赵国清, 王贵升, 胡永浩*
(1.甘肃农业大学,甘肃兰州 730070;2.山东省动物疫病预防与控制中心,山东济南250022)
随着养殖业的发展,水貂的养殖数量逐渐增多,在水貂的养殖过程中,抗菌药物不合理的使用,带来许多的弊端,如畜禽免疫力下降、肠道菌群失衡等(陈颀,2017)。因此,研发替代抗生素的物质成为新的研究方向。益生菌富含多种营养物质,可以提高饲料在动物体内的消化与吸收,提高动物免疫力和生长性能(裴跃明,2016),被广泛应用于动物养殖中。关于益生菌在水貂养殖过程中的应用报道比较少。因此,本试验在60日龄的雄性水貂基础日粮中添加不同剂量的益生菌制剂,旨在探讨其对水貂生长性能和免疫指标的影响,为益生菌制剂在水貂养殖过程中进一步的应用提供参考依据。
1.1 试验材料 益生菌制剂是由乳酸杆菌、枯草芽孢杆菌、酵母菌等组成,活菌量均≥100万cfu/g,由山东宝来利来生物工程股份有限公司生产;细胞因子IL-2、IL-6 ELISA Kit试剂盒购自上海允麦生物科技有限公司;免疫球蛋白IgG、IgM、IgA ELISA Kit试剂盒购于 Elabscience公司;小型高速离心机由德国Eppendorf公司生产;多功能全波长酶标仪由北京凯奥科技发展有限公司生产;常规的试剂及仪器由本实验室提供。
1.2 试验动物及设计 采用单因素完全随机设计试验,选择 60日龄体重为(960.55±80.45)g 雄性水貂60只,随机分为4组,每组3个重复,每个重复5只,1组为空白对照组饲喂基础日粮,2、3、4组分别在基础日粮中添加0.5%、1.0%、1.5%益生菌制剂,试验期60 d,每只水貂单笼饲养,单独给料,自由饮水,每日8:30和16:30定期打扫,按照常规免疫程序进行免疫和驱虫。
1.3 基础日粮 参考乜豪(2018)方法配制育成期水貂的基础日粮,其组成及营养水平见表1,饲粮为干粉型。
1.4 指标测定及方法
1.4.1 生长性能的测定 在试验开始和结束时,对每只水貂进行称重,记录初始体重和试验末重,并记录试验期间耗料量。测定计算各组的平均日采食量(ADFI)、平均日增重(ADG)和料重比(F/G)。
表1 日粮组成成分与营养水平
1.4.2 免疫指标的测定 在试验结束后,每个试验组随机挑选10只水貂,指尖消毒并采血3 mL,置于促凝固管中,静置、离心,将血清分装-80℃保存,按照说明书检测免疫球蛋白IgG、IgM、IgA和细胞因子IL-2、IL-6含量。
1.5 试验数据统计 试验数据采用SPSS 19.0软件进行分析,试验结果以“平均值±标准差”表示,用单因素方差分析差异显著性,P<0.05表示差异显著。
2.1 益生菌制剂对水貂生长性能的影响 由表2可知,试验2、3、4组的ADFI均高于1组,但是差异不显著(P>0.05);试验3、4组的ADG显著高于1组 (P<0.05),分别提高38.8%、31.8%(P<0.05),2组高于 1组,但差异不显著(P > 0.05),试验 2、3、4 组之间差异不显著(P > 0.05);试验 3、4组的F/G显著低于1组 (P<0.05),分别降低18.6%、16.2%(P < 0.05),2组低于 1组,但差异不显著 (P>0.05);试验2、3、4组之间差异不显著(P > 0.05)。
2.2 益生菌制剂对水貂免疫指标的影响 由表3可知,试验 2、3、4 组血清 IgM、IgA、IL-6 含量均高于 1组,但是差异不显著(P > 0.05);试验 3、4组血清中IgG含量显著高于1组(P<0.05),分别提高 23.5%、14.8%(P<0.05),2组高于 1组, 但差异性不显著(P > 0.05),试验 2、3、4 组之间差异不显著(P>0.05);试验 3、4组血清中IL-2含量显著高于 1组(P < 0.05),分别提高 10.2%、8.2%(P <0.05),2组高于 1组,但差异性不显著(P> 0.05),试验 2、3、4组之间差异不显著(P > 0.05)。
表2 益生菌制剂对水貂生长性能的影响
表3 益生菌制剂对水貂免疫指标的影响ng/mL
益生菌制剂被广泛应用于畜禽养殖中,具有提高动物生长性能的作用。崔一喆等(2017)报道,益生菌可以提高梅花鹿生长性能。田浪等(2017)等报道,益生菌可以提高肉鸡生长性能。本试验结果表明,试验 2、3、4组的 ADFI均高于 1组(P>0.05),试验 3、4组的 ADG分别较 1组提高38.8%、31.8%(P < 0.05),F/G 分别较 1组降低18.6%、16.2%(P<0.05)。因而证实益生菌制剂可以提高水貂的生长性能。益生菌在动物肠道中可以抑制致病菌群的生长繁殖,促进营养物质在肠道内的消化吸收,提高营养物质的转化率,从而提高水貂的生长性能。
免疫球蛋白介导体液免疫,是评价免疫机能的重要指标之一,免疫球蛋白IgG在抗感染免疫中起着重要作用,IgA主要参与黏膜免疫,IgM是机体免疫中最早出现的抗体,具有很强的杀菌功能(张召兴,2017)。IL-2又称T细胞生长因子,可以刺激T淋巴细胞增殖,还可以调节B淋巴细胞和抗体产生,在免疫过程中具有重要作用 (宋丽霞,2011)。细胞因子IL-6主要参与机体的体液免疫和细胞免疫,是免疫系统中重要的细胞因子(宋巴达玛,2010)。因此,血清中 IL-2、IL-6含量的高低可直接反映机体的免疫功能。本试验结果表明,试验 2、3、4 组血清中的 IgM、IgA、IL-6 含量均高于 1组(P > 0.05),试验 3、4组血清中 IgG、IL-2含量较1组相比分别提高23.5%、14.8%、10.2%、8.2%(P<0.05)。因而证实益生菌制剂可以提高水貂的免疫水平。可能由于益生菌所含的物质可以刺激机体的免疫系统,促进抗体分泌合成,从而增强机体免疫功能。与裴跃明等(2016)、乜豪等(2018)报道的一致。但益生菌制剂提高免疫机能的机理尚未明确,有待进一步研究。
本试验条件下,在基础饲料中添加1.0%益生菌制剂可以显著提高水貂的生长性能和免疫指标。