电化学发光免疫法与酶联免疫吸附试验法检测人类免疫缺陷病毒的临床价值

谢玉娜

福建省龙岩市人民医院检验科 (福建龙岩 364000)

艾滋病是一种具有危害范围广、传播速度快、潜伏期长等显著特征的传染病，人类免疫缺陷病毒(HIV)感染是其主要发病因素[1]。有效的监控、诊断HIV对抑制病毒传播、治疗与判断预后具有积极意义。检测HIV抗体是诊断艾滋病的常用方式，可有效判断机体是否感染HIV，适用于初筛量大的单位和地区[2]。目前，双抗夹心法为初筛HIV抗体的主要方式，但该方式操作复杂，有较长的检测周期。电化学发光免疫(ECLIA)法与酶联免疫吸附试验(ELISA)法为常用的两种检测HIV的方式。本研究选取2016年1月至2018年8月在我院进行血液检验的样本9 830份，旨在分析ELISA法与ECLIA法检测HIV的临床价值，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2016年1月至2018年8月我院收集的血液检验样本9 830份，均在无菌下进行操作，并保存于低温冰箱中待检。

1.2 方法

(1)ECLIA法。将被检验品与一份生物抗生素抗HIV-1p24单克隆抗体共同孵育成抗原-抗体复合物，收集磁性粒子(用磁石)后清洗干净，并完全去除未反应物质。将磁性粒子与ALP标记的抗HIV抗原的HIV抗体发生特异性反应，收集磁性粒子后清洗干净，将未反应物质彻底去除。加入发光底物后实施搅拌，分散集聚的磁性粒子，加入清洗液，将磁性粒子上ALP以发光底物CDP-Star分解并发光，对其发光强度进行检测，使用光强度以获取待检测物的HIV cutoff值。检测仪器为SYS-MEX-HISCL-5000。检测结果：A≥cutoff值为阳性；A1时，结果评定为阳性；<1时，判定为阴性。

1.3 临床评价

对比ELISA法与ECLIA法检测阳性率，并与确证中心检测结果对照，分析两种方式检测结果的符合情况。

1.4 统计学处理

采用SPSS 21.0统计软件进行数据分析，计数资料以率表示，采用χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 阳性检出情况

9 830份样本经ELISA法初诊阳性28份，阳性率为0.285%，ECLIA法初诊阳性26份，阳性率为0.264%,两者比较,差异无统计学意义(χ2=0.446，P=0.504)。见表1。

表1 9 830份样本经ELISA法与ECLIA法检测阳性率比较

2.2 检测结果的符合情况

ECLIA法临界值分布中占比最高的为150～220，占阳性标本的80.77%(21/26)；ELISA法吸光度值分布中占比最高的为1.35～1.80，占阳性标本的53.57%(15/28)，两种检测方式比较，差异有统计学意义(χ2=4.488，P=0.034)。见表2。

表2 ELISA法与ECLIA法检测结果的符合情况比较

3 讨论

HIV可诱导艾滋病的发生，传播速度快且潜伏期长，严重危害人类生命健康。早期准确诊断，制定合理的防控措施，是控制传播、指导临床用药的最有力依据。检测血清病毒抗体是国内对HIV感染诊断的主要方式，血清HIV抗体为重要指标，因大部分HIV感染可终身携带，体内HIV难以清除[3]。因此，检测HIV抗体可有效判断机体是否存在HIV，早期实施干预手段，避免HIV传播。

国内大部分医院常采用ELISA法检测HIV，其需分离结合态的抗体或抗原与游离态的抗体，重复进行加样和洗板操作，误差率高，且酶标板存在孔间差异也会增加变异系数，操作步骤烦琐，结果需1～2 h才可获得，临床判断难度增大[4-5]。ECLIA法是在抗原或抗体上标记发光物质或酶，待免疫反应结束时，将氧化剂或酶底物加入，光电倍增管测量光强度，且光强度与复合体的浓度呈线性关系，利用其获得待激测物品的含量[6]。ECLIA法综合了磁性微珠包被技术、电化学发光技术、生物素-亲和素技术等多种先进技术，检测HIV抗体的灵敏度得到了大幅度提高，确保了检测的自动化与标准化，显著减少了批内、批间误差，可获得较为精确的检测结果[7-8]。ECLIA法具有标记物有效期长、线性范围宽、无有害污染、灵敏度高等优点，得到众多学者的青睐。ELISA法与ECLIA法的OD/CO值和cutoff检测阳性结果与确认结果，OD/CO值与临界指数高低与确认检测结果符合率呈正比。ECLIA法是在封闭的流动系统中实施检测，可有效防止出现交叉感染，因操作简便与试剂的稳定性高，20 min便能完成整个样品的分析，测定结果准确可靠，与ELISA法相比，测定的线性范围高3～4个数量级，可减少假阴性的发生，具有更好的检测灵敏性、稳定性及重复性，可批量上机实施自动化分析检测，可有效减少职业暴露，优越性突出。与传统抗体分析法相比，ECLIA法可提前6 h发现HIV感染，可使诊断窗口期大幅度缩短。但该方式也存在一定的不足，如检测成本相对较高，难以在部分基础医院普及；阴性结果中可能存在HIV暴露或感染，需送确证中心诊断确诊。

综上所述，ELISA法与ECLIA法均是检测HIV的有效方式，临床可根据实际情况选择适宜的检测方式。