基层牧区羊布鲁氏杆菌病的检测与预防

傲腾其木格

（乌拉特中旗川井苏木农牧业服务中心，内蒙古乌拉特中旗 015321）

世界动物卫生组织（OIE）将布病列为B类动物疫病，我国将布病列为二类动物疫病。

1 病原

布鲁氏杆菌（brucella）为不可运动的小球杆菌，革兰氏染色呈阴性，大小为0.6～1.5μm×0.5～0.7μm，散在分布，无芽孢及鞭毛，在条件不利时有形成荚膜的能力。本菌难以着色，姬母萨染色呈紫色。本菌为需氧兼性厌氧菌，对营养要求高，在普通培养基上生长较差。生长最佳温度为37℃，pH为6.6～7.4。

布鲁氏杆菌属目前共有六个种，即马耳他布鲁氏杆菌（Brucella melitensis）、流产布鲁氏杆菌（Br.abortus）、猪布鲁氏杆菌（Br.suis）、沙林鼠布鲁氏杆菌（Br.neotomae）、绵羊布鲁氏杆菌（Br.ovis）和犬布鲁氏杆菌（Br.canis）。习惯上称马耳他布鲁氏杆菌为羊布鲁氏杆菌，流产布鲁氏杆菌为牛布鲁氏杆菌。

本菌不产生外毒素，但有毒性较强的内毒素。不同菌种的菌株之间毒力差异较大，一般来说，羊布鲁氏杆菌毒力最强，猪布鲁氏杆菌次之，牛布鲁氏杆菌较弱。各型布鲁氏杆菌虽有其主要的宿主动物，但普遍存在宿主转移现象。

本菌对外界环境的抵抗力较强，在水和土壤中能存活72～114d，在粪尿中存活45d，在乳内能生存60d，在冷暗处的胎儿体内可活六个月。

但对湿热较敏感，60℃30min、70℃5～10min可杀死本菌。对消毒剂抵抗力不强，1～3%石炭酸、2～3%煤酚皂液、0.1%升汞、2%苛性钠溶液，1h可杀死本菌；1～2%甲醛溶液3h或5%新鲜石灰溶液两小时也可杀死本菌，0.1%新洁尔灭5min内可将其杀死。

2 流行病学

2.1 易感动物

布病可感染多种动物，布鲁氏杆菌主要会引起对应动物的布病，也可发生交叉感染，自然感染主要侵害羊、牛和猪。羊、牛和猪布鲁氏杆菌均能引起人感染布病，但以感染羊布鲁氏杆菌后发病最严重，猪次之，牛最轻。通常母畜比公畜更易感，成畜比幼畜更易感。

2.2 传染源

病畜及带菌动物为布病主要的传染源。病母畜在流产时，布鲁氏杆菌会大量随流产胎儿，胎衣、胎水和阴道分泌物排出。同时，布鲁氏杆菌还能通过乳汁、精液、粪便排出污染环境[6]。

2.3 传播途径

布病的主要传播途径为消化道、生殖道（交配）和皮肤与粘膜（布鲁氏杆菌可通过正常无损伤的皮肤粘膜引起感染）。

2.4 流行特点

初次妊娠的母畜易感染发病，大多数只发生一次流产。在老疫区，发生流产的较少，多数为发生子宫炎、乳房炎、关节炎、胎衣不下及久配不孕的病畜。在新疫区，孕畜均发生流产，呈暴发性流行[7]。

2.5 临诊症状及病理变化

2.5.1 临诊症状

布病潜伏期为两周至半年。妊娠母畜的主要症状为流产。流产多发生于妊娠第6～8个月（牛）、第3～4个月（羊）、第4～12周（猪）。流产前主要表现为阴唇和阴道粘膜红肿，从阴道流出灰白色或浅褐色黏液，乳房肿胀，泌乳量减少，继而发生流产。有时会无先兆而突然发生流产。流产胎儿多为死胎，弱胎，多数病畜流产后还会伴随胎衣不下（牛）或从阴道流出红褐色恶臭分泌物，恶臭往往持续1～2周，如不伴发慢性子宫炎，即可自愈。公畜发生睾丸炎和附睾炎，表现为睾丸肿大，有热痛反应，非妊娠畜，常发生滑液囊炎、脓肿和关节炎，表现关节肿胀，疼痛，喜卧，跛行[7]。

2.5.2 病理变化

流产的胎儿，皮下、肌间有浆液性浸润，胸、腹腔积有淡红色液体，内混有纤维素，脾、肝和淋巴结肿胀，有的可见到炎性坏死灶，第四胃中有淡黄色或白色粘液样絮状物，胃肠和膀胱粘膜有小出血点。胎衣呈黄色胶样浸润，有些部位附有纤维素絮状物和脓液，有的胎膜增厚，有出血点，绒毛叶充血，肿大，或呈黄褐色，上附灰色或黄绿色污秽的渗出物和纤维素。

母畜子宫粘膜变厚，上附有分泌物，与绒毛膜之间有淡黄色不结的渗出物和脓块，绒毛膜上多数有出血点。

病公畜精囊内可能有出血点和坏死灶，在睾丸和附睾丸有炎性坏死灶和化脓灶，有时整个睾丸发生坏死。慢性病例的睾丸和附睾，由于结缔组织增生，变硬。此外病畜关节和关节周围呈现慢性炎症肿胀[8]。

3 布病的危害

3.1 对动物的危害

主要侵害动物的淋巴系统和生殖系统。临床表现为母畜流产、胎儿成活率降低，且常引起子宫炎。对公畜来讲，常引起睾丸炎和附睾炎，造成无精症影响生殖能力。布病一年四季均可发生，多以夏秋季节发病率较高，常呈地方性流行[9]。

3.2 对人的危害

人类普遍易感染布病，感染后会出现比家畜更为严重的症状。人感染布病，潜伏期最短的仅三天，少数患者潜伏期可长达数月或一年以上，多数潜伏期在7～60天，平均潜伏期为2～3周，在临床上可分为急性期和慢性期。急性发作时，大多表现为波浪热，感觉多汗、身体困倦、疲乏无力，食欲减少，关节和肌肉疼痛难忍，不能劳动，头痛、坐骨神经痛，出现皮疹、淋巴结肿大、肝脏肿大及肝功能异常，同时还会影响生育功能。女性患者会发生卵巢炎、输卵管炎及子宫内膜炎，孕妇可导致流产，个别严重者可能会导致死亡。人类感染布病将会严重影响生活、工作。该病病情顽固，重在预防。慢性病例主要的病情长达1年以上，也可无明显急性病史，发现时主要表现为疲乏无力、低热、出汗、抑郁、头痛、烦躁[10]。长期与家畜打交道的人群更易感染，如饲养管理人员、屠宰场工作人员、兽医人员、实验室检测人员等，此类人群应更注重布病防护工作。

4 布病的诊断

包括临诊、流行病学、病理学、细菌学和免疫学诊断。布病依据临床症状、病理变化、流行病学可做出初步诊断，确诊需进一步做血清学诊断或病原分离。

4.1 临诊及流行病学诊断

妊娠母畜发生流产，且多发生于初次妊娠母畜，多数只流产一次，流产后常伴随胎衣不下，子宫炎，屡配不孕等症状，有的还有关节炎表现，公畜主要表现睾丸炎症状[11]。

4.2 病理解剖学诊断

胎儿皮下水肿，体腔有淡黄色液体，实质器官变性坏死，胃肠出血，胎衣、绒毛叶、子宫粘膜出血、坏死和糜烂[12]。根据以上临诊诊断、流行病学、病理学特点可怀疑为布病。确诊需进行细菌学及免疫学检查。

4.3 细菌学诊断

取胎衣、绒毛叶渗出物，胎儿胃内容物，水肿液、胸、腹水等，制成涂片，用柯兹罗夫斯基染色法染色、镜检，可见单个，成对或成堆存在的红色球杆状细菌，其他细菌被染成绿色或蓝色。

4.4 免疫学检查

（1）血清凝集实验具有很高的特异性和敏感性。常用的方法有试管凝集反应，平板凝集反应和虎红平板凝集反应。

（2）补体结合反应本法具有很高的特异性，但其操作复杂，现在很少使用。

（3）全乳环状实验此法操作简便，敏感性高，可用于混合牛乳的普查，判定牛群是否存在布病。

（4）变态反应可用于检查犊牛、羊和猪，在牛尾根皮内注入0.2ml流产布氏杆菌菌素，阳性者24h内出现红肿，阴性者无任何变化。

通常病畜首先出现凝集反应抗体，并消失较早，其次出现补体结合反应抗体，消失较晚，最后出现变态反应，持续时间最长。如凝集反应阳性，而补体结合反应阳性或阴性而变态反应阴性时，说明布氏杆菌病的发生为初期阶段，凝集反应呈阴性而补体结合反应、变态反应均呈阳性时，说明布氏杆菌病的发生已到停止阶段，凝集反应和补体结合反应同时呈现阴性而变态反应为阳性时，说明布氏杆菌的发展已进入康复阶段[13]。

根据布氏杆菌病所具有的免疫学特性，在诊断时需根据具体情况应用凝集反应，补体结合反应和变态反应方法，进行检查以确定畜群中的布氏杆菌病畜的情况。

5 布病公共卫生

人感染布病，主要人群为畜牧兽医工作人员和饲养管理人员，其次为屠宰加工人员、实验室检测人员和经常食用畜产品的人员。

由于经常接触病畜及其产品，特别是在助产时接触胎儿、胎衣、羊水、阴道分泌物等引起感染，也可通过食入被污染的食物而感染发病。此类人群在与病畜接触时应注意做好自身的防护工作，避免直接接触流产畜的胎儿、羊水、胎衣、阴道分泌物等物；注意做好消毒工作，对相关工作人员应该进行定期体检，发现发病人员时应及时治疗并调离工作岗位等。

6 实验室检测

6.1 实验原理

实验室常用虎红平板凝集试验（RBPT）检测布病。其原理为利用细菌、立克次氏体等相应抗原抗体可以在体外发生特异性结合并呈现肉眼可见的现象，用已知抗原（或抗体）检测未知抗体（或抗原）。

6.2 实验材料

可调节取样器、布病虎红平板凝集试验抗原、待测血清、虎红平板凝集试验检测卡片（1×1cm，50格）

待测血清、布病虎红平板凝集试验抗原由内蒙古阿拉善盟阿左旗兽医工作站提供。

待测血清应新鲜，无明显蛋白凝块、溶血现象和腐败气味。抗原使用前应充分摇匀，若抗原被污染或出现摇不散的凝集块不可使用。

6.3 实验方法

吸取待测血清30μl滴于虎红平板凝集试验卡片，换枪头吸取30μl抗原于待测血清旁，用枪头混匀，不停晃动混合液，在4min内观察现象并记录。

6.4 判定方法

若在4min内出现大的凝集片或小的颗粒则为阳性，若为颜色均一的淡粉色浑浊液体，则为阴性。阳性血清需进行试管凝集实验复检。

7 布病的预防措施

7.1 无病地区的预防措施

坚持自繁自养，避免引入病畜。必须引入时，应从无病地区选购并进行严格的检疫，确认为健康无病畜时，才能与当地畜群混群饲养。每年应对畜群进行检疫和疾病监测，以便及时发现病畜，可用血清凝集实验进行检查。畜群发生原因不明的流产时，应立即隔离病母畜，对流产物污染的环境和用具进行彻底消毒，对流产胎儿和母畜进行血清学检验，如为布氏杆菌病阳性则按病畜处理。

7.2 污染地区的防疫措施

（1）定期检疫。对畜群进行定期检疫，对检出的病畜要严格隔离饲养，严禁与健畜接触，引入的牲畜也要进行检疫，健康种公畜才能作为种用。

（2）检疫净化。对病畜群，进行反复多次检疫，病畜淘汰，阳性畜隔离饲养，继续利用，逐步淘汰，阴性继续检疫，直至全群均为阴性。如阳性畜数量少，也可淘汰处理。

（3）培养健康幼畜。如阳性畜数量大，母畜可用无病种公畜的精液人工授精，母畜产前、产后要对母畜体躯和产房环境进行彻底消毒，幼畜出生后，立即与母畜隔离，喂初乳5～7d，以后喂健康乳或消毒乳，一年内检疫2～3次，如检疫均为阴性，则可送入健康畜群饲养，如为阳性，则应淘汰。

（4）免疫接种。对布病常在的畜群，应进行免疫接种进行免疫预防。

（5）加强消毒和兽医卫生措施。对被污染的牛舍、运动场、饲槽、水槽、奶具和管理用具，要及时消毒，特别是对产房要注意消毒，对流产胎儿、羊水、胎衣、阴道分泌物等要经消毒后妥善处理，粪便垫草烧毁。

8 讨论和建议

针对阳性血清，应及时找到对应羊并进行扑杀，同时做好环境消毒等的防护工作；实验过程中所使用的器械应注意消毒，一次性器具及血清应及时销毁。作为基层牧区要想在布病防控方面取得较好的效果需要做到以下几点：

（1）乡镇、苏木政府重视布病防控，明确嘎查对养殖户的监督责任。

（2）牲畜提倡自繁自养，禁止从外地调入。确实要调入的，按相关法律法规进行申报、检疫、隔离、观察。

（3）领导以身作则，任何领导不以任何方式为调入的牲畜免检开绿灯。

（4）种畜必须持有健康档案，定期检测疫病。

（5）消毒灭源。督促养殖户清理圈舍，在6～8月的高温季节，雇佣洒水车对养殖环境进行消毒。

（6）强制扑杀程序与分工确定。

（7）充分发挥指定通道作用。只有经过指定通道进入的动物及动物产品，才是合法进入，否则给与处罚。

（8）经常宣传个人防护意识。如接羔季节不去势；工作期间不吃喝、抽烟；不将胎衣、流产胎儿喂狗；禁止流浪猫狗出入养殖场。

（9）坚持布病疫点回访。

（10）地理环境。