蒸发光散射检测器和示差检测器应用于食品中三氯蔗糖测定的比较

梁汉旺

深圳市计量质量检测研究院 广东 深圳 518000

三氯蔗糖无臭无吸湿性，甜度是蔗糖的500到700倍，化学名为蔗糖衍生物，经过蔗糖乳化而成，也称为三氯半乳化蔗糖。在进行强力甜味剂的研究过程中，人们普遍认为三氯蔗糖的甜度较高，甜味纯正，容易容易化于甲醇溶液、水、乙醇中。根据欧美发达国家关于三氯蔗糖的安全性的批准原则，被称为最优秀的功能性甜味剂之一。三氯蔗糖的使用范围和限量经过食品添加剂的使用卫生标准的鉴定，在我国已经得到了批准，确认三氯蔗糖使用安全。我国相关的国家标准采用的是蒸发光检测器法、高效液相色谱法，对于三氯蔗糖均能得到很好的分析结果。目前多采用高效液相色谱法离子色谱法等众多方法在研究和检测方面均发挥出有效作用。检测人员日常的检测过程中，一般根据实际情况进行检测方法的选择。

1 试验

1.1 材料与方法 在实验中采用了高效液相色谱仪高效液示差检测器的三氯蔗糖的纯度为99%。HLB固相萃取柱为六毫升，其他添加剂包括亚铁氢化钾、中性氧化铝等，运用实验用水为超纯水。

1.2 实验方法 溶液的配制，放置至室温以酸性溶液，在250毫升烧杯中称取乙酸锌，21.91克，加水约50 ml，加入5 ml的水，溶解后稀释到刻度摇匀，在进行溶解的过程中，使用水稀释达到刻度，精确成三氯蔗糖0.1011g，放置在50毫升烧杯中亚铁氰化钾溶液加水，使得超声溶解到室温，转移到100 ml容器中，称取亚铁氢化钾10.62g。

样品的制备，加入亚铁氰化钾和乙酸锌溶液，使用果冻样品用80℃水，提取5克与50 ml离心管中抽干之后进行纯化摇匀，用水定量至5 ml，下层水浴中80℃，氮气吹到5 ml以下，在零下10℃下，离心旋转五分钟，1万转每分钟转移上清液，到另1A5式ml离心管中，6 ml甲醇洗脱用氮气吹干，加入1 ml 10%已经溶解残渣，用滤网过滤后进行样品溶液的提取，加入甲醇15 ml进行超声，10分钟水平震荡，10分钟转移上清液，在漩涡中转移上清液，放置室温，此方法重复3遍[1]。

仪器条件，在高效液相测普世差检测器中进行进样量的等度洗脱。资生堂色谱柱，规格为150 mm×4.6 mm，5 UM，在高效液相色谱蒸发光检测器中，进行雾化器温度的设定为30℃，液相色谱梯度洗脱程序为零，到8分钟达到10%到30%，到12分钟，达到30%到60%，12到16分钟达到60%到95%，20分钟以上为95%B，增益1.N2流量1.0L每分钟。

2 结果与分析

2.1 经过样品前处理条件较为优化，提取后将提取液半固体食品液体等添加三氯蔗糖食品固体增加不同步骤样品的机制差别较大，此时根据食品的机制不同，直接采用固相萃取小柱进行净化，还有脂肪和蛋白的样品，例如糖果烘烤，食品方便米面等等。在样品的机制差别较大的时候，需要去除蛋白和脂肪，在进行固相萃取小柱净化，再进行溶剂的选择时，机制的差别较大，因此容积的提取效率基本一致，不同比例的甲醇，经过考察发现水、甲醇、乙醇通过实验，在提取效率上均可达到90%以上。

2.2 由于水有良好的浸润效果，用于多类食物在进行三氯蔗糖的提取时，加入5 ml水进行充分浸润，然后加入甲醇，不仅可以初步去除蛋白质，而且可以充分提取果冻样样品。3.21致，仪器条件优化，检出限水平为10 mg每公斤，由于蒸发光检测器需要进行蒸发和物化，因此在进行蒸发和物化的关键步骤上，要进行重复性的视察检测器的检测。而蒸发光检测器首先要将洗脱液雾化形成气溶胶，在加热的过程中进行光散射，侧池中的检测对于不发挥发性溶质颗粒要进行通用性检测，在蒸发光检测器进行检测，液体折光指数差值，检测器是用于视差检测器的，检出限水平为1 mg每公斤，当蒸发温度为80℃时，解除限水平为2 mg每公斤，能够满足检测要求。

2.3 除去蛋白的方法的选择在比较了亚铁氢化钾溶液0.5125 ml各自不同的检测效果之后，发现从沉淀剂加入2 ml以上时，四种不同体积的平均回收率可以达到91%，92%，84%、81%。加入1 ml蛋白沉淀实验进行考察，以调味乳为例，添加量为50 mg，综合考虑0.5 ml的沉淀试剂进行沉淀之后，沉淀层更加紧实，离心后倾到比较松散，后续操作方便。如下表。

三氯蔗糖线性方程、相关系数、检出限和定量限

除去脂肪的方法，对于三氯蔗糖进行去脂，在固相萃取液的流速的控制上需要较慢，对脂肪提取，比较正乙烷和石油醚时，采用正乙烷对脂肪去除更加彻底。净化条件优化后洗脱液的选择是非常关键的，这对于固相萃取技术来说，直接影响到目标物的回收率，而洗脱液的选择使目标物能够从固相萃取液中洗脱，使目标物吸附在固相萃取柱上[2]。淋洗液的远需选择原则，则是要将杂质去除，分别使用10%甲甲醇进行淋洗，使用5 ml水和5 ml10%甲醇依次进行灵犀。此时按照仪器条件进行测定，结果没有得到目标物的情况下，发现淋洗液中有少量的目标物，因此淋洗液也因为5 ml10%甲醇和5 ml水选用甲醇进行洗脱，目标物的洗脱率接近100%，洗脱一的选择非常关键，例如甲醇为5 ml时，将洗脱液的体积设为5 ml，就可满足实验的需求。

结语

根据实验表明，样品机制较为复杂时，一般采用蒸发光检测器进行检验，样品含量较低，从回收率的结果来看，选用机制标准曲线进行比对，发现采用蒸发光散射检测器用于视差检测，对于三氯蔗糖含量较高的样品更为适合。