产金属酶的肠杆菌科细菌耐药表型研究

徐淼，郭文臣，李世荣

潍坊市人民医院检验科，山东 潍坊 261041

抗生素药物在临床治疗中发挥着较为重要的作用。随着抗生素药物的广泛使用，细菌的耐药性开始成为患者治疗效果的主要影响因素。以产金属酶的肠杆菌科细菌为例，金属β-酰胺酶为产金属酶的肠杆菌科细菌的代表元素，次活性部位以金属离子为主，是借助金属离子发挥催化活性的酶类物质。此种物质的活性并不能为青霉素类药物、头孢菌素类药物及碳青霉烯类药物所控制。既有研究结果表明，此种物质的耐药基因多集中于细菌染色体、质粒及转座子等区域，耐药基因的存在方式以基因盒的形式为主。整合子在同种细菌及不同种细菌中的基因水平转移，会让此类细菌的耐药基因呈现出快速传播的特点。

1 产金属酶的肠杆菌科细菌的耐药基因传播与多重耐药性分析

1.1 产金属酶的肠杆菌科细菌的耐药基因的传播 根据既有研究结果，肠杆菌科细菌所具有的获得性耐药基因多位于其他耐药基因决定簇中的整合子[1]。在与其他耐药基因中的移动基因元件相结合的情况下，产金属酶的肠杆菌科细菌耐药性可以借助质粒及转座子，在同种细菌及不同细菌之间完成基因水平转移。转化方式、转导方式与接合方式也可以被看作是产金属酶的肠杆菌科细菌耐药表型船舶方式。在耐药基因在菌株间传播的情况下，转座接合方式在致病菌流行过程中发挥着较为重要的作用。通过对质粒内的基因组进行分析，在存在于不同质粒中的插入序列存在一定差异的情况下，插入序列的差异性也会让耐药基因的传播效率有所提升。在细菌耐药性研究方面，研究者多认为产金属酶的肠杆菌科细菌的耐药基因的传播过程已经在一定程度上突破了普通细菌之间的局限性，与之相关的传播机制的研究，在疾病治疗及疫情控制等方面均发挥着较为重要的作用[2]。为控制耐药基因的水平传播，相关人员需要读细菌的播撒路径进行控制。如在产金属酶的肠杆菌科患者进入重症监护病房以后，相关人员需要通过合理使用抗生素类药物的方式清除细菌，避免耐药菌与耐药基因的传播，相关人员也需要对手部卫生及环境卫生进行关注，并要及时对污染物品进行消毒处理。规范化的管理措施与无菌操作理念的有效落实，也可以避免交叉感染的出现。

1.2 产金属酶的肠杆菌科细菌的多重耐药性分析 在临床医学领域，多重耐药性主要指的是细菌对3种及3种以上的药物的耐药性。通过对此类细菌的耐药基因传播路径进行分析，与细菌耐药基因传播路径有关的可移动介导元件中包含有耐非β-内酰胺类抗生素的相关基因，如磺胺类基因及喹诺酮类基因是可移动介导元件中较为常见的基因。这一研究结果表明产金属酶的肠杆菌科细菌的多重耐药性是多因素的综合作用下的产物，耐药基因短时期内的大规模传播，会给抗生素药物的临床应用及卫生防疫工作带来一定的挑战。除基因因素以外，外膜蛋白缺失、药物作用靶位变化及青霉素结合蛋白变化等因素的出现，也会在改变细菌与抗生素之间的亲和力及提升主动外排系统的活跃性的基础上，诱发多重耐药性的出现。

2 产金属酶的肠杆菌科细菌耐药表型检测方法

现阶段应用于产金属酶的肠杆菌科细菌耐药表型检测的表型检测方法可分为以下内容：一是，基于2-巯基乙醇的协同试验方式；二是，基于EDTA双纸片技术的协同试验方式；三是基于吡啶二羧酸的复合纸片技术；四是，基于EDTA的复合纸片技术。根据表型检测的实施效果，EDTA双纸片协同试验可表现出灵敏度高与特异度高的优势。在反应底物选择过程中，研究者多认为亚胺培南为更理想的反应底物。现阶段表型检测技术可以表现出简单实用的优势，上述检测方式可在多种不同实验室中得到应用，但仅限表型的筛查与确认。

改良碳青霉烯灭活实验也是适用于产金数米诶的肠杆菌科细菌耐药表型检测的表型检测方式。在此种技术应用以后，研究者利用1 μL接种环，将待测菌株置入2 mL肉汤之中，在震荡混匀15 s以后，将MEM纸片放入含有待测菌株的肉汤，后在25oC分温水中放置4 h。此种实验方式的产金属酶的肠杆菌科细菌的阳性率可以达到98.1%[3]。实验方式也可以发挥出成本低与操作简单的优势。

基因检测技术叶也在表型检测分析过程中发挥着较为重要的作用。以实时荧光定量聚合酶链反应技术为例，在病原体分离的初始阶段，此种技术可以以快速合成的基因为阳性对照物，开展致病基因检测，此种检测方式可以让基因的检测效率得到一定程度负担提升，也可以二位稀缺样品的病原监测提供一定的支持。环节到恒温扩增技术可以在恒温环境下进行，在试验实施过程中，反应引物可以在无需温度循环的情况下，识别目标序列去种更多的把序列，可以让基因检测技术的灵敏度与特异度得到有效提升[4]。免疫层析技术也具有一定的实用性，此种群检测技术也可以呈现出灵敏度高与特异度高的优势。

3 结语

肠杆菌科细菌是临床治疗中常见的细菌类型。产金属酶的肠杆菌科细菌的耐药性是临床研究领域所关注的内容。受新型超级耐药基因及青霉烯酶类抗生素的使用现状的影响，产金属酶的肠杆菌科细菌的耐药情况已经呈现出了严峻化的特点。在对与之相关的表征因素进行分析的基础上，加强细菌耐药性监测，是抗生素药物治疗方面不可忽视的内容。