张运强,刘永忠,杨有福,黎建国
(湖南加农正和生物技术有限公司,湖南 长沙 410329)
母猪的围产期通常指妊娠第90天(即产前20 d)到分娩后10 d。此阶段包括母猪妊娠后期、分娩和哺乳前期等生理阶段,由于这些生理活动的变化,致使母猪的机体生理状态会发生巨大的变化。若妊娠后期母猪管理不到位,致使母猪气血不足[1],会导致母猪羊水减少、分娩时宫缩无力,继而导致母猪产程过长。当母猪产程过长会增加白死胎(母猪在妊娠后期或分娩时导致的死胎,因其外观呈现白色,通称白死胎)的几率,严重影响生产力[2]。
其次,当母猪分娩时会发生强烈应激,这个阶段的母猪体内激素水平(如皮质醇、雌激素等)会剧烈变化,这种变化通常会导致母猪机体免疫细胞(如单核巨噬细胞)数量下降,因此会对母猪哺乳期的免疫性能产生负面影响[3-4]。有文献报道[5],当猪群机体非特异免疫力下降时,会伴随着血液中免疫球蛋白的含量较正常值有所降低。免疫球蛋白包括IgG、IgA、IgM、IgD和IgE 5种,前3种对猪机体免疫力尤为重要,而哺乳母猪血液中的免疫球蛋白和母乳中的免疫球蛋白呈正相关[6],因此当母猪免疫力下降致使其血液和母乳中免疫球蛋白含量下降,将会导致仔猪获取的母源抗体减少,最终影响仔猪的生长。
人参(Panax ginseng C.A.Mey)是一种多年生草本植物,通常我们指的人参为该植物的根茎,人参的主要成分为人参皂苷和人参多糖。据文献记载[7],人参具有提升哺乳动物机体免疫力、改善心血管功能、延缓衰老和抗肿瘤等功能。近期有试验证明[8],给妊娠母猪和哺乳母猪饲喂人参粉可以显著提升母猪血清中的免疫球蛋白G和谷胱甘肽过氧化物酶的活性,并对母猪无不良影响,可见饲料中添加人参在养猪行业具有很大的潜力。本文通过围产期母猪饲喂人参粉,探究饲喂人参粉对围产期母猪繁殖性能和血液中免疫球蛋白(IgG、IgA和IgM)的影响。
人参样品为市面上采购的园参,由湖南省加农正和生物技术有限公司提供。将人参样品60℃烘干12 h后称重,随后继续烘干直至恒重,将烘干后的人参进行粉碎后过40目(孔径0.425 mm)筛子得到人参粉,真空封装保存。
试验时间为2018年8月20日至9月22日,在江西万年牧业有限公司,选取健康状况良好的、膘情相近的[背膘P2值为(20±1)mm]、胎龄相近的[(3±1)胎次]、距预产期20 d的长大二元母猪54头。采用完全随机区组试验设计,将母猪随机分为3组3个区域(产房),每组18个重复,分组分别为对照组、处理组T1和处理组T2,其中对照组饲喂常规母猪妊娠饲粮,饲粮配方见表1,而T1和T2分别在对照组饲粮基础上按比例1 kg/t饲粮和2 kg/t饲粮添加人参粉。记录母猪生产性能,包括:产程、产仔数、无效仔(死胎、弱仔、木乃伊、畸形)和仔猪初生重,并于母猪分娩起第11日上午8:00空腹进行采血,静置5 min后取上层清液3 000 r/min离心5 min得到血清。
表1 基础饲粮原料组成及营养水平
血液中免疫球蛋白的检测采用酶联免疫吸附试验(ELLSA)进行检测,试验地点为湖南农业大学动物医学实验室,检测指标有:免疫球蛋白G、免疫球蛋白A和免疫球蛋白M。方法简介:1)使用相应的特异性抗体将固相载体包被,形成固相抗体后进行洗涤,将未结合的抗体和杂质进行去除;2)将待检测的标本加入固相抗体中,使标本中的抗原和固相载体中的抗体充分结合,形成固相抗原抗体复合物,再次洗涤;3)加入酶标抗体充分结合,形成复合物,洗涤未结合的酶标抗体;4)加底物显色后进行比色;5)利用标准品测量建立标准曲线,如图1所示,并利用四参数Logistic曲线拟合,公式为:
6)利用所得公式计算出免疫球蛋白含量。
图1 四参数Logistic标准曲线示意
统计分析软件使用SPSS(Verion:22.0),使用ANOVA法进行方差分析,采用Duncan法进行显著性分析,P<0.05为差异显著。
如表2所示,对于母猪生产性能,T1组和T2组的母猪产程(200.11 min和192.28 min)均相对于对照组(271.28 min)显著降低(P<0.05),且 T2组的平均产程要较T1组略低一些;但试验组与对照组的无效仔率差异不显著,虽然T2组(9.59%)较对照组(9.73%)略有降低,但并未达到显著差异,可见人参粉不能降低无效仔率,但从另一个角度来讲,饲喂人参粉的试验组T1和T2也没有对无效仔率产生负面影响;从每头母猪产仔的初生窝均个体重来看,T1组和T2组(1.57 kg和1.64 kg)均显著高于对照组(1.26 kg;P<0.05),证明人参粉在母猪妊娠后期饲喂可以显著提升其仔猪初生重。
关于血清的免疫球蛋白含量可见,试验组T1和T2的免疫球蛋白G(3.88 g/L和3.91 g/L)相对于对照组(3.39 g/L)有显著提升(P<0.05);试验组的免疫球蛋白A均较对照组有略微提升,但差异不显著(P>0.05);而T1组和T2组的免疫球蛋白M(0.43 g/L和0.50 g/L)相对于对照组(0.27 g/L)有显著提升(P<0.05),证明饲喂围产期人参粉可以显著提升母猪血液中IgG和IgM的含量。
表2 围产期母猪饲喂人参粉后繁殖性能和血液中免疫球蛋白变化
通常我们所说的母猪产程为母猪的第二产程,即从出生第1头仔猪起至最后一头仔猪出生之间的间隔。影响母猪产程的主要因素有3种:产力因素、产道因素和胎儿因素[9]。而人参作为中国传统中药,自古典记载就有“补血生津”之功效,但人参往往是人用,很少有关于畜禽使用人参的研究报道。徐萍在研究中指出[10],食用人参的孕妇临产时可增加抗疲劳程度,同时,人参还有扩张血管、增加血液流动性的作用,临床试验中食用人参的孕妇极显著缩短了第二产程时间(P<0.01)。刘文亮[11]在治疗羊水缺乏症临床试验报道,人参可以滋阴生津,利于羊水和阴道分泌物的生成。有文献报道,当母猪羊水过少时,会造成分娩时产道干涩,容易造成难产等现象[12],而人参具有增加羊水的作用,由此推论,母猪饲喂人参粉可降低因产道原因导致产程过长的发生几率。
对于无效仔率,虽然T2组较对照组有所降低,但差异并不显著,无效仔率即母猪生产无效仔所占的比率,无效仔包括死胎、弱仔(本试验设定初生仔猪体重小于0.8 kg为弱仔)、木乃伊和畸形猪。根据文献报道可知[13],影响母猪产仔性能的因素有很多,除母猪的健康程度、胎次、膘情因素外,配种时的环境温度、配种操作以及妊娠期饲养管理均可影响母猪的产仔性能,而畸形猪、木乃伊和死胎中的“黑死胎”通常由妊娠母猪患病引起,而弱仔多与妊娠期饲养管理相关[14]。由于本试验控制了母猪与自身因素,在母猪妊娠后期饲喂人参粉对死胎和弱仔的影响较小,对于无效仔率试验组与对照组没有达到显著性影响。
然而,通过试验结果显示,试验组T1和T2的初生窝均个体重要显著高于对照组(P<0.05)。妊娠母猪胎儿的发育是有规律性的,妊娠前中期胎儿骨骼、肌肉和内脏快速发育,妊娠后期是胎儿主要增重时期[15],而人参粉对母猪有扩张血管、增加动物机体代谢的作用[10],当母猪代谢增强,将会增加其对营养物质的吸收和利用率,继而有利于胎儿的生长和发育[16]。齐莉莉等[17]使用人参渣饲喂母猪,研究表明母猪饲喂人参渣所产仔猪的初生重极显著高于对照组(P<0.01),其结果和本试验结果具有一致性。
母猪分娩过程是机体的一个强烈的应激过程,在这个过程中不仅会导致母猪的代谢发生紊乱,还会导致母猪过度疲劳,其机体的皮质醇含量也会随之剧烈波动[18]。皮质醇是导致猪机体应激的一种激素,有报道称猪机体内的免疫球蛋白和皮质醇的水平呈高度相关性,分娩后的母猪会因为这种激素的变化导致免疫球蛋白的单核细胞数显著下降[19-20],继而导致母猪产后免疫力下降,增加了母猪发病的风险。
人参的主要成分为人参皂苷和人参多糖,具有调节免疫,提升心血功能、保肝等作用。通过大量试验证明,人参中的人参皂苷、人参二醇组皂苷、人参三醇组皂苷具有不同程度的抗应激、抗肿瘤以及抗病毒等免疫调节效应,经研究,人参皂苷不仅可以促进干扰素的生成,还可以诱生6种白细胞介素(IL)的产生,其中IL-2能够促进T淋巴细胞增殖,以及活化B淋巴细胞,促进免疫球蛋白的生成[7]。免疫球蛋白是B淋巴细胞在抗原的刺激下,变为浆细胞后继而产生特异性结合的抗体蛋白。其中免疫球蛋白G(IgG)是免疫球蛋白的主要成分,具有抗菌、抗病毒和抗其他毒素等多种活性[21],而免疫球蛋白A(IgA)又称黏膜局部抗体,对黏膜保护具有巨大的意义,免疫球蛋白M(IgM)能够溶解细菌和中和病毒,具有很高的效能[22]。本试验中试验组T1和T2的IgG和IgM均显著高于对照组(P<0.05),且T2组的值略高于T1但差异不显著(P>0.05)。Xi等[8]在人参饲喂妊娠后期母猪中发现,人参多糖可以显著提升母猪血液中IgG的含量。江月斐[23]使用人参为主原料的复合药剂饲喂大鼠发现,不同剂量的药剂均可不同程度地提升大鼠血液中免疫球蛋白的含量,由此可见,人参在提升动物免疫力上具有巨大的潜力。从研究报道中发现,母猪血液中的免疫球蛋白和母乳中的免疫球蛋白具有一定相关性[24],由此推论,围产期母猪饲喂人参粉不仅能提升母猪的免疫力,在对仔猪的免疫力也具有提升的可能性,然而,母猪饲用人参粉对其母乳和仔猪的免疫指标是否能够提升,或者提升哪个指标以及何种程度,还需要进一步进行试验证实。
母猪围产期饲喂人参粉可以显著降低产程、提升仔猪初生重,并可以提高其血液免疫球蛋白IgG和IgM的浓度。