人附睾蛋白4在慢性肾脏疾病中的表达水平及其诊断应用价值

叶雅丽 赵肖丽 任应鹏

[摘要] 目的 探讨人附睾蛋白4在慢性肾脏疾病中的表达水平及其诊断应用价值。 方法 随机选取2016年8月～2018年8月我院慢性肾脏疾病患者150例，将患者作为研究组，另随机选取同期我院健康体检人員150例作为对照组，采用免疫分析仪（Cobas E601，罗氏公司）及其配套试剂，运用化学发光法对两组人员的人附睾蛋白4（HE4）表达水平进行测定。采用生化分析仪（Advia 2400，西门子公司）及其配套试剂，运用酶法对两组人员的血肌酐（SCr）、尿素氮（BUN）表达水平进行测定，然后统计分析两组人员的血清HE4、SCr、BUN表达水平。 结果 研究组患者的血清HE4、SCr、BUN表达水平均显著高于对照组（P<0.05），临床分期1～2期、3期、4期、5期患者的血清HE4、SCr、BUN表达水平逐渐升高（P<0.05），均显著高于对照组（P<0.05）。慢性肾脏疾病诊断中HE4、SCr、BUN的AUC逐渐降低（P<0.05）。 结论 人附睾蛋白4在慢性肾脏疾病中的表达水平提升，能够对慢性肾脏疾病及其临床分期的诊断提供有效依据，具有较高的诊断应用价值，值得在临床推广应用。

[关键词] 人附睾蛋白4;慢性肾脏疾病;表达水平;诊断应用价值

[中图分类号] R692;R446          [文献标识码] A          [文章编号] 1673-9701（2019）36-0015-04

Expression level of human epididymis protein 4 in chronic kidney disease and its diagnostic application value

YE Yali   ZHAO Xiaoli   REN Yingpeng

Department of Clinical Laboratory， Taizhou First People's Hospital in Zhejiang Province， Taizhou   318020， China

[Abstract] Objective To investigate the expression level of human epididymis protein 4 in chronic kidney disease and its diagnostic application value. Methods A total of 150 patients with chronic kidney disease in our hospital from August 2016 to August 2018 were randomly selected. These patients were selected as the study group， and 150 who underwent healthy examination in our hospital in the same period were randomly selected as the control group. The immunoassay analyzer（Cobas E601， Roche） and its supporting reagents were used to measure the expression level of human epididymis protein 4（HE4） in the two groups by chemiluminescence method. The biochemical analyzer（Advia 2400， Siemens） and its supporting reagents were used to determine the serum creatinine（SCr） and urea nitrogen（BUN） expression levels of the two groups by enzymatic method. The serum HE4， SCr and BUN expression levels of the two groups were statistically analyzed. Results The serum levels of HE4， SCr， and BUN in the study group were significantly higher than those in the control group（P<0.05）. The serum levels of HE4， SCr， and BUN in patients with clinical stage 1-2， 3， 4， and 5 were gradually increased（P<0.05）， which were significantly higher than those of the control group（P<0.05）. The AUC of HE4， SCr and BUN decreased gradually in the diagnosis of chronic kidney disease（P<0.05）. Conclusion The expression level of human epididymis protein 4 in chronic kidney disease is improved. It can provide effective evidence for clinical diagnosis and clinical stage of chronic kidney disease. It has high diagnostic application value and is worthy of clinical application.

[Key words] Human epididymis protein 4; Chronic kidney disease; Expression level; Diagnostic application value

慢性腎脏疾病的发病机制为慢性肾脏结构与功能在原发或继发肾小球肾炎、肾小管损伤等作用下发生障碍，肾脏损害病史在3个月以上，伴或不伴影像学检查异常等、尿液或血液成分异常、肾小球滤过率（GFR）降低、不明原因GFR降低到60 mL/min以下3个月以上[1]。慢性肾脏疾病具有较高的发病率，近年来，其患病人数日益增加，患病年龄日益缩小，如果没有得到及时有效的救治，病情就会进一步恶化，进而向慢性肾功能不全、肾衰竭发展，严重的情况下形成尿毒症，对患者的生命安全造成严重威胁[2]。因此，有效治疗慢性肾脏疾病、改善患者预后，关键是要对其进行早期诊断。本研究探讨人附睾蛋白4在慢性肾脏疾病中的表达水平及其诊断应用价值。现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

随机选取2016年8月～2018年8月我院慢性肾脏疾病患者150例，年龄43～83岁，平均（63.2±14.1）岁。在临床分期方面，1～2期40例，3期45例，4期20例，5期45例。将患者作为研究组，另随机选取同期我院健康体检人员150例作为对照组，年龄44～83岁，平均（64.1±14.0）岁。两组人员的一般资料比较差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性。

1.2 方法

采集两组3～5 mL血液标本，放置在分离胶的真空采集管中，离心20 min，设定速率为3000 r/min，分离出血清标本，放置在EP管中，分装，每管400～500 μL，放置在-80℃冰箱中保存备用。采用免疫分析仪（Cobas E601，罗氏公司）及其配套试剂，运用化学发光法测定两组的人附睾蛋白4（HE4）表达水平。采用生化分析仪（Advia 2400，西门子公司）及其配套试剂，运用酶法测定两组的血肌酐（SCr）、尿素氮（BUN）表达水平。

1.3 观察指标

统计分析两组HE4、SCr、BUN表达水平及研究组不同临床分期HE4、SCr、BUN表达水平。

1.4 统计学分析

采用SPSS21.0统计学软件分析数据，计量资料用（x±s）表示，组内比较用方差分析，组间比较用t检验。慢性肾脏疾病诊断中HE4、SCr、BUN的应用价值用受试者工作曲线（ROC）及曲线下面积（AUC）比较，检验水准α=0.05。

2 结果

2.1 两组血清HE4、SCr、BUN表达水平比较

研究组患者的血清HE4、SCr、BUN表达水平均显著高于对照组（P<0.05），见表1。

表1   两组血清HE4、SCr、BUN表达水平比较（x±s）

2.2 研究组不同临床分期患者的血清HE4、SCr、BUN表达水平与对照组比较

研究组临床分期1～2期、3期、4期、5期患者的血清HE4、SCr、BUN表达水平逐渐升高（P<0.05），均显著高于对照组（P<0.05），见表2。

表2   研究组不同临床分期患者的血清HE4、SCr、BUN表达水平与对照组比较（x±s）

2.3 慢性肾脏疾病诊断中HE4、SCr、BUN的应用价值比较

慢性肾脏疾病诊断中HE4、SCr、BUN的AUC逐渐降低（P<0.05），见表3、封三图1。

表3   慢性肾脏疾病诊断中HE4、SCr、BUN的应用价值比较

3讨论

慢性肾脏疾病具有较为隐匿的发病，早期临床症状不典型，通常情况下具有正常的尿液及血清检测结果，因此临床很有必要早期诊断与防治慢性肾脏疾病。目前，在全球范围内，慢性肾脏疾病已经成为严重的健康卫生负担，其具有较高的发病率、病死率，但是全社会对其具有较低的知晓率、防治率[3]。原发性肾小球疾病是成年人慢性肾脏疾病的主要病因，而先天性肾脏与尿路畸形则是儿童慢性肾脏疾病的主要病因[4]。近年来，我国其他继发性慢性肾脏疾病发病率在不断改变的人群饮食结构与生活习惯的作用下也日益提升，同时，目前医疗水平有限，造成我国防治慢性肾脏疾病的形势严峻[5]。近年来，美国肾脏病基金会K/DOQI专家组对慢性肾脏疾病的分期方法提出新的建议[6]，其认为慢性肾脏疾病1期指GFR在90 mL/min以上且伴肾病，目的为对认知与早期防治慢性肾脏疾病的力度进行强化。

在对GFR进行了解的过程中，血肌酐（SCr）是临床通常采用的指标，其能够有效反映肾功能，肾功能损伤的一个重要指征就是SCr水平提升[7]。但是，性别、年龄、饮食、体质等因素均会对SCr水平造成影响，其无法准确反映肾功能，尤其是不太敏感的早期肾功能损伤[8]。人附睾蛋白4（HE4）属于一种蛋白酶抑制剂，和精子成熟的关系极为密切，最早从附睾远端上皮细胞中被发现，生理情况下能够表达于肾脏远曲小管、上呼吸系统、乳腺上皮、生殖系统等组织中，在移行细胞癌、肺癌、卵巢癌、子宫内膜癌、乳腺癌等恶性肿瘤中均具有显著较高的表达[9]。在卵巢癌的诊断中，HE4的敏感度与特异度尤其高，已经成为临床采用的新的肿瘤标志物[10]。近年来，相关医学研究表明[11]，肾功能和HE4水平有一定的相关性，但是尚缺少相关医学研究报道。

HE4属于一种新型肿瘤标志物，相关医学研究表明，通常情况下，胃癌、结肠癌、肺癌、胰腺癌、乳腺癌、卵巢癌等肿瘤有染色体10q12突变，而HE4基因在染色体20q12-13.1上分布，因此普遍认为肿瘤的发生受到HE4直接而深刻的影响。现阶段，临床普遍认为，HE4属于一种新型肿瘤标志物，在诊断、治疗卵巢癌、评估患者预后的过程中，HE4发挥极为重要的作用，在诊断卵巢癌的过程中，与传统卵巢癌诊断指标CA125相比，HE4一方面具有较高的灵敏度，另一方面还具有较高的特异度。但是，临床并没有考虑肾功能对HE4检测的影响，也较少有相关医学研究报道肾脏与HE4的相关性。

通常情况下，在卵巢癌的诊断中，HE4是临床采用的肿瘤标志物，正常生理情况下人体具有极低的HE4表达，但是卵巢癌患者血清与组织中则有极高的HE4表达，因此在早期诊断、鉴别、治疗卵巢癌及评估患者预后的过程中可以得到有效应用[12-15]。相关医学研究表明[16]，在卵巢癌的诊断中，与单独糖类抗原125（CA125）检测相比，HE4联合CA125检测具有显著较高的阳性率，达到92.39%。近年来，相关医学研究表明[17]，HE4也表达于肾脏远曲小管组织中，与肾功能损伤、肾纤维化等的关系均极为密切。因此，在对HE4结果进行分析的过程中应该给予肾功能受损的可能以充分考虑。

肾功能滤过与重吸收功能在其受到损伤的情况下受到影响，HE4是一种分泌型糖蛋白，相对分子质量为3kD，是一种小分子物质，编码基因为乳清酸性蛋白，随着肾功能损害程度的加重，其水平会逐渐提升。相关医学学者对恶性疾病423例（卵巢癌127例）、良性病变535例（妇科良性疾病292例）、健康人101例的CA125、HE4水平进行了比较，结果表明，良性疾病、健康人中HE4异常率分别为12.3%、1.1%，前者显著高于后者，发生这一现象的原因主要为肾功能衰竭，肺癌、妇科腫瘤中具有异常升高的HE4浓度，但是，该研究并没有对慢性肾脏疾病各临床分期与HE4的相关性进行探讨。相关医学学者对无肺癌与卵巢癌的慢性肾脏疾病患者113例、具有正常肾功能与卵巢功能的人群68例的HE4进行了研究，结果表明，慢性肾脏疾病患者的HE4浓度显著高于正常人群，即便是早期慢性肾脏疾病患者，其血清HE4水平也显著高于正常人群，同时，随着慢性肾脏疾病临床分期的提升，血清HE4水平逐渐提升。

相关医学学者对研究对象进行彩色多普勒超声、影像学检查[18]，将肺癌、卵巢癌等肿瘤排除，从而将肿瘤引发的HE4提升排除，发现慢性肾脏疾病患者的血清HE4表达量在130.1～659.5 mIU/L之间，平均为388.2 mIU/L;对照组的血清HE4表达量在32.77～48.17 mIU/L之间，平均为38.1 mIU/L，前者显著高于后者。依据内生肌酐清除率分不同肾功能损害患者为五组，结果表明，HE4浓度随着慢性肾脏疾病临床分期的提升而提升，随着慢性肾脏疾病临床分期的降低而降低，呈显著正相关关系，以此认为慢性肾脏疾病的发展与HE4水平的提升具有极为密切的关系。相关医学研究也表明[19]，慢性肾脏疾病患者肾功能状态与HE4变化具有极为密切的关系，在检测肿瘤指标的过程中应该给予肾功能受损情况以充分考虑，从而对误诊的发生进行有效避免。在诊断慢性肾脏疾病的过程中，HE4的诊断效果较高，可以作为一种新型早期诊断指标。相关医学研究表明[20]，在慢性肾脏疾病严重程度、病情进展的评估中，可以将HE4作为血清学标志物。同时，在慢性肾脏疾病的诊断中，和SCr、BUN相比，HE4具有较高的诊断价值，辅助诊断价值极高。本研究结果表明，研究组患者的血清HE4、SCr、BUN表达水平均显著高于对照组（P<0.05），临床分期1～2期、3期、4期、5期患者的血清HE4、SCr、BUN表达水平逐渐升高（P<0.05），均显著高于对照组（P<0.05）。慢性肾脏疾病诊断中HE4、SCr、BUN的AUC逐渐降低（P<0.05），与上述相关医学研究结果一致。

总之，人附睾蛋白4在慢性肾脏疾病中的表达水平提升，能对慢性肾脏疾病及其临床分期的诊断提供有效依据，具有较高的诊断应用价值，值得在临床推广应用。

[参考文献]

[1] 安黎云，汤菲，贾克然，等.慢性肾脏疾病患者人附睾蛋白4和CYFRA21-1水平的变化及临床诊断价值[J].检验医学与临床，2016，13（14）：1946-1948，1952.

[2] 武炜，段巧艳，刘小军，等.血清HE4及CA125在慢性肾脏疾病中的诊断价值[J].中国临床实用医学，2017，8（2）：48-52.

[3] 王晓亮，赵英水.人附睾分泌蛋白4在各分期慢性肾脏疾病患者血清中变化及临床价值[J].安徽医药，2016， 20（11）：2078-2081.

[4] 汪光蓉，夏静若，卢小岚，等.慢性肾脏病患者血清HE4与CA125的变化及临床意义[J].检验医学与临床，2016， 13（11）：1504-1506.

[5] 李安平，刘洪梅，李婵，等.血清ProGRP和HE4在慢性肾脏病患者中的临床意义[J].标记免疫分析与临床，2017， 24（10）：1123-1125.

[6] 杨晓霞，柏明，刘丽敏，等.慢性肾脏病患者血清人附睾蛋白4与疾病进展的关系[J].肾脏病与透析肾移植杂志，2016，25（2）：128-133.

[7] 刘建林，王慧超，李铁军，等.杞县地区慢性肾脏病发病率及病因流行病学调查[J].中国现代医生，2015，53（23）：122-124.

[8] 郏鹏，黄丹江，黄勇，等.DWI在慢性肾脏病诊断中的应用[J].中国现代医生，2015，53（30）：97-100.

[9] Ferraro S，Pasqualetti S，Carnevale A，et al.Cystatin C provides a better estimate of the effect of glomerular filtration rate on serum human epididymis protein 4 concentrations[J].Clin Chem Lab Med，2016，54（10）：1629-1634.

[10] Yuan T，Li Y.Human epididymis protein 4 as a potential biomarker of chronic kidney disease in female patients with normal ovarian function[J].Lab Med，2017，48（3）：238-243.

[11] 鄒汉良，杜玉开，杨娟，等.人血清附睾蛋白4诊断卵巢癌的相关影响因素分析[J].中国妇幼保健，2017，32（4）：671-675.

[12] Aljuhayman A，Abunohaiah I，Addar A，et al.Assessment of lower calyceal single-access percutaneous nephrolithotomy for staghorn stones：A single-surgeon and a single-center experience at KAMC，Riyadh[J].Urol Ann，2019， 11（1）：62-65.

[13] Ling L，Yang M，Ding W，et al.Ghrelin attenuates UUO-induced renal fibrosis via attenuation of Nlrp3 inflammasome and endoplasmic reticulum stress[J]. Am J Transl Res，2019，11（1）：131-141.

[14] Ali BH，Al Salam S，Al Suleimani Y，et al.Effects of the SGLT-2 inhibitor canagliflozin on adenine-induced chronic kidney disease in rats[J].Cell Physiol Biochem，2019， 52（1）：27-39.

[15] Said M，Omar H，Soliman Z，et al.Ritonavir-boosted paritaprevir，ombitasvir plus ribavirin could improve eGFR in patients with renal impairment and HCV：An Egyptian cohort[J].Expert Rev Gastroenterol Hepatol，2019，13（1）：89-93.

[16] Bao X，Borné Y，Muhammad IF，et al.Complement C3 and incident hospitalization due to chronic kidney disease：A population-based cohort study[J].BMC Nephrol，2019，20（1）：61.

[17] Alzaghari O，Wallace DC.The Impact of physiological factors on 30-day unplanned rehospitalization in adults with heart failure[J].J Community Health Nurs，2019，36（1）：31-41.

[18] Angkananard T，Anothaisintawee T，Ingsathit A，et al. Mediation effect of neutrophil lymphocyte ratio on cardiometabolic risk factors and cardiovascular events[J]. Sci Rep，2019，9（1）：2618.

[19] Karamched SR，Nosoudi N，Moreland HE，et al.Site-specific chelation therapy with EDTA-loaded albumin nanoparticles reverses arterial calcification in a rat model of chronic kidney disease[J].Sci Rep，2019，9（1）：2629.

[20] Gupta S，Goyal P，Feinn RS，et al. Role of vitamin D and its analogues in diabetic nephropathy：A Meta-analysis[J].Am J Med Sci，2019，357（3）：223-229.

（收稿日期：2019-01-29）