一例副猪嗜血杆菌病的诊断与防治

张春玮，张元瑞，庞 恒，王亭亭，李克鑫，许冠龙，李克钦，韩明远，彭 军，刘建柱

（1. 山东农业大学动物科技学院，山东泰安 271018；2. 山东德信生物科技集团，山东惠民 251700；3. 中国兽医药品监察所，农业农村部兽药评审中心，北京 100081；4. 济南鑫宝星动物药业有限公司，山东济南 250022）

副猪嗜血杆菌病是由副猪嗜血杆菌（Haemophilus parasuis，HPS）引起的猪多发性浆膜炎和关节炎，又称革拉泽氏病（Glässer’s disease），其临床症状主要表现为咳嗽、呼吸困难、消瘦、跛行和被毛粗乱等[1]。2周龄到4月龄间的所有猪群均可感染发病，但最常见于5～8周龄的保育仔猪，发病率一般为10.00%～15.00%，严重时死亡率可达50.00%[2]。2018年7月20日，山东省泰安市某猪场发生HPS感染病例，现从临床症状、剖检病变及实验室诊断等方面对该病例进行总结。

1 发病情况

该猪场总饲养量为500头。畜主于2018年7月13日从市场上购进仔猪250头，平均体质量为35 kg。仔猪购进3 d后开始发病，初期表现腹泻。畜主随即在饲料内拌入氟苯尼考，并给予病仔猪肌内注射青霉素G钠，但未见效果。7月18日上午，畜主自行对120头仔猪接种了3头份猪瘟细胞苗，不但没有控制病情，反而使猪群发病率和死亡率明显增加，随后于7月20日来诊。

本次疫情共发病67头、死亡48头，发病率为26.80%（67/250），死亡率为19.20%（48/250），病死率为71.64%（48/67）。其中，来诊前发病猪54头、死亡35头，来诊后新发13头、死亡13头。

2 临床症状

病仔猪精神沉郁，食欲不振；呼吸困难，可视黏膜发绀，咳嗽；持续发烧，呈现弛张热，体温为40.5～42 ℃；体况消瘦，被毛粗乱，皮肤贫血、苍白，腹围增大（图1）；有的关节肿胀，站立不稳，行动摇摆，出现跛行。

图1 病猪皮肤苍白、腹围膨大

3 剖检变化

尸体消瘦，出现严重的心包炎、胸膜炎和腹膜炎及轻度关节炎；全身淋巴结肿大、出血（图2-A），切面多汁，呈“大理石样”花纹；心包内有多量浑浊积液，心包膜增厚、粗糙，心外膜有大量纤维素性渗出物附着，形成“绒毛心”（图2-B）；肺间质水肿，肺与胸膜粘连，胸腔内有多量纤维素性渗出物；腹腔内有大量淡黄色浑浊积液，并出现大量纤维素性渗出物，腹腔器官严重粘连（图2-C、图2-D），肠系膜上有大量纤维素渗出物，肠系膜淋巴结变化不明显；肾脏肿大，有出血点；肝、脾肿大，被膜增厚、出血，两脏器均被多量纤维素性渗出物包裹，脾脏边缘可见隆起的梗死性血泡（图2-E、图2-F）；软脑膜充血、淤血和轻度出血，脑回变得扁平，蛛网膜腔内积蓄有纤维素性、化脓性渗出物而致脑髓液浑浊，脑膜与头骨内膜以及脑实质之间粘连。

图2 病例剖检变化

4 实验室诊断

无菌操作，将肝脏病料接种于TSA培养基（添加NAD和小牛血清）进行细菌分离培养；1～2 d后，挑取菌落做革兰染色、镜检。将该单菌落纯培养后进行16s RNA PCR扩增和测序。将单菌落液体培养后涂板，进行常见药物的药敏试验。同时，按照蔡旭旺等[3]报道的方法，制备分离菌株的血清学分型抗原，以HPS各血清型（1～15）标准血清（山东省农业科学院畜牧兽医研究所惠赠），对分离株进行琼脂扩散试验，以确定该分离株的血清型。

细菌分离培养发现：分离的细菌菌落单一，均为灰白色的光滑型小菌落；革兰染色阴性，呈现球杆状、短杆状或丝状细小杆菌。PCR扩增产物大小为1 470 bp，与目的片段大小相符。对PCR产物测序结果进行Blast分析，发现其与HPS NCTC4557株同源性为99.00%。药敏试验结果显示，该分离菌对头孢噻呋、恩诺沙星、多西环素、阿莫西林、氟苯尼考的抑菌圈均大于15 mm，属于高敏药物，其中对头孢噻呋和恩诺沙星抑菌圈大于20 mm，属于极敏药物（表1）。琼脂扩散试验结果显示，本次分离菌株为HPS血清4型。

表1 药敏试验结果

5 病例防治

在饲料内拌入5.00%阿莫西林可溶性粉进行预防性投药并添加维生素C、电解质、黄芪多糖，连续喂服7 d；同时带猪使用0.25%三氯异氰尿酸钠溶液进行喷洒消毒，对猪舍外环境使用2.00%的火碱溶液和5.00%的石灰乳混合喷洒，进行全面喷洒消毒。对病猪进行隔离治疗，按体质量4 mg/kg，肌内注射头孢噻呋钠，每天1次，连用10 d。

6 讨论

6.1 发病原因

本病病因主要是应激因素。长途运输、转群、饲料更换、环境骤变、饲养密度过大等复杂的应激因素降低了仔猪的抵抗力，从而引发HPS感染。环境卫生差，每天不能及时清理圈舍、圈舍环境潮湿等，极易导致细菌在猪舍长时间存留，也可诱发或加重该病。

6.2 治疗效果

根据药敏试验结果，选用极敏药物头孢噻呋进行治疗，因此极大提高了临床用药的有效性，取得了较好的治疗效果，治疗半个月后，猪群疫情已趋于稳定。根据药敏试验结果合理用药极大避免了因滥用药物而带来的细菌耐药性和抗药性问题，对于该病治疗非常有利。药敏试验应做到简便易行，可在第一时间保证用药正确，从而及时有效控制病情；药敏试验中的药物选择应合理，可选择对某类细菌有效的药物进行试验，一类药物选择一种代表药物即可，这样可提高试验效率和用药指导效率。

6.3 防控要点

一要加强饲养管理，提高猪群营养水平，降低饲养密度，实行自繁自养、全进全出的饲养模式[4]；二要做好生物安全工作，保证猪舍的卫生与清洁，严格执行定期消毒制度，保障空气流通；三要减少各种应激，如气温突变时，做好降暑或保暖工作，尽量避免异地调运以及饲料和猪舍的突然更换等；四要合理选择疫苗，因HPS有多种血清型，所以免疫时最好使用多价菌苗进行免疫[5]；五要根据药敏试验结果选用药物，可交替使用有效抗菌药物，并配以中药制剂[6]，避免细菌抗药性出现；六要坚持对症治疗，通过药物清除纤维素性渗出物，缓解症状，控制猪群死亡率，同时在饲料中添加增强免疫力药物，如维生素C、黄芪多糖、左旋咪唑、牛磺酸等，这样可有效提高预防和治疗效果。