红掌的组织培养技术

张晓英，谢炳乾，郭 伟

(陕西省苗木繁育中心，陕西 眉县 722305)

红掌(Anthuriumandraeanum)又称安祖花、花烛、灯台花、火鹤、红鹤芋等,属天南星科花烛属多年生高档室内观赏草本植物, 原产于欧洲荷兰等地，一直受到世界各地的广泛喜爱，曾有“花卉皇后”之称[1]。引入我国栽培后，种苗一度依赖进口，生产成本极高，为解决这个难题，陕西省苗木繁育中心自2003年就开始进行了红掌组培技术攻关，掌握了以叶片为外植体的组织培养快速繁殖关键技术，该技术材料来源广，不伤害植株，短期内可生产出大量优质商品苗。生产的红掌种苗已远销全国各地，现就有关技术总结如下。

1 组培材料的选择与处理

1.1 外植体的选择

外植体来自陕西省苗木繁育中心温室，选取株型好、花朵大、花色鲜艳、健壮无病害植株上刚展开3～5 d的新叶。取叶片时小心、不损害叶片。

1.2 外植体消毒

将取来的叶片用洗洁精洗干净，在流水下冲洗1～2 h后，在无菌环境下，用75%的酒精浸泡30 s，然后用HgCl2溶液浸泡叶片8 min，消毒过程中不停震荡，之后用无菌水冲洗5次，冲洗时轻轻摇动。

1.3 愈伤组织培养基配置

红掌愈伤组织诱导的最佳培养基为MS培养基，初选的激素组合及浓度配比为：①BA 1.0 mg·L-1+2,4D 0.1 mg·L-1，②BA 1.5 mg·L-1+2,4D 0.15 mg·L-1，③BA 2.0 mg·L-1+2,4D 0.2 mg·L-1；培养基配置时1 L激素组合中加入糖30 g、琼脂5 g。

经观察，③组合有愈伤组织长出，其余不明显，所以选③组合。

1.4 接种

消毒好的叶片放到接种盘中，用消毒过的滤纸将叶片上的水吸干，然后切成0.5 cm×0.5 cm小块并放到已做好的愈伤培养基中。为避免相互感染每瓶放1个外植体。

2 愈伤组织的诱导

接种后接种盘放到黑暗处培养，温度27～30 ℃，15～20 d后叶片开始膨大，叶边缘出现黄色粒状愈伤组织，之后再继续进行光照培养，光照强度1 100～1 500 Lx，光照8～12 h·d-1，30～40 d后叶片边缘愈伤组织增大。继续培养中，将部分干死或污染的叶片淘汰；等到叶片边缘愈伤增大到原来的2/3时，将愈伤取出放到芽诱导培养基中。

3 不定芽的诱导及增殖培养

3.1 不定芽的诱导

将培养2个月的叶片愈伤组织，分别转至4种不同浓度的培养基中:①1/2 MS+BA 0.5 mg·L-1+NAA 0.3 mg·L-1,②1/2 MS+BA 0.6 mg·L-1+NAA 0.2 mg·L-1,③1/2 MS+BA 1.0 mg·L-1+NAA 0.3 mg·L-1,④1/2 MS+ BA 2.0 mg·L-1+NAA 0.25 mg·L-1；除激素及其浓度外，培养基配置方法与愈伤组织培养基相同。40～50 d后观察愈伤已长出小芽，其中③组合中小芽最多，诱导芽效果最好，所以选择③组合。

3.2 芽的增殖培养

当小芽长到1cm时切下，放到3种芽增殖培养基中，① MS+ BA 1.0 mg·L-1+IBA 0.1 mg·L-1，②MS+ BA 2.0 mg·L-1+IBA0.2 mg·L-1，③MS+ BA 3.0m mg·L-1+IBA 0.2 mg·L-1，一个月后观察③组合效果最好，增殖系数达到300%。

增殖培养时，选用丛芽(3～5个)带愈伤组织的自然切块接种方式，芽增殖效果明显优于单芽带愈伤的接种方式。继代培养中，随继代次数增加，芽增殖系数提高，当增殖继代6次时芽分化系数最高，6代后分化系数增加不明显，丛芽生长状态变差。

4 诱导生根

接种生根时选壮苗即有三片叶子、高度1.5 cm的幼苗，接种于1/2MS+NAA0.5 mg·L-1生根培养基,生根率可达99%，生根质量好；将弱苗放到复壮培养基中培养，复壮培养基用MS培养基即可，不需加激素，30 d后苗茎杆变粗，叶片变大，这时再继续接种生根。一般接入生根培养基中10～15 d左右就有根长出，15～20 d就达到3条根以上，根长0.5～1 cm，这时就可开始炼苗，炼苗前要做好准备工作(基质的配比、消毒)。

5 移栽与炼苗

出瓶移栽前，将培养瓶从培养室移至温室放置一周。这时对培养瓶苗适当遮光，温度27℃(最好是恒温)，晚间温度22～24 ℃，湿度70%～80%。一周后打开瓶盖，再等待约2～3 d后从瓶中取出小苗，置于600～800倍百菌清溶液中，洗净根部的琼脂，将苗栽到配置好的基质中(基质预先用1/1000的高锰酸钾液消毒2 h，沥干备用)，前期小苗要遮阴，定期喷施杀菌剂(多菌灵或百菌清)护苗防病。勿施肥，大约20 d左右新根即可发育，1个月后，植株可长出新叶片。这时逐步提高光照到5 000 lx，开始向正常生产管理过渡。炼苗成活率可达到97%以上。

实践表明，红掌组织培养周期长及愈伤诱导，一但愈伤诱导出新芽后它的繁殖速度非常快，增殖系数高，很快就可以达到规模化生产，每年可生产生根苗300株万上。