姜秋水,沈 华,谢 丹
(浙江省粮食科学研究所有限责任公司,浙江杭州 310012)
高级脂肪醇(CnH2n+1OH),又名高碳醇,是碳原子数在六个以上的一元脂肪醇,是重要的表面活性剂和增塑剂的生产原料,广泛应用于医药、化妆品、涂料、农药、洗涤剂、合成纤维等产品中(陈苗等,2010;赵飞等,1998)。此外,高碳醇还可以作为饲料添加剂应用于畜禽和水产动物饲料中。有研究表明,饲料中添加高碳醇可以提高虾类的生长速度,降低其饵料系数,改善产品品质,提高机体免疫力和抗逆性。在生长猪饲料中添加植物高碳醇可以提高其日增重和瘦肉率,加快骨骼肌的生长速度(李庆辉,1987)。
含不同碳原子数的高碳醇具有不同的生物学功能。其中,三十烷醇是公认的植物生长调节剂,具有促进动物生长的作用 (李庆辉,1987;翁杰等,1979),关于不同种类和添加水平的高碳醇对于水产动物生产性能和消化功能影响的报道较少。因此,本试验旨在探讨不同添加形式及水平的高级脂肪醇对青鱼生产性能、机体营养组成和消化酶活力的影响,以期为合理开发利用新型水产饲料添加剂提供理论依据。
1.1 试验材料 试验所用高级脂肪醇由浙江省粮食科学研究所提供。
1.2 试验设计 选用规格整齐 (1.25 g左右)、活动能力强的青鱼1050尾(购自浙江省淡水水产研究所特种水产苗种基地),随机分为10个处理组,每组3个重复,每个重复35尾。预试期7 d,正试期56 d。试验分组及处理水平见表1。
1.3 试验饲粮 试验以鱼粉、豆粕、菜籽粕、棉籽粕、糊精等常规饲料原料进行配方设计。所有原料均经粉碎机充分粉碎,过40目筛,按配方比例配制,加适量水,用搅拌机充分混匀,用绞肉机挤压成粒径为1.2 mm的长条,在常温下风干,再用粉碎机破碎成能过2.5~8目小颗粒饲料,置于-20℃冰柜中密封保存备用。基础饲粮组成及营养水平见表2。
表1 试验分组设计及处理水平%
表2 基础饲料组成及营养成分
1.4 饲养管理 养殖试验于浙江省淡水水产研究所隔山漾试验场进行。试验系统采用流过式圆形玻璃纤维水族箱,每个水族箱体积300 L,实际蓄水250 L。投饲时间为每天8:30和16:30。投饲前后1 h采用微流水进行换水,每天换水量约为1/3总体积。试验用水为曝气后的自来水,水温为24~28℃,水体pH 7.2~7.8,溶解氧保持在5.0 mg/L以上。
1.5 样品采集与指标测定
1.5.1 生长性能 分别于试验第1天和第56天对鱼进行称重,计算增重 (WG)、特定生长率(SGR);记录试验初放鱼量和试验结束时的成活鱼数量,计算存活率(SR);记录每日投喂量,计算饲料系数(FCR)。WG、SGR、SR、FCR 计算公式如下:
式中:FW、IW分别为试验末鱼体重和试验初鱼体重,g;t为试验周期,d;Nt为试验结束时的成活鱼数量;N0为试验开始时的放鱼量;FI为采食量,g。
1.5.2 体成分 于试验第56天,每组随机挑选5尾鱼空腹24 h后用于体成分组成测定。试验饲料和全鱼体成分测定方法为:采用凯氏定氮法测定粗蛋白质含量,采用索氏抽提法测定粗脂肪含量,采用105℃常压干燥法测定水分含量,采用550℃马福炉灼烧法测定粗灰分含量。
1.5.3 消化酶活力 于试验第56天,每组随机挑选5尾鱼空腹24 h后,置于冰盘上解剖,取肝胰脏和肠道,剔除脂肪和肠道内容物,用滤纸吸干水分后称重,加入10倍的PBS溶液,用玻璃匀浆器在冰浴中匀浆。随后在4℃、7000 r/min离心10 min,获得的上清液为粗酶液,并置于4℃冰箱中保存,样品在24 h内分析测试完毕。蛋白酶活性测定采用福林-酚试剂法,蛋白酶活性单位定义为:于pH 7.5、37℃条件下,每分钟酶解酪蛋白生成1μg酪氨酸为1个活性单位(U),蛋白酶活性以U/mg粗酶蛋白表示。淀粉酶活力测定采用Bernfeld法。淀粉酶活性单位定义为:pH 6.9、25℃条件下,每分钟酶解可溶性淀粉生成1μmol麦芽糖为1个活性单位(U),淀粉酶活性以U/mg粗酶蛋白表示。脂肪酶活性测定采用聚乙烯醇橄榄油乳化液水解法。脂肪酶活性单位定义为:在pH 7.5、30℃水浴条件下,以酶液每分钟水解脂肪产生1μg脂肪酸量作为一个酶活力单位(U),脂肪酶活性以U/mg粗酶蛋白表示。粗酶液中蛋白质浓度用考马斯亮蓝法测定,以牛血清白蛋白为基准物。
1.6 数据处理 数据经Excel 2016初步整理后,用SPSS 11.5统计软件进行单因素方差分析(One-way ANOVA)及 Duncan’s显著性比较。 试验结果均以“平均值±标准差”表示,P<0.05为差异显著,P<0.01为差异极显著。
2.1 脂肪醇对青鱼生长性能的影响 由表3可知,与 T1 组相比,T3、T5、T6、T9、T10 组鱼末重 (P <0.05)分别提高 11.88%、8.21%、11.87%、8.86%和11.02%;T3、T6、T9、T10 组鱼增重率(P < 0.05)分别提高 17.01%、17.15%、15.13%和 17.20%;T2、T4、T7、T8组鱼末重及增重率均无显著差异(P>0.05)。
表3 不同形式及水平的脂肪醇对青鱼生长性能的影响
T6组饲料系数最低为1.84,与T1组相比降低了7.54%(P>0.05),其余各组饲料系数分别为T8(1.93)< T10(1.94)< T7(1.95)< T5(1.96)< T3(1.97)< T1 (1.99)< T9 (2.00)< T4 (2.03)< T2(2.05),均无显著差异(P > 0.05)。 但从试验过程分析,由于每个试验组均采用饱食投饲,在养殖过程中没有回收残饵,因此认为该指标数据差异大,且可靠性较差。
青鱼的存活率除T7(97.14%)和 T9(99.05%)略低外,其他各组均为100%,说明养殖试验比较成功。
2.2 脂肪醇对青鱼体成分的影响 由表4可知,T4和T8组全鱼水分含量最高,与T9组相比,分别显著提高了2.24%和2.51%(P<0.05);与T1组相比,各组全鱼粗脂肪含量均无显著差异(P>0.05),而与 T3、T7和 T9组相比,T4和 T8组全鱼粗脂肪含量显著升高(P<0.05);试验各组全鱼粗灰分含量无显著差异(P>0.05),表明饲料中添加脂肪醇不影响青鱼全鱼粗灰分含量。
表4 不同形式及水平的脂肪醇对青鱼全鱼体成分的影响%
2.3 脂肪醇对青鱼消化酶活性的影响 由表5可知,饲料中添加高碳醇可在一定程度上提高青鱼肝胰脏和肠道脂肪酶活性。与T1组相比,T6、T7组和T9组肝胰脏脂肪酶活性(P<0.05)分别提高 43.93%、38.65%和 50.26%;T3、T5、T6、T9组和T10组肠道脂肪酶活性(P<0.05)分别 提 高 38.97% 、35.85% 、41.51% 、40.37% 和40.89%。试验各组青鱼肝胰脏和肠道蛋白酶和淀粉酶活性均无显著差异(P>0.05),表明饲料添加高碳醇不影响青鱼肝胰脏和肠道蛋白酶和淀粉酶活性。
表5 不同形式及水平的脂肪醇对青鱼消化酶活力的影响 U/mg
本试验结果表明,饲料中添加高级脂肪醇2.5%C30、5.0%C28和15.0%C30-PZ可以提高青鱼生长性能,增强其肝胰脏和肠道脂肪酶活性,不影响全鱼水分、粗蛋白质、粗脂肪、粗灰分等营养组成,可作为水产动物饲料添加剂进行推广应用。