血清同型半胱氨酸、胱抑素C及β2微球蛋白联合检测对2型糖尿病肾病的诊断价值

邵从军，沈莉，卜文君,秦淑国

糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)是临床上多见、好发、且最严重的糖尿病并发症之一。糖尿病肾病是糖尿病全身性微血管病变表现之一，主要表现为糖尿病性肾小球硬化症，早期肾体积增大，肾小球滤过率增加，逐渐出现蛋白尿，晚期出现肾衰竭，DN位列慢性肾衰竭病因第3位[1]。DN临床上无明显症状和体征较易被忽视，为此对DN的早期诊断至关重要[2]。本文就血清同型半胱氨酸(homocysteine,HCY)、胱抑素-C(CystatinC,Cys-C)及β2微球蛋白(β2-microglobulin,β2-MG)联合检测对2型糖尿病肾病的诊断价值行探讨。

1 资料与方法

1.1研究对象健康对照组：选择皖北煤电集团总医院体检中心健康体检者50例，男25例，女25例，年龄(45.9±15.1)岁，年龄范围为23～78岁。均排除高脂血症、高血压、糖尿病、心脑血管疾病及肝肾疾病。

糖尿病肾病组(DN组)：选择2014年12月至2016年5月在皖北煤电集团总医院内分泌科和肾内科住院的2型糖尿病病人200例，男120例，女80例，年龄(58.6±14.0)岁，年龄范围为23～92岁，均明确诊断为糖尿病肾病病人(包括体征、实验室检查诊断符合WHO诊断标准[2])。参照Mogensen提出的标准，依据尿白蛋白排泄率(urinary albumin excrtionrates,UAER)，并结合临床表现将DN组分为3组：①单纯糖尿病组(SDM组，即正常白蛋白尿组，UAER<30 mg/24 h)；②早期糖尿病肾病组(EDN组，即微量白蛋白尿组，UAER 30～299 mg/24 h)；③临床糖尿病肾病组(CDN组，即大量白蛋白尿组，UAER ≥300 mg/24 h)[3]。本研究得到了皖北煤电集团总医院医学伦理委员会批准，健康体检者和病人均签署了知情同意书。

1.2仪器和方法所有人员均空腹8 h以上，次日清晨在无应激的情况下采集肘静脉血3～5 mL，以3 000 r/min离心10 min，检测HCY、Cys-C、β2-MG、尿素(Urea)和肌酐(Cre)含量。Cys-C、HCY、Urea和Cre使用北京九强生物技术有限公司生产的试剂及配套的校准品和质控品，β2-MG使用北京万泰德瑞诊断技术有限公司生产的试剂及配套的校准品和质控品，在日立7600-020全自动生化分析仪上进行检测。所有测定均严格按照实验室标准操作规程操作。

2 结果

2.1DN病人和健康对照组血清HCY、Cys-C、β2-MG、Urea和Cre水平比较DN组病人HCY、Cys-C、β2-MG、Urea和Cre水平均明显高于健康对照组，差异有统计学意义(P<0.01)。见表1。

2.2SDM、EDN、CDN和对照组HCY、Cys-C和β2-MG水平比较CDN组HCY、Cys-C和β2-MG水平均明显高于SDM组、EDN组和对照组(P<0.01)，EDN组HCY、Cys-C和β2-MG水平均明显高于SDM组和对照组(P<0.01)，SDM组Cys-C和β2-MG水平均明显高于对照组(P<0.01)，但SDM组HCY与对照组差异无统计学意义(P>0.05)。见表2。

2.3ROC曲线分析HCY、Cys-C和β2-MG单独和联合检测对糖尿病肾病诊断的能力评价ROC曲线下面积HCY+Cys-C+β2-MG联合检测最大、Cys-C和β2-MG次之、HCY最小，表明HCY+Cys-C+β2-MG联合诊断的诊断能力最大，各指标ROC曲线和曲线下面积见图1和表3。

2.4血清HCY、Cys-C和β2-MG单独和联合检测对糖尿病肾病诊断的效能评价从ROC曲线中计算得出约登指数，以约登指数最高值所对应的截断点作为最佳诊断临界点，从SPSS 19.0输出的表中查得HCY、Cys-C和β2-MG的临界值分别为15.6 μmol/L、0.87 mg/L和1.7 mg/L。根据此临界值计算单项和联合检测的灵敏度、特异度、符合率、阳性预测值和阴性预测值，结果见表4。从表4可见联合检测的灵敏度、特异度、符合率、阳性预测值、阴性预测值和约登指数均是最大，表明联合检测的效果要优于单独检测。

表1 DN组病人和健康对照组血清HCY、Cys-C、β2-MG、Urea和Cre水平比较

表2 SDM、EDN、CDN和对照组HCY、Cys-C和β2-MG水平比较

注：与对照组比较，aP<0.05；与EDN组比较，bP<0.05；与CDN组比较，cP<0.05

表3 HCY、Cys-C和β2-MG单独和联合检测的ROC曲线下面积

图1 HCY、Cys-C和β2-MG单独和联合检测的ROC曲线

表4 血清HCY、Cys-C和β2-MG单独和联合检测对糖尿病肾病诊断的效能评价/%

3 讨论

DN是糖尿病引起的危害性最大的一种慢性并发症，是糖尿病全身性微血管病变表现之一，临床特征为蛋白尿、渐进性肾功能损害、高血压和水肿，晚期出现严重肾功能衰竭，是糖尿病病人的主要死亡原因之一[2]。有研究发现HCY、Cys-C和β2-MG在糖尿病肾病的诊断中有一定价值，因此关于HCY、Cys-C和β2-MG在糖尿病肾病诊断的研究越来越多，但是关于这三个指标联合检测对糖尿病肾病的诊断研究还较少[4-11]。

本研究中通过与健康对照组比较发现DN病人HCY、Cys-C、β2-MG、Urea和Cre水平均明显著高于健康对照组(P<0.01)，表明HCY、Cys-C、β2-MG、Urea和Cre有助于DN的诊断。UAER测定常被用于诊断DN，在糖尿病时UAER增加常伴随有肾小球滤过率增加，其改变与糖尿病肾病的进程密切相关，临床界定诊断为微量白蛋白尿的标准是尿液白蛋白排泄率(UAER)为每24小时30～299 mg[3]。本文参照Mogensen提出的标准并结合临床表现将实验组分为3组：①单纯糖尿病组(SDM组，即正常白蛋白尿组，每24小时UAER<30 mg);②早期糖尿病肾病组(EDN组，即微量白蛋白尿组，每24小时UAER 30～299 mg)；③临床糖尿病肾病组(CDN组，即大量白蛋白尿组，每24小时UAER≥300 mg)。本研究中分析了HCY、Cys-C和β2-MG三个指标在SDM组、EDN组合CDN中的变化，发现CDN组HCY、Cys-C和β2-MG水平均明显高于另外三组(P<0.01)，EDN组HCY、Cys-C和β2-MG水平均明显高于SDM组和对照组(P<0.01)，SDM组Cys-C和β2-MG水平均明显高于对照组(P<0.01)，但是SDM组HCY与对照组无显著性差异(P>0.05)。表明HCY、Cys-C和β2-MG跟糖尿病肾病的病程相关性非常大，其浓度越大病程越重，尤其在SDM组中Cys-C和β2-MG明显高于对照组(P<0.01)，表明Cys-C和β2-MG在正常白蛋白尿组就可以辅助诊断糖尿病肾病，在早期糖尿病肾病的诊断价值优于UAER。

本研究中采用ROC曲线分析了HCY、Cys-C和β2-MG单独检测和联合检测对糖尿病肾病诊断的能力，发现ROC曲线下面积HCY+Cys-C+β2-MG联合检测最大、Cys-C和β2-MG次之、HCY最小，表明HCY+Cys-C+β2-MG联合诊断的诊断能力最大。从ROC曲线中计算得出约登指数，以约登指数最高值所对应的截断点作为最佳诊断临界点，从SPSS 19.0输出的表中查得HCY、Cys-C和β2-MG的临界值分别为15.6 μmol/L、0.87 mg/L和1.7 mg/L。根据此临界值计算计算获得单项和联合检测的灵敏度、特异度、符合率、阳性预测值和阴性预测值，发现联合检测的灵敏度、特异度、符合率、阳性预测值、阴性预测值和约登指数均是最大，表明联合检测的效果要优于单独检测。

综上所述，本研究通过对血清HCY、Cys-C和β2-MG联合检测对糖尿病肾病的诊断价值研究，发现HCY、Cys-C和β2-MG联合检测优于各指标单独检测，另外血清HCY、Cys-C和β2-MG水平可以用来评判糖尿病肾病的严重程度，对其早期诊断和疗效观测具有较高的临床参考价值。