FBXL5在乳腺癌细胞侵袭和转移中的作用研究

谢忠民，朱 旬*

（1.盐城市妇幼保健医院乳腺外科，江苏 盐城 224002； 2.苏州大学附属第二医院普外科，江苏 苏州 215006）

FBXL5在多种癌细胞系中异常表达，其可以识别和降解多种癌蛋白，从而参与上皮间质转化(EMT)、DNA损伤修复、转录调控等过程，参与对肿瘤发生发展的调控[1]。本实验旨在探讨FBXL5在三阴性乳腺癌组织中的表达情况，并探索其机制与价值。

1 资料和方法

1.1 一般资料

收集2014年8月～2017年8月盐城市妇保院收治的病理学检查证实的女性乳腺癌患者36例，术中选取癌组织（实验组）及癌旁3 cm以上病理学检测为正常组织（对照组）各一块，大小约0.5×0.5×0.2 cm，并将新鲜标本妥善冻存于-80℃冰箱内。患者术前均未接受全身放化疗、内分泌等治疗。

1.2 细胞的培养及转染

MDA-MB-231乳腺癌细胞在含10%的小牛血清的培养基中培养，稳定传代。

1.3 侵袭实验

在细胞转染后进行Transwell小室迁移实验。

1.4 划痕实验

使用ImageJ软件计算细胞愈合率

1.5 蛋白表达测定

乳腺癌、癌旁组织及细胞组织裂解，收集蛋白。

1.6 统计学分析

实验采用SPSS 17.0软件统计分析。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 FBXL5的mRNA和蛋白水平在乳腺癌细胞及正常组织细胞中表达水平

结果发现FBXL5在乳腺癌组织中的蛋白水平表达量（0.076±0.018）明显低于癌旁组织中的（0.150±0.020）蛋白表达量，且表达差异具有统计学意义（P＜0.05）。运用RT-PCR的方法检测了36例癌组织与癌旁组织中的FBXL5的mRNA水平，结果发现，FBXL5的mRNA水平在癌组织中降低，且差异有统计学意义（P＜0.001）。

2.2 FBXL5蛋白水平在不同分子分型的细胞系中表达

本实验分别对4个不同分子分型的细胞系中表达的FBXL5进行检测。结果发现，其在三阴性乳腺癌细胞中，FBXL5的表达水平降低最明显，且差异具有统计学意义（P＜0.05）。

3 讨 论

乳腺癌是女性高发的恶性肿瘤，严重威胁女性健康。三阴性乳腺癌较其他类型乳腺癌有更强的转移能力。其最重要的是EMT过程，使得细胞迁移能力增强。因此，对肿瘤细胞EMT过程中发挥关键调控作用的因子及机制进行研究，有重要意义

E3泛素连酶泛素化修饰密切参与了细胞周期调控、DNA修复及免疫等过程。已有研究发现，FBXL5在胃癌、肺癌等癌细胞系中异常表达，FBXL5在乳腺癌中的表达及研究甚少，故本实验主要为探讨FBXL5在三阴性乳腺癌组织中的表达情况，并探索其机制与治疗价值。本研究发现，过表达FBXL5可以抑制三阴性乳腺癌细胞的侵袭及转移能力。

总之，我们发现FBXL5参与了对肿瘤EMT的调控，其可能的机制是抑制MAPK通路的活化，调节E-cadherin及Vimentin的表达而实现的。我们的研究可能为抑制乳腺癌的EMT提供新的干预靶点，而提高乳腺癌患者的预后。