为20~30岁、41~50岁人群,51~60、>60、<21占比很小。
表1 高危型HPV感染患者的年龄分布
HPV16亚型比例最高,其次是HPV18、HPV33、HPV52、HPV58,剩余亚型占6%,见表2。大部分患者为单重感染,存在部分二重和三重感染的可能性,四重以上感染的几率很低,见表3.
表2 高危型HPV各亚型的阳性率比较
表3 多重感染分布
ASCUS,正常或炎症,LSTL和HSIL占比逐渐下降,HPV的阳性率随着细胞感染情况的严重程度逐渐增高,其中正常、炎症时HPV阳性率最低,而HSIL最高,见表4。
表4 高危型HPV感染与TCT检查结果的比较
378例患者TCT结果异常,随着病理级别递增患者占比逐渐下降,而HPV的阳性率随着病理病变程度升高,见表5。
表5 高危型HPV感染与病理组织学的关系
在本研究中,我们首先探究了高危型HPV感染患者人群的年龄分布,研究显示,HPV感染的峰值是31-40岁,其次是21-30岁和41-50岁,与其他研究结果一致。这些女性处于最佳生育年龄,性活动频繁,而高危型HPV正是通过性接触来进行传播。21-30岁高危型HPV感染人数也不低,并且20岁之前也有感染患者,与我国婚前性行为普及以及初次性行为提前有关,目前数据显示年轻性活跃女性更易感染HPV[4],感染率高达20-40%,提醒年轻有性活动史的女性也要引起临床注意。宫颈癌HPV感染以HPV16和HPVA18型为主,国内外基本一致,其他型别则存在地域性差异,可能与基因易感性有关。多重感染(包括二重感染、三重感染和四重以上感染)占比也不低[5],目前HPV多重感染与宫颈癌的具体关系仍然存在争议[6],有研究表明宫颈癌患者多重感染的检出率更高[7],对于多重感染的情况要引起更大重视。
HPV侵犯的靶细胞是子宫颈基底,在基底细胞上部有一层角质细胞,这种不能分裂的角质细胞对基底细胞具有保护作用,只有其破坏时才能感染HPV[8]。宫颈表面主要由成熟和不成熟鳞状上皮细胞组成,当上皮细胞成熟后没有角质细胞保护,就会像基底细胞一样不断增殖,HPV易感性很高,因此,可以从子宫颈部细胞形态判断HPV感染情况,本实验结果中细胞感染的等级越高,HPV阳性率也越高。对细胞检查异常病例进行了病理检测,病理学病变程度越高,HPV感染率也越高,与其他的研究结果一致,HPV阳性率与宫颈病变程度呈正相关。提高HPV检查阳性率能够减低患者反复操作的痛苦,同时显著降低漏检情况,因此综合TCT和HPV的结果对病情预判意义更明确。
综上所述,TCT联合高危型HPV检测必要时进行阴道镜活检的方法,能够提高宫颈癌前病变的检出率,达到实现宫颈癌前早期发现和治疗。