3种形态饲料对大口黑鲈生长和免疫力的影响

陈度煌，何国森，刘银华，刘艳艳，李学贵

(福建省淡水水产研究所， 福建 福州 350002)

大口黑鲈Micropterussalmoides，俗称加州鲈、淡水瓜，是典型淡水肉食性鱼类。大口黑鲈因生长快，抗病力强，肉质鲜美细嫩，营养价值高，经济价值高，深受养殖者和消费者青睐[1]。在全国的养殖市场年产量达到30万t，在国内特种鱼养殖上，算是产量比较大的品种。目前，大口黑鲈养殖仍以投喂冰鲜小杂鱼为主，另外2种配合饲料形式是软颗粒饲料与膨化颗粒饲料。大口黑鲈养殖中配合饲料使用量在整个大口黑鲈饵料使用量中的比重还很低，其中最主要的原因就是对大口黑鲈摄食特性和基本营养需求尚不十分清楚，导致配合饲料喂养大口黑鲈后期出现生长停滞、肝脏病变和疾病频发的状况，养殖后期只能转投冰鲜鱼，即便在养殖前期，使用冰鲜鱼养殖的总体比例还是比较大[2]。

虽然国内外对大口黑鲈配合饲料已有较多相关报道[3-7]，但对大口黑鲈的营养需求、配合饲料的应用和对大口黑鲈免疫力影响的研究仍较少，大口黑鲈成鱼营养需求及高效环保人工配合饲料的研究亟待解决。为此，本研究比较投喂膨化颗粒料、软颗粒饲料和冰鲜鱼3种形态的饲料对大口黑鲈生长速度、饲料效率及免疫力的影响，以期为大口黑鲈的养殖及配合饲料的研究开发提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 试验设计与试验用鱼

试验在南平市延平区欣欣鱼种场进行，网箱3.0 m×1.5 m×2.0 m。试验共设3组，每组设2次重复(把中位数当作第3次重复)，共计6个网箱。处理组1：投喂膨化颗粒饲料；处理组2：投喂自制软颗粒饲料(粉料，加水比例34%)；处理组3(CK)：投喂冰鲜鱼。试验用鱼驯养2周后，选取体质健康、规格一致的大口黑鲈360尾，平均体重为86.3 g·尾-1。每个网箱放养大口黑鲈60尾。试验期间水温为25.5～31.5℃，pH值为7.5～8.0，溶解氧值为4.5～6.0 mg·L-1。

1.2 试验饲料

膨化颗粒饲料为福建一家较大规模饲料公司生产的鲈鱼专用饲料。自制软颗粒饲料是用自配粉料加一定比例的水搅拌混合，再用软颗粒机挤压成型，可以直接投喂或冷冻投喂的饲料；自配粉料由进口鱼粉、α-淀粉、豆粕、啤酒酵母、渔用多维多矿、免疫促生长剂、胆碱、甜菜碱等原料组成，各种原料粉碎后90%以上过60目筛，按配比准确称量，混合均匀。冰鲜鱼为市售冰鲜蓝圆鲹Decapterusmaruadsi，切成小块投喂。3种形态饲料营养成分的测定值如表1所示。

表1 3种形态饲料营养成分

注：表中数值均为平均值；括号外数值以鲜样计的含量,括号内数据为折算成以干物质计的含量。

1.3 饲养管理

(1)对给定的饲料严格按组投喂，每日投饵2次，软颗粒饲料当天投喂不完的放入冰柜贮存。投饵量根据天气、水温、鱼摄食状况而定，以试验鱼不再活跃摄食为度，每天详细记录各组别的实际摄食量。

(2)每天记录各网箱鱼的活动情况等，若有死亡，进行称重，做好记录。每天定时测定水温，溶解氧。

(3)试验时间为2018年7月25日至9月22日，共计60 d。

1.4 试验测定指标和方法

1.4.1生长性能 试验结束时，停食1 d后，对网箱里的大口黑鲈进行计数，测定总重，抽样测定体长、体重。生长效果测定指标：

尾绝对增重=试验结束尾重-试验开始尾重

增重率=(尾绝对增重/试验开始尾重)×100%

日增重=尾相对增重/试验天数

丰满度=鱼体重×100/[鱼体长]3

成活率=(成活尾数/总尾数)×100%

饲料系数=总投饵量/鱼体总增重量

蛋白质效率(PER)=[(试验结束时鱼体总重-试验开始时鱼体总重)/(总投饵量×饲料蛋白质含量)]×100%

1.4.2血清免疫指标 试验结束时，每桶随机取鱼5尾，断尾取血，3 000 r·min-1，离心5 min,取上层血清冷冻备用，测定大口黑鲈非特异性免疫力。超氧化物歧化酶活力(SOD)、溶菌酶活力(LSZ)、碱性磷酸酶活力(AKP)3种酶活力测定，均采用南京建成生物工程研究所提供的试剂盒，试验过程严格按照试剂盒使用说明进行，计算方法参照试剂盒说明书。

1.5 数据统计与分析

试验数据采用Microsoft Excel作初步处理，先对试验数据作方差分析，若有显著差异，再作Duncan氏多重比较。

2 结果与分析

2.1 3种形态的饲料对大口黑鲈生长性能的影响

从表2可以看出，处理组3(CK)投喂冰鲜鱼的大口黑鲈生长速度最快，尾绝对增重达115.97 g，其次是处理组2，处理组1投喂膨化颗粒饲料的大口黑鲈生长最慢，只有109.75 g。处理组1、处理组2、处理组3(CK)相对增重率分别为126.92%、127.40%、136.12%。在饲料系数方面，以干物质计，处理组2饲料系数为1.45，低于处理组1(1.55)。在蛋白质效率方面，处理组2最高，达到128.66%，显著高于处理组1和处理组3(CK)(P<0.05)。在丰满度方面，处理组3(CK)达到1.61 g·cm-3，显著高于处理组2、处理组1(P<0.05)。

表23种形态饲料对大口黑鲈生长性能的影响

Table 2 Effects of three kinds of feed on the growth performance of largemouth bass

生长性能指标组别123(CK)平均初重(g·尾-1)86.4787.2385.20平均末重(g·尾-1)196.22198.36201.17尾绝对增重(g)109.75111.13115.97增重率(%)126.92 a127.40 a136.12 b日增重(g)1.831.852.27丰满度(g·cm-3)1.53 a1.53 a1.61 b成活率(%)90.8387.5089.17饲料系数1.702.155.52饲料系数(以干物质计)1.55 a1.45 b1.39 b蛋白质效率(%)(以干物质计)121.03 a128.66 b119.36 a

注：表中数值均为平均值；同行数据后不同小写字母表示差异显著(P<0.05)，相同小写字母表示差异不显著。

2.2 3种形态饲料对大口黑鲈免疫力的影响

由表3可知，在碱性磷酸酶活力方面，处理组3(CK)活力最强，处理组2、处理组3(CK)显著高于处理组1(P<0.05)；在溶菌酶活力方面，处理组1、处理组2、处理组3(CK)数值差异不显著(P>0.05)；在总超氧化物歧化酶活力方面，处理组2、处理组3(CK)活力最强，达到141.18、140.33 U·mL-1，显著高于处理组1(P<0.05)。

表33种形态饲料对大口黑鲈免疫力的影响

Table 3 Effects of three kinds of feed on the immunity of largemouth bass

组别碱性磷酸酶活力(U·L-1)溶菌酶活力(ug·mL-1)总超氧化物歧化酶活力(U·mL-1)135.2±1.8 a1.87±0.15 a129.26±11.20 a238.8±2.6 b1.82±0.18 a141.18±13.15 b3(CK)39.3±3.3 b1.85±0.27 a140.33±15.83 b

注：表中数值均为平均值±标准差；同列数据后不同小写字母表示差异显著(P<0.05)，相同小写字母表示差异不显著。

3 讨论与结论

3.1 讨论

3.1.13种形态饲料对大口黑鲈生长性能的影响 大口黑鲈是凶猛的肉食性鱼类，对蛋白质的需求较高，在本试验中，投喂的冰鲜鱼以干物质计算，蛋白质含量达到67.48%，高于其他2个处理组，充分满足了大口黑鲈的生长需要，所以投喂冰鲜鱼的大口黑鲈生长速度最快。处理组3(CK)大口黑鲈抢食较凶，可能是因为大口黑鲈的遗传特性决定了对摄食冰鲜鱼更加适应，这与大口黑鲈的肉食性特点相吻合[8]。处理组3(CK)的丰满度显著高于其他处理组(P<0.05)，说明在大口黑鲈生长过程中，冰鲜鱼提供的营养物质得到较充分的消化、吸收、利用，并造成一定的脂肪沉积。

与处理组3(CK)相比，处理组2饲料系数(以干物质计)虽小幅高于处理组3(CK)，低于处理组1，但蛋白质效率最高，主要是因为软颗粒饲料与小杂鱼一样，更适合肉食性鱼类的摄食习性，适口性好，因而集群性好，抢食性旺盛。此外，自制软颗粒饲料营养水平更加平衡，氨基酸组成更加合理，消化率高，避免了蛋白质的浪费。有研究表明[9-11]，在大口黑鲈养殖过程中，氨基酸、脂肪酸、纤维素等营养素的平衡性起着重要作用，并非都是饵料投喂量越多，鱼生长越快。目前，有关大口黑鲈营养需求的研究仍十分缺乏，大口黑鲈营养需求及高效环保人工配合饲料的研究已成鱼类营养学一个重要而复杂的研究课题，一直是营养研究人员努力的目标。

3.1.23种形态饲料投喂大口黑鲈的优缺点 目前大口黑鲈养殖生产中大部分还是以投喂小杂鱼为主，小杂鱼货源供应受休渔期和季节的制约，鲜度和品质不好保证，质量波动很大，不同品种的小杂鱼或同一品种不同地区、不同季节都会有差异。另外使用小杂鱼对渔业资源破坏很大；更主要的是小杂鱼残饵对水质影响相当严重，严重影响了大口黑鲈养殖业的可持续发展和养殖效益。使用配合饲料投喂大口黑鲈，对于获取更大的养殖经济效益和生态效益均具有重要意义[12]。

从商品化的角度上讲，膨化颗粒饲料将是配合饲料的发展方向，但也存在着适口性差、对热敏性成分破坏严重、投饵率不稳定、消化率低等缺点，且在大口黑鲈的使用上，已经证明容易导致肝胆疾病，无法全程取代小杂鱼。

软颗粒饲料可根据大口黑鲈的营养需要配制，产品质量稳定，营养全价平衡，可免除膨化颗粒饲料制粒时的加热和干燥过程，避免营养成分的损失，特别是蛋白质和热不稳定性维生素的破坏。同时，便于针对防病、治病的需要添加药物，科研和开发上使用价值高。但大口黑鲈软颗粒饲料的推广使用也存在一定的瓶颈，比如软颗粒饲料加工、运输、贮存不方便，需要机械和冻库，使用过程中溶失率高等。因此，在使用软颗粒饲料过程中，如何根据实际需要，扬长避短，有待今后进一步研究。

3.1.33种形态饲料对大口黑鲈免疫力的影响 鱼类是低等脊椎动物，特异性免疫机制还不完善，非特异性免疫在防御病原体感染中具有非常重要的意义[13]。目前，大口黑鲈高密度集约化养殖所导致疾病时有发生，提高其非特异性免疫力就成为防病的关键。非特异性免疫功能在草鱼、罗非鱼、鲤鱼等的研究较多，但在大口黑鲈上的研究还非常少[14]。本试验在不添加其他免疫增强剂的情况下，比较分析投喂冰鲜鱼、自制软颗粒饲料、膨化颗粒饲料对大口黑鲈免疫力的影响，为大口黑鲈健康养殖提供参考。

超氧化物歧化酶、碱性磷酸酶、溶菌酶是评价鱼类非特异性免疫力的常用指标。超氧化物歧化酶(SOD)是机体抗氧化酶之一，有消除超氧阴离子自由基、抗氧化、防御机体衰老、预防生物分子损伤的作用，其活性与鱼体的免疫水平关系紧密，对于增强吞噬细胞防御能力和机体免疫功能有重要作用。溶菌酶(LSZ)在机体免疫过程中，通过催化水解细菌细胞壁黏肽的乙酰胺基多糖，导致细菌裂解死亡。同时能清除其他抗菌因子作用后所残余的细菌细胞壁，并增强其他免疫因子的抗菌敏感性，诱导调节其他免疫因子的合成与分泌，抵制外来病原的入侵。碱性磷酸酶(AKP) 是磷酸酶的一种，能够通过改变病原体的表面结构，增强机体对病原体的识别和吞噬能力，起着调理素的作用，加速吞噬细胞的吞噬和病原体的降解速度，进而提高鱼体的抗病力[15-18]。在本研究中，溶菌酶活力方面，投喂3种形态饲料数值差异不显著，原因有待进一步研究；但在碱性磷酸酶、总超氧化物歧酶方面，投喂冰鲜鱼和投喂自制软颗粒饲料都显著高于投喂膨化颗粒饲料，这说明冰鲜鱼、自制软颗粒饲料更符合大口黑鲈的摄食习性及生长的营养要求，提高了大口黑鲈对疾病的抵抗力。

3.2 结论

综上所述，膨化颗粒饲料、软颗粒饲料与冰鲜鱼3种不同形态的饲料对大口黑鲈生长和免疫力影响的研究表明，大口黑鲈投喂冰鲜鱼生长速度最快，其次是投喂自制软颗粒饲料，最后是投喂膨化颗粒饲料；投喂冰鲜鱼和自制软颗粒饲料系数最低；投喂自制软颗粒饲料蛋白质效率最高；与膨化颗粒饲料相比，冰鲜鱼、软颗粒饲料具有改善大口黑鲈非特异性免疫功能的作用。数据显示，免疫力与生长性能存在一定的正相关，非特异性免疫力高，生长性能也更好。综合分析生长和免疫力指标，研究认为使用自制软颗粒饲料养殖大口黑鲈，可以实现与冰鲜鱼养殖较为一致的效果，本试验中的软颗粒饲料是值得推广的一种优质高效配合饲料。可根据大口黑鲈营养需求，优化饲料配方，生产出优质可靠的配合饲料，逐步替代冰鲜鱼的使用，满足大口黑鲈大规模人工养殖的需求。