三种尿液干化学分析仪检测一致性的比较*

王刚强，程 翔，杨丽华，何 娟，卢 佩，汪 沛，李程华，杨若凡，郑善銮，郝晓柯

(空军军医大学第一附属医院全军临床检验医学中心，西安 710032)

尿常规检查是临床筛查疾病最简单、有效的检查之一，尿液干化学分析仪是最常用的筛查仪器。随着各大医院病员量的持续增加，检验科常会有多台尿干化学分析仪，这些仪器有同一厂家不同型号或不同厂家不同型号，仪器之间的可比性就显得尤为重要。西京医院检验科共有三种型号尿液干化学分析仪，分别为罗氏Urisys2400，爱科来AX4030和美侨Mejer60，本实验就三种型号尿液和干化学分析仪检测结果的一致性进行研究，包括酸碱度(pH)、比重(SG)、红细胞(ERY)、白细胞(LEU)、蛋白(PRO)、葡萄糖(GLU)、胆红素(BIL)、酮体(KET)、亚硝酸盐(NIT)和尿胆原(BUG)，同时通过确证实验，对所有尿液标本的ERY，LEU和PRO进行确认，分别计算三台仪器各自符合率和假阴性率，现汇报如下。

1 材料和方法

1.1 标本来源 汇总西京医院检验科2017年1月～2018年6月期间3次三种干化学分析仪的比对结果(每半年比对一次)，每次选择门诊新鲜尿液标本100份，共计300份标本，2 h内完成。

1.2 仪器和试剂 Urisys2400，AX4030，Mejer600及其配套试纸条，Urisys 2400 Cassette，Aution Sticks 10EA，Mejer-11SL，伯乐尿液干化学质控品，奥林巴斯CX-41显微镜，湖南赛特湘仪TD5M-WS离心机，万华普曼潜血(OB)试纸条，酒精灯，5 ml/dl冰醋酸。

1.3 方法 Urisys2400为西京医院检验科参加卫生部室间质评的仪器，近3年室间质评回馈结果100%通过，故选择Urisys2400为靶机。AX4030，Mejer600分别与Urisys2400进行比对，计算结果的阳性检出率和符合率。通过确证实验[1，2]，对所有尿液标本的ERY，LEU和PRO进行确认，分别计算三台仪器各自符合率和假阴性率，其中ERY确证实验为免疫胶体金法，使用万华普曼潜血(OB)试纸条，评判标准为质控线和反应线均为阳性；LEU确证实验为离心镜检法(因检测原理限制，此确证实验实为替代确证实验，用来评价干化学法LEU亦有局限性，但目前尚无更好的方法替代)，10 ml尿液1 500 r/min离心5 min，留0.2 ml混匀后制片，>5个/HP为阳性；PRO确证实验为醋酸加热法，评判标准为呈明显白雾状。

1.4 统计学分析

1.4．2 其余项目统计方法：数据采用SPSS24.0软件统计，分别计算Urisys2400，AX4030和Mejer600的阳性检出率，其中各仪器等级设置均遵循仪器说明书设置，再以Urisys2400为靶机，分别计算AX4030，Mejer600的χ2值，P<0.05为差异具有统计学意义。同时以Urisys2400为靶机分别判断AX4030，Mejer600 的一致性，以一般符合率(检测结果阴阳性不能跨级，阳性结果不超过一个数量等级，样本数占总样本数的比率)、完全符合率(检测结果完全相同样本数占总样本数的比率)来表示，用加权Kappa判断[4]，其中Kappa≥0.4时表示一致性良好，Kappa≥0.75时表示高度一致，Kappa=1时表示完全一致；计算三种仪器与确证实验的符合率及假阴性率。

2 结果

项 目仪器 x d(%)结果(%)pH SG Urisys2400AX4030Mejer600Urisys2400AX4030Mejer6005.976.136.431.019 91.020 31.022 9-2.687.67-0.0380.295-<10<10-<1<1

图1 AX4030，Mejer600 pH成对差异百分率均值分布情况 图2 AX4030，Mejer600 SG成对差异百分率均值分布情况

2.2 三种仪器部分项目阳性检出率 见表2。AX4030与Urisys2400相比，ERY，PRO阳性检出率差异有统计学意义(χ2=5.114，5.921，均P<0.05)；Mejer600与Urisys2400 相比，ERY阳性检出率差异有统计学意义(χ2=5.692，P<0.05)；其他项目阳性检出率AX4030与Urisys2400，Mejer600比较差异均无统计学意义。

表2 三种仪器部分项目阳性检出率(%)

注：*与靶机Urisys2400比较。

2.3 以Urisys 2400为靶机，AX4030，Mejer600部分项目一般符合率及完全符合率结果 见表3。除SG，pH外其它项目一般符合率均>80%，Kappa>0.4，结果一致性良好。

表3 AX4030，Mejer600部分项目一般符合率及完全符合率(%)

2.4 Urisys2400，AX4030，Mejer600部分项目确证实验结果 见表4。

表4 三种仪器部分项目确证实验结果(%)

3 讨论

尿液干化学分析仪作为尿液初筛的常规仪器，不仅操作方便、检测迅速、结果准确度高，而且随着技术的不断发展，目前大多数厂家干化学分析仪自动化程度都很高，易于普及使用。不同厂家的分析仪器均有各自配套的专用试纸条，但基本反应原理大致相同，仅在仪器灵敏度、检测范围、等级对应浓度上略有差别，详见各厂家试纸条说明书，本次实验，三种型号仪器部分项目结果不尽完全一致，与此相关。

三种仪器pH检测范围均在5.0～9.0之间，Urisys 2400除外6.0～6.5以0.5为一个等级，其余均以1.0为一个等级，AX4030，Mejer600以0.5为一个等级。依据表1结果，AX4030，Mejer600与靶机Urisys 2400 pH均值差异百分率<10%，一致性符合要求，从图1我们可以得出AX4030 pH均值差异百分率离散程度较Mejer600小，说明AX4030 pH结果更接近靶机Urisys 2400。SG检测范围均在1.000～1.030之间，Urisys 2400及AX4030以0.001为一个反应级别，Mejer600以0.005为一个反应级别，从反应灵敏度来说Urisys 2400，AX4030优于Mejer600，依据表1结果AX4030，Mejer600与靶机Urisys 2400 SG均值差异百分率<1%，一致性符合要求，同样从图2我们可以得出AX4030 SG均值差异百分率离散程度较Mejer600小，说明AX4030 SG结果更接近靶机Urisys 2400。

表2显示三种仪器ERY，LEU，PRO，GLU，BIL，KET，NIT和UBG阳性检出率及AX4030，Mejer600与靶机Urisys 2400的比较结果，ERY AX4030，Mejer600P<0.05%，存在显著差异，分析主要原因为仪器灵敏度，Urisys 2400灵敏度为7个ERY/μl，AX4030，Mejer600灵敏度为10个ERY/ μl，因此Urisys 2400 ERY检测更灵敏些。PRO AX4030，存在显著差异(P<0.05)，同样也是因为AX4030灵敏度为0.15 g/L，较Urisys 2400灵敏度0.18 g/L为高所致。在临床工作中，不同仪器同一项目不仅灵敏度存在差异，等级浓度也常不对应。表3显示以Urisys 2400为靶机AX4030，Mejer600 ERY，LEU，PRO，GLU，BIL，KET，NIT，UBG一般符合率均>80%，Kappa均>0.4，结果显示AX4030，Mejer600与Urisys 2400一致性良好。对于ERY，LEU，PRO干化学分析仪检测影响因素较多[5]，故对实验标本做确证实验，结果如表4。ERY符合率为69.8%～79.3%，这可能与尿液中的干扰因素如对热不稳定酶、肌红蛋白、氧化剂、产过氧化物酶的细菌等造成的假阳性相关。假阴性率为7.2%～12.4%，可能为尿液中含大量Vit C，甲醛等还原性物质相关。LEU符合率为70.1%～76.2%，这可能与尿液中含有非那吡啶、呋喃妥因等泌尿系统治疗类药物及高BIL，高GLU，高PRO标本较多相关。假阴性率为17.4%～29.6%，除了化学干扰因素之外，可能与LEU的确证实验替代实验为离心镜检法相关，干化学法LEU是检测白细胞中性脂酶，而淋巴细胞、单核细胞等胞内不含中性酯酶，因此镜检可看到完整的淋巴细胞、单核细胞而干化学法无法检测，常见于肾移植排斥、泌尿系统结核的疾病，且对于溶解的中性粒细胞，干化学法仍可检测中性酯酶，但镜检无法计数溶解的细胞成分，这也是导致LEU干化学法假阴性率偏高的原因。PRO符合率为63.3%～88.3%，假阴性率为4.2%～15.9%，这与干化学法PRO的灵敏度和特异度相关，试纸条对清蛋白敏感，而对球蛋白的灵敏度为清蛋白的1/100～1/50，可漏检本周蛋白等球蛋白，也可能与尿液中含有季铵盐、洗必泰等消毒药水及服用奎宁、奎宁丁、大剂量青霉素等药物相关。通过比较确证实验结果，Urisys 2400 ERY符合率79.3%，AX4030 PRO 符合率88.3%，较其余两台仪器高，三种仪器LEU假阴性率均较高。因为干化学法检测原理限制、干扰因素较多等原因，在临床工作中需通过尿干化学分析仪、尿液沉渣分析仪组成流水线，交叉互检，并制定相应的显微镜复检规则，降低假阴性率。

综上所述，虽然AX4030，Mejer600与靶机Urisys 2400部分项目因为仪器灵敏度原因存在差异，但作为疾病初筛工具，其所达到的效果基本一致，均可满足临床需要，但对部分可疑标本，仍需结合其他沉渣仪器及确证实验综合分析。