NGF在子宫内膜异位症疼痛患者血清及腹腔液表达的临床意义

张黎敏 陈丽红 福建医科大学附属第一医院妇科 （福建 福州 350005）

内容提要： 目的：探讨子宫内膜异位症（Endometriosis，EMT）患者血清及腹腔液中神经生长因子（Nerve Growth Factor，NGF）的表达及意义。方法：选择2016年10月～2017年10月福建医科大学附属第一医院确诊EMT患者25例为EMT组，按视觉模拟评分法（VAS）分为轻度疼痛9例，中度疼痛10例，重度疼痛6例。选取除外内异症、无疼痛症状的卵巢良胜肿瘤、CINⅢ级或输卵管积水等患者25例为对照组。ELISA检测EMT组、对照组患者血清及腹腔液中NGF含量。结果：EMT组患者血清和腹腔液中NGF水平均高于对照组，差异均有统计学意义（P＜0.05），重度疼痛患者较轻度疼痛、中度疼痛患者患者血清和腹腔液中NGF显著增加，差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论：EMT组患者血清和腹腔液中NGF均明显高表达，NGF水平的改变与EMT疼痛的发生有关。

子宫内膜异位症（Endometriosis，EMT）是育龄妇女中发病率高，危害性大的一类疾病，可引起不孕、月经异常等，但疼痛常是EMT患者最突出、典型的症状，患者中慢性盆腔痛及痛经发病率为50%～90%[1]。EMT组织可以分泌神经生长因子（Nerve Growth Factor，NGF），NGF作为一种疼痛介质，可介导EMT疼痛的发生。本研究拟通过检测EMT患者血清及腹腔液NGF变化来探讨EMT疼痛发生的机制。通过检测EMT患者NGF水平升高，探讨它们在EMT患者疼痛管理中的作用。

1.资料与方法

1.1 临床资料

选取2016年10月～2017年10月就诊于福建医科大学附属第一医院的患者，并有手术指征患者，经腹腔镜或开腹手术和术后病理检查确诊，分别纳入EMT和对照组。EMT组入选标准：手术确诊内异症患者25例。并对EMT组患者以疼痛程度分级，采用视觉模拟评分法（VAS）[2]，1～3分为轻度疼痛，共9例，4～6分为中度疼痛，共10例，7～10分为重度疼痛，共6例。对照组为除外内异症、无疼痛症状的卵巢良胜肿瘤、CINⅢ级或输卵管积水等患者25例。排除标准：同时合并内异症、子宫腺肌症或伴其他内分泌疾病、术前3个月内接受过激素类药物治疗。患者年龄24～48岁，本研究已获患者知情同意，并经伦理委员会批准。

1.2 方法

血清、腹腔液NGF检测方法：采用ELISA法，450nm酶标仪（南京华东电子科技公司）。采集患者入院后手术前肘部静脉血4mL，术中腹腔积液4mL，以3000r/min离心10min，收集上清液；先加待测液10μL，再加稀释液40μL；每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的NGF抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37˚C水浴锅或恒温箱温育60min。弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次。每孔加入底物A、B各50μL，37˚C避光孵育15min。每孔加入终止液50μL，15min内，450nm酶标仪（南京华东电子科技公司）检测OD值，计算相应浓度。

表1. 两组血清、腹腔液NGF水平比较(n=25,±s,pg/mL)

表1. 两组血清、腹腔液NGF水平比较(n=25,±s,pg/mL)

组别 血清NGF 腹腔液NGF EMT组 56.88±24.01 67.52±27.78对照组 40.76±22.40 45.68±17.01

表2. EMT组不同疼痛分级患者血清、腹腔液NGF水平比较(±s,pg/mL )

表2. EMT组不同疼痛分级患者血清、腹腔液NGF水平比较(±s,pg/mL )

注：与重度疼痛相比，aP＜0.05

疼痛分级 n 血清NGF 腹腔液NGF轻度 9 41.22±13.40a 59.7±23.06a中度 10 52.90±21.87a 57.80±25.08a重度 6 87±7.69 102.6±9.52 F 14.22 7.84 P 0.000 0.03

1.3 统计学分析

采用SPSS23.0统计软件。计量资料以±s表示，组间差异比较采用单因素方差分析，两组间比较采用两样本t检验。检验水准P=0.05，P＜0.05差异有统计学意义。

2.结果

2.1 两组血清、腹腔液NGF水平比较

与对照组比较，EMT组血清及腹腔液NGF水平升高，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

2.2 EMT组轻度疼痛患者血清及腹腔液

EMT组不同疼痛分级患者血清、腹腔液NGF水平比较见表2。

3.讨论

继发性、渐近性痛经是EMT的典型症状，除痛经外，还包括慢性盆腔痛（Chronic Pelvic Pain，CPP）、大便疼痛和性交痛，可呈周期性发作或持续时间长，严重影响育龄妇女的身心健康，并造成严重的社会经济负担[3-5]。临床上对于疼痛的评价常用的是视觉模拟评分法（Visual Analogue Scoring，VAS）[2]，将疼痛的程度用0～10表示，0表示无痛，10代表最痛，患者根据自身疼痛程度选择一个数字代表疼痛程度。缓解疼痛，改善生活质量也是临床治疗的主要目的和重要的评价指标。疼痛的治疗是EMT治疗的关键及难题，现临床药物多种，但目前本病尚无药物能够彻底治愈。

EMT疼痛发生的机制尚不清楚，EMT疼痛患者的免疫机制异常及神经调节日渐关注。赵冬梅等[6]认为炎症介质IL-6在EMT患者血清和组织标本中高表达，揭示了炎症因子促进EMT发生进展的潜在机制。本研究表明，NGF与VAS之间呈相关性（P＜0.05），血清NGF的测定可能提供EMT疼痛检测客观指标。