T淋巴细胞亚群及血清CXCL10、CXCR3在干燥综合征患者中的水平变化及临床意义

赵嘉英，黄松涛，李青，严宏莉，陈利华，胡倩，陈飞

(广安市人民医院，四川广安 638500)

干燥综合征是临床常见的一种自身免疫性疾病，女性为主要发病群体，并呈逐年增长趋势，其以口干、眼干为主要临床症状，还可累及肺、神经系统等多种器官，导致患者生存质量明显下降[1]。但干燥综合征初期症状轻微，无明显特异性，诊断准确率较低，易延误最佳治疗时机，因此早发现、早治疗对缓解患者临床症状，延缓病情进展具有积极意义。近年来研究显示，干燥综合征患者T淋巴细胞亚群存在异常，可影响疾病进展[2]。另有研究显示，CXC趋化因子配体10(CXCL10)及趋化因子受体3(CXCR3)参与了狼疮肾炎、特发性关节炎等多种自身免疫性疾病进展[3,4]。因此，本研究观察了干燥综合征患者T淋巴细胞亚群及血清CXCL10、CXCR3水平变化情况，现将结果报告如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选取2017年4月～2018年5月本院收治的75例干燥综合征患者作为观察组，其中男14例、女61例，年龄32～71(46.92±6.17)岁，病程1～5(2.37±0.45)年；BMI 18～29(22.05±3.71)kg/m2。纳入标准：所有患者经诊断符合中华医学会风湿病学分会制定的有关干燥综合征的诊断标准[1]；均为首次确诊；近3个月未服用激素或免疫制剂。排除标准：有腮腺、颌下腺急慢性炎症或肿瘤病史者；有头颈部放化疗史者；有淋巴瘤史者；合并心肝肾等其他严重疾病者；妊娠期及哺乳期妇女；临床资料不完整及不配合检查者。同时，选取同期于本院进行体检的健康人员61例作为对照组，经诊断无任何自身免疫性疾病，其中男12例、女49例，年龄35～68(45.37±6.84)岁，BMI 18～30(21.43±3.28)kg/m2。两组性别、年龄、BMI等基本资料比较差异无统计学意义。本研究经医院伦理委员会批准，所有患者及家属签订知情同意书。

1.2 T淋巴细胞亚群检测 采用美国贝克曼库尔特有限公司流式细胞仪检测所有受试者外周血T淋巴细胞亚群，应用双色流式细胞法检测CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD4+CD8+、CD4+CD28+及CD8+CD28+T细胞。

1.3 血清CXCL10、CXCR3水平检测 所有受试者于清晨空腹收集外周静脉血4 mL，离心并分离血清，采用ELISA法检测血清CXCL10、CXCR3水平。试剂盒由上海浩本生物科技有限公司提供，并严格按照说明书操作进行。

2 结果

2.1 两组T淋巴细胞亚群比例比较 观察组CD3+CD8+、CD4+CD8+、CD8+CD28+T细胞比例低于对照组(P均<0.05)，详见表1。

表1 两组T淋巴细胞亚群比例比较

2.2 两组血清CXCL10、CXCR3水平比较 观察组血清CXCL10、CXCR3水平高于对照组(P均<0.05)，详见表2。

表2 两组血清CXCL10、CXCR3水平比较

2.3 观察组血清CXCL10与CXCR3相关性 观察组血清CXCL10与CXCR3水平呈正相关(r=0.391，P<0.05)。

2.4 血清CXCL10与CXCR3诊断干燥综合征的价值 ROC曲线结果显示，CXCL10诊断干燥综合征最佳界值为181.71 ng/L，此时灵敏度、特异度、约登指数分别为84.60%、91.80%、0.764；CXCR3诊断干燥综合征最佳界值为440.25 ng/L，此时灵敏度、特异度、约登指数分别为73.10%、77.60%、0.507。CXCR3诊断干燥综合征的ROC曲线下面积(AUC)为0.782(95%CI：0.694～0.901，P=0.001)，CXCL10诊断干燥综合征的AUC为0.891(95%CI：0.764～0.984，P=0.000)，CXCL10诊断价值较CXCR3诊断价值高。

2.5 T淋巴细胞亚群及血清CXCL10、CXCR3水平与干燥综合征发生的关系 年龄、CD4+CD8+T细胞、CD8+CD28+T细胞及血清CXCL10、CXCR3水平是影响干燥综合征发生危险因素(P<0.05)，详见表3。

3 讨论

目前，干燥综合征发病机制尚不清楚，多数研究者认为干燥综合征主要因机体免疫系统紊乱导致。T细胞淋巴亚群属于机体免疫系统主要组成部分，可分泌多种细胞因子，影响机体免疫调节[5,6]。干燥综合征患者唾液腺、泪腺功能明显衰退，随着病情进展又可累及肺、肾、甲状腺等多种系统，对患者生命健康造成严重威胁。目前虽可根据眼部、口腔及唾液腺功能检查等方式诊断干燥综合征，但发现时病情已较为严重，治疗更为困难，因此早期诊断干燥综合征成为当前研究关注的重点[7,8]。近年研究发现，趋化因子不仅与肿瘤免疫、转移存在密切联系，并且在干燥综合征中发挥重要作用，可能成为诊断与治疗干燥综合征有效生物标志物[9,10]。趋化因子作为一种小分子量蛋白，属于细胞因子类，具有广泛生物学作用，依据受体差异性将其分为CC、CXC、CX3C、C类等4个亚族[11]。其中CXC趋化因子在急性炎症反应中扮演重要角色，并且各趋化因子受不同调控因素发挥不同作用。CXCL10作为CXC家族中一员，在大部分免疫反应中占主导地位，其多分布于Th1炎症组织中[12]。而CXCR3作为CXCL10受体，属于一种G蛋白偶联七亚单位穿膜受体，主要表达于自然杀伤细胞、CD4+Th1细胞、CD8+T细胞及部分上皮细胞、内皮细胞，又可分为CXCR3-A、CXCR3-B、CXCR3-alt3变异体，其与CXCL10相结合，不仅促使细胞迁移，引起细胞骨架改变及细胞钙离子内流，还可使循环中活化免疫细胞向炎症部位聚集[13,14]。Welcher等[15]在系统性红斑狼疮中的研究显示，CXCL10主要受IFN-γ及Ⅰ型干扰素α/β较强刺激、TNF较弱刺激，通过激活独特细胞及途径达到有效调节细胞迁移、生长及转录活性目的，参与疾病进展。此外，CXCL10与CXCR3相结合在机体中发挥双重作用，一方面可有效预防感染，发挥积极防御作用；另一方面可引发排斥反应，致过敏性疾病、自身免疫紊乱，参与炎症反应等多种生理病理过程，影响疾病进展情况[16]。

表3 影响干燥综合征发生多因素Logistic回归分析

本研究结果显示，观察组CD3+CD8+、CD4+CD8+、CD8+CD28+T细胞显著低于对照组，表明患者T淋巴细胞亚群发生明显异常，与张虹等[17]研究结果相似，可见T淋巴细胞亚群在干燥综合征发病发挥重要作用。牛广华等[18]表示，T淋巴细胞亚群异常表达可能与机体免疫调节机制紊乱密切联系，又可使血清出现类风湿因子、抗SSB抗体等多种自身抗体，影响疾病进程。结果还显示，观察组血清CXCL10、CXCR3水平高于对照组，提示血清CXCL10、CXCR3在干燥综合征发展过程中的过度表达可能与疾病发生发展有关，推测其可能是机体内皮细胞、炎症细胞等多种细胞释放大量CXCL10、CXCR3，促使炎性反应发生，影响疾病进展，尤其是患者血清CXCL10水平越高，炎症破坏性更高，易引发多种不良后果，威胁患者生命安全。

另对CXCL10与CXCR3间关系进行分析，结果显示两者呈显著正相关，表明CXCL10与CXCR3关系密切。这主要是由于CXCR3作为CXCL10受体，其水平变化受CXCL10调控影响，当CXCL10水平升高时，CXCR3水平也相应增高，反之，水平有所下降。CXCL10及其受体CXCR3两者水平明显上调与干燥综合征发生发展有关，可能因两者相结合促使免疫细胞聚集于发生炎症部位，呈高水平表达，对其具体作用机制仍需进一步研究。本研究ROC分析结果显示，CXCL10与CXCR3诊断干燥综合征均具有较高的灵敏度和特异度，并在干燥综合征发病中具有重要作用，是该疾病早期诊断的有效指标。检测CXCL10、CXCR3便于早期临床诊断，并且应用ELISA法检测操作方便、得出结果时间短，具有在临床中广泛应用的优势。此外，该结果还显示CXCL10诊断价值明显高于CXCR3，其可作为首选诊断指标，为临床治疗提供可靠信息。

本研究分析影响干燥综合征发生相关因素，结果显示年龄、CD4+CD8+T细胞、CD8+CD28+T细胞及血清CXCL10、CXCR3水平是影响干燥综合征发生的危险因素。表明随着年龄增长，干燥综合征发生风险性明显增加，应密切关注高龄人群，积极采取预防措施降低干燥综合征发生风险。同时，T淋巴细胞亚群异常变化对机体免疫状态造成破坏，使患者分泌功能受严重损害，影响疾病发展。此外，T淋巴细胞亚群所分泌的CXCL10、CXCR3也是主要危险因素，其中CD4+T细胞浸润也受CXCR3趋化作用引起，该结果为临床治疗干燥综合征提供新思路，例如临床可采用分析生物学技术阻断CXCL10与CXCR3反应轴，从而降低CXCL10与CXCR3的表达及活性，最终有效控制患者病情进展，改善预后，提高治疗效果。

综上所述，干燥综合征患者T淋巴细胞亚群发生异常，并且血清CXCL10及其受体CXCR3水平明显上升，血清CXCL10、CXCR3水平具有较高灵敏度和特异度，可作为诊断干燥综合征有效的生物标志物，并为临床有效治疗干燥综合征，改善临床症状提供有效参考依据。由于本研究所纳入的病例数偏少，未观察在不同临床病程下血清CXCL10、CXCR3水平变化情况，数据存在一定偏移，因此在后期研究中应纳入更多病例，重点动态观察血清CXCL10、CXCR3水平变化情况，以期有效评估病情进展情况。